萹蓄中杨梅苷检测方案(液相色谱柱)

22 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 萹蓄分析 篇蓄的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为品科植物斗植Polygonum aviculare L. 的干燥地上部分。夏季叶茂盛时采收，除去根和杂质，晒干。【功能与主治】利尿通淋，杀虫，止痒。用于热淋涩痛，小便短赤，虫积腹痛，皮肤湿疹，阴痒带下。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈0.5%磷酸溶液(14：86)为流动相；检测波长为352 nm。理论板数按杨梅苷峰计算应不低于2000。 对照品溶液的制备：取杨梅苷对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加60%乙醇制成每1 mL含40ug的溶液，即得。供试品溶液的制备：取本品粉末(过四号筛)约1 g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%乙醇50 mL， 称定重量，冷浸8小时，超声处理(功率300 W， 频率40 kHz)30分钟，再称定重量，用60%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，药渣用60%乙醇适量洗涤，合并滤液与洗液，回收溶剂至干，残渣加60%乙醇溶解，转移至5 mL量瓶中，加60%乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10pL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 蓄药材高效液相色谱方法的建立 [色谱行为描述】 《中国药典》中篇蓄的含量测定以杨梅苷为质量评价依据， 其在Inertsil ODS-4中的色谱特点为：检测波长在352 nm杨梅苷吸收较强，色谱图较优；在流动相组成为乙腈0.5%磷酸溶液系统时，流动相的比例对杨梅苷及相邻色谱峰的分离有显著的影响，流动相乙腈的比例在14%左右时，其分离度最好，选择乙腈比例在10~18%(v/v)之间均可以获得满意的分离度及分析效果，考虑到分析时间，采用上述色谱柱，优化流动相比例为乙腈0.5%磷酸溶液(14：86)；柱温对杨梅苷的保留也有一定影响，温度越高，保留时间越短，样品在40到50度均有较好的分析效果，考虑到样品的稳定性及分析时间，本次采用45度条件进行测定。 篇蓄 样品来源：本品为本科植物蓄Polygonum aviculare L. 的干燥地上部分。产地：河南。 对照品：杨梅苷(中国药品生物制品检定所，批号：110700462，含量：98%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过四号筛)约1 g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%乙醇50 mL， 称定重量，冷浸8小时，超声处理(功率300W， 频率40kHz)30分钟， 再称定重量，用60%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，药渣用60%乙醇适量洗涤，合并滤液与洗液，回收溶剂至干，残渣加60%乙醇溶解，转移至5mL量瓶中， 加60%乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：取杨梅苷对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加60%乙醇制成每1 mL含40pg的溶液，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-4 (4.6×150 mm， 5 um) 流动相：乙腈0.5%磷酸溶液(14：86) 柱45℃ 检测波长：352nm 流 ：1.0 mL/min 进样量： 10uL 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006165163 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： Intersil ODS-4(4.6×150 mm， 5 um) LC-20ADXR高压泵 流动相：乙腈0.5%磷酸溶液(10~18：90~82) SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 柱温：40~50℃ DGU-20A，脱气机 检测波长：352 nm CTO-20AC柱温箱 流 速：：1.0mL/min CBM-20A系统控制器 SIL-20AC 自动进样器 对照品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 杨梅苷 17.025 4024638 123439 6355 1.30 杨梅苷标准曲线 重复性数据如下： 杨梅苷 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 17.025 4024638 17.310 529316 2 17.019 4024076 17.338 540068 3 17.034 4021570 17.356 539730 Average 17.026 4023428 17.335 536371 RSD% 0.04 0.04 0.13 1.14 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-4 (4.6 x 150 mm, 5um)流动相：乙腈-0.5%磷酸溶液(14:86)柱温：45℃检测波长：352nm,流速：1ml/min进样量：10ul