西红花中西红花苷检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 西红花分析 西红花的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为鸢尾科植物番红花Crocus sativus L.的干燥柱头。 【功能与主治】活血化瘀，凉血解毒，解郁安神。用于经闭癥瘕，产后瘀阻，温毒发斑，忧郁痞闷，惊悸发狂。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(45：55)为流动相；检测波长为440 nm。理论板数按西红花苷-I峰计算应不低于3500。 对照品溶液的制备：精密称取西红花苷-I对照品和西红花苷-Il对照品适量，分别加稀乙醇制成每1 mL含30 pg和12ng的溶液，即得。 供品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约10 mg，精密称定，置50 mL棕色量瓶中，加稀乙醇适量，置冰浴中超声处理20分钟，放至室温，加稀乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取及照品溶液与供试品溶液各10p.L， 注入液相色谱仪，测定，即得。 2.西红花药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中西红花的含量测定以西红花苷-I和西红花苷-II为质量评价依据， 其在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：检测波长在440nm时对照品吸收接近最强，色谱图较优；在流动相组成为甲醇-水系统时，流动相的比例对西红花苷-I和西红花苷-II及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相甲醇的比例在42%左右时，其分离度最好，选择甲醇比例在42~46%(v/v)之间均可以获得较好的分离度及分析效果；柱温对西红花苷-I和西红花苷-II的保留也有较大影响，在30到40℃时样品分离度较好。经过考察，在流动相比例为甲醇-水溶液(42：58)，柱温35℃的色谱条件下，使用Inertsil ODS-3(4.6×150 mm， 5pm)柱能得到较满意的分析效果。使用Inertsil ODS-4柱亦可得到较好分析效果。 西红花 样品来源：本品为鸢尾科植物番红花Crocus sativus L. 的干燥柱头。产地：浙江。 对照品：西红花苷-I(上海同田生物技术有限公司，批号：08060621，含量：95.0%)， 三红花苷-II(上海同田生物技术有限公司，批号：09040925，含量：98.0%)。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约10 mg， 精密称定，置50 mL棕色量瓶中，加稀乙醇适量，置冰浴中超声处理2^分钟，至室温，加稀乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：精密称取西红花苷-I对照品和西红花苷-II对照品适量，分别加稀乙醇制成每1 mL含30 pg和12 ug的溶液，即得。 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 色谱柱： Inertsil ODS-3(4.6×150 mm， 5 um) 推荐使用条件范围： 流动相：甲醇-水(42：58) 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150 mm， 5 pm) 注温：35℃ 流动相：甲醇-水(42：58~46：54) 检测波长：440 nm 柱温：30~40℃ 流速：1.0mL/min 检测波长：440nm 进样量：10uL 流 速：1.0 mL/min 仪器配置： LC-20ADXR高压泵 SPD-M20A二极管列列紫外可见光检测器 DGU-20A，脱气机 CTO-20AC 柱温箱 CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC自动进样器 对照品 对照品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 西红花苷-I 24.418 5808134 88354 3326 1.19 西红花苷-II 47.826 1070340 9337 4341 1.27 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 西红花苷-Ⅰ的标准曲线 重复性数据如下： 西红花苷-1 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 24.415 5815833 24.271 4126377 2 24.418 5808134 24.327 4101250 3 24.429 5813867 24.334 4147822 Average 24.421 5812611 24.311 4125150 RSD% 0.04 0.07 0.15 0.57 西红花苷-Ⅱ的标准曲线 Area 西红花苷-Ⅱ No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 47.826 1070340 47.431 1639328 2 47.814 1092470 47.493 1635660 3 47.847 1081904 47.507 1641803 Average 47.829 1081571 47.477 1638930 RSD% 0.04 1.03 0.09 0.19 浓度 mg/mL *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-3(4.6x150mm, 5um)流动相：甲醇-水(42:58)柱温：3 5 ℃检测波长：440 nm流速：1.0 mL/min进样量：10ul