野马追中金丝桃苷检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 野马追分析 野马追的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为菊科植物轮叶泽兰Eupatorium lindleyanum DC.的干燥地上部分。秋季花初开时采割，晒干。 【功能与主治】化痰，止咳，平喘。用于慢性支气管炎，痰多咳喘。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：：以十八烷基键合硅胶为填充剂，以乙腈-1%乙酸水溶液(10：90)为流动相；检测波长为255 nm。理论板数按金丝桃苷峰计算应不低于8000。 对照品溶液的制备：取金丝桃丝对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含50ug的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约1g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入70%甲醇20 mL， 称定重量，回流提取1小时，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，离心(每分钟3000转)15分钟，精密量取上清液10 mL置蒸发皿中，水浴蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10uL，注入液相色谱仪，测定，即得。 2.野马追药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中野马追的含量测定以金丝桃苷为质量评价依据， 其在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：检测波长在255 nm时对照品吸收接近最强，色谱图较优；在流动相组成为乙腈-1%乙酸水溶液系统时，流动相的比例对金丝桃苷及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相乙腈的比例在15%左右时，其分离度最好，选择乙腈比例在11~16%(v/v)之间均可以获得较好的分离度及分析效果；柱温对金丝桃苷的分离影响不大，在40到50℃时样品分离度较好，分离时间也较短。经过考察，在流动相比例为乙腈-1%乙酸水溶液(13：87)，柱温50℃的色谱条件下，使用Inertsil ODS-3(4.6×150 mm， 5 um)柱能得到较满意的分析效果。 此外，使用Inertsil ODS-4柱亦可得到较好分析效果。 野马追 祥品来源：本品为菊科植物轮叶泽兰Eupatorium lindleyanum DC. 的干燥地上部分。产地：云南。 对照品：金丝桃苷(上海同田生物技术有限公司，批号：09012021，含量：99.1%)。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约1 g， 精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入70%甲醇20 mL，称定重量，回流提取1小污，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，离心(每分钟3000转)15分钟，精密量取上清液10 mL置蒸发，水浴蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即每 对照品溶液的制备：取金丝桃苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含50ug的溶液，即得。 引领分析科技尽在北京谱明-企业QQ：40061 65163 色谱柱： Inertsil ODS-3(4.6×150 mm， 5 um) 推荐使用条件范围： 流动相：乙腈-1%乙酸水溶液(13：87) 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150 mm， 5 um) 柱温：50℃ 流动相：乙腈-1%乙酸水溶液(11：89~16：84) 测波长：255 nm 柱温：40~50℃ 流速：1.0mL/min 检测波长：255nm 进样量：： 10 pL 流速：1.0mL/min 仪器配置： LC-20ADXR高压泵 SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 DGU-20A，脱气机 CTO-20AC柱温箱 CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC 自动进样器 对照品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 金丝桃苷 21.342 3795556 101716 8018 1.21 金丝桃苷的标准曲线 重复性数据如下： 金丝桃苷 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 21.361 3745194 21.359 1241617 2 21.342 3795556 21.405 1243512 3 21.368 3748197 21.375 1245244 Average 21.357 3762982 21.380 1243458 RSD% 0.07 0.76 0.11 0.15 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-3(4.6 x 150 mm, 5um) 流动相：乙腈-1%乙酸水溶液(13:87)柱温：50℃检测波长：255 nm流速: 1.0 mL/min进样量：10ul