何首乌-结合蒽醌中大黄素 大黄素甲醚检测方案(液相色谱柱)

中国药典2010年版对应高效液相色普方法图谱库(第一册：引领分析科科在北京谱朋QQ：40061 65163 中国药典2010年版对应高效相方方法图谱库2：4r 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 何首乌-结合蒽分析 何首乌-结合蒽醌的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为蓼科植物何首乌 Polygonum multi florum Thunb.的干燥块根。秋、冬二季叶枯时时采挖，削去两端，洗净，个大的切成块，干燥。 【功能与主治】解毒，消痈，截疟，润肠通便。用于疮痈，瘰疬，风疹瘙痒，久疟体虚，肠燥便秘。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.1%磷酸溶液(80：20)为流动相；检测波长为254nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备：取大黄素对照品、大黄素甲醚对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1mL含大黄素80ug，大黄素甲醚40ug的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过四号筛)约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL， 称定重量，加热回流1小时，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液5mL作为供试品溶液A(测游离蒽醌用)。另精密量取续滤液25mL，置具塞锥形瓶中，水浴蒸干，精密加8%的盐酸溶液20mL，超声处理(功率100W，频率40kHz)5分钟，加三氯甲烷20mL， 水浴中加热回流1小时，取出，立即冷却，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，洗液并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷振摇提取3次，每次15mL， 合并三氯甲烷液，回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液B(测总蒽醌用)。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与上述两种供试品溶液各10pL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 结合蒽醌含量=总蒽醌含量一游离蒽醌含量本品按干燥品计算，含结合蒽醌以大黄素(C15H10Os)和大黄素甲醚(C16H1205)的总量计，不得少于0.10%。 何首乌-结合蒽醌 样品来源：本品为蓼科植物何首乌 Polygonum multi florum Thunb.的干燥块根。秋、冬二季叶枯寸时采挖，削去两端，洗净，个大的切成块，干燥。产地：四川。 对照品：大黄素(上海同田生物技术有限公司，批号：09021821，含量：99.37%)大黄素甲醚(上海同田生物技术有限公司，批号：08080522，含量：98.686%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过四号筛)1.011g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，中密加入甲醇50mL， 称定重量，加热回流1小时，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液5mL作为供试品溶液A(测游离蒽醌用)。另精密量取续滤液25mL， 置具塞锥形瓶中，水浴蒸干，精密加8%的盐酸溶液20mL，超声处理5分钟，加三氯甲烷20mL，水浴中加热回流1小时，取出，立即冷却，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容容，洗液并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷振摇提取3次， 每次15mL，合并三氯甲烷液，回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液B(测总蒽醌用)。 对照品溶液的制备：取大黄素、大黄素甲醚对照品适量，精密称定，用甲醇分别配制成储备液，然后用甲醇制成每1mL含大黄素40ug，大黄素甲醚80pg的溶液，即得。 色谱柱： Shim-pack XR-ODS ⅡI (3.0 mm ×75 mm，2.2 um) 流动相：甲醇-0.1%磷酸(73：27) 引领分析科技在谱朋Q：40061 65163 何首乌-结合蒽醌 柱温：45℃检测波长：254 nm 流速：1.2mL/min 进样量：4uL 仪器配置： UFLC-20ADXR 高压泵 SPD-M20A二极管阵列紫外可见光半微量检测器 CTO-20AC柱温箱 CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC 自动进样器 标准样品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 大黄素 1.744 279513 86417 7174 1.21 大黄素甲醚 3.492 146939 26611 9735 1.15 大黄素的标准曲线 大黄素甲醚的标准曲线 大黄素的重现性 大黄素甲醚的重现性 No. 标准样品 实际样品 保留时间 峰面积 实际样品 23 No， 保留时间 3.505 186180 3.507 186099 峰面积 保留时间 峰面积 1 1.744 279513 1.754 544887 2 1.743 279136 1.755 544747 3 1.742 278104 1.753 544349 Average 1.743 278918 1.754 544661 RSD% 0.06 0.26 0.06 0.05 中国药典word版exe版pdf版及培训资料精华帖http：//www.yaojia.org/forum. php?mod=viewthread&tid=fromuid= 色谱柱Shim-pack XR-ODS II (3.0mm x75mm, 2.2μm)流动相:甲醇-0.1%磷酸(73:27)柱温：45℃检测波长254 nm流速1.2ml/min进样量4μL