虎杖中大黄素检测方案(液相色谱柱)

中国国典2010年版对应高效浓色谱方法图冬库(第一册)引领分析沂技.在北尿谱oaQQ4006165163 中国药典2010版对应 高效液相色谱图集 虎杖分析 虎杖的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为蓼科植物虎杖 Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.的干燥根茎及根。春、秋二季采挖，除去须根，洗净，趁鲜切短段或厚片，晒干。 【功能与主治】祛风利湿，散瘀定痛，止咳化痰。用于关节痹痛，湿热黄疸，经闭，徵瘕，水火烫伤，跌扑损伤，痈肿疮毒，咳嗽痰多。 【含量测定】大黄素色谱条件与系统适用性试验：以甲醇-0.1%磷酸溶液(80：20)为流动相；检测波长为254nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备：精密称取以五氧化二磷为干燥剂减压干燥24小时的大黄素对照品适量，加甲醇制成每1mL中含48ug的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.1g，精密称定，精密加入三氯甲烷25mL和2.5mol/L硫酸溶液20mL，称定重量，置80℃水浴中加热回流2小时，冷却至室温，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀。分取三氯甲烷液，精密量取10mL，蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10pL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 虎杖药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中虎杖的含量测定以大黄素和虎杖苷为质量评价依据，大黄素在Inertsil ODS-4中的色谱特点为：流动相为甲醇-0.1%磷酸系统时，流动相的比例对大黄素与相邻色谱峰的分离无显著影响，采用上述色谱柱，优化流动相比例为甲醇-0.1%磷酸(75：25)；柱温对大黄素与相邻色谱峰的分离基本无影响，故在室温下使用即可。 虎杖 样品来源：本品为蓼科植物虎杖 Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.的干燥根茎及根。产地：广西。 对照品：大黄素(上海同田生物技术有限公司，批号：09021821，含量：99.37%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.1g，精密称定，精密加入三氯甲烷25mL和2.5mol/L硫酸溶液20mL， 称定重量，置80℃水浴中加热回流2小时，冷却至室温，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀。分取三氯甲烷液，精密量取10mL，蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 对照品溶液的制备：精密称取以五氧化二磷为干燥剂减压干燥24小时的大黄素对照品适量，加甲醇制成每1mL中含48ug的溶液， 即得。 色谱柱： Inertsil ODS-4 (4.6×150mm， 5um) 流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液(75：25) 柱温：35℃ 检测波长：254nm 流速：：1.0 mL/min 进样量： 10uL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-3(4.6×150 mm， 5 u m) .中国药典2010年版对应高效液色谱方法图谱库(第一册)引领分析析技.在北尿谱牙oaQQ4006165163 虎杖 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： Intersil ODS-4 (4.6×150mm，5pm) LC-20ADXR高压泵 流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液(70~80：30~20)； SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 柱温：：335℃ CTO-20AC柱温箱 检测波长：254nm CBM-20A系统控制器 流速：1.0mL/min SIL-20AC 自动进样器 标准样品 实际样品 ]254nm4nm(1.00) (1)虎杖中的人黄索 (1) 对照品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因了 大黄索 20.924 1221709 43045 12201 1.12 实际样品 称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因了 大黄素 20.896 6590028 232404 12357 1.11 大黄素标准曲线 重现性数据如下 No。 标准样品 保留时间 峰面积 实际样品 保留时间 峰面积 1 20.924 122170920.916 1220432 20.896 659002820.899 6583911 2 3 20.919 1220015 20.903 6566697 AverageRSD% 20.919 1220719 20.899 6580212 0.017 0.18 0.019 0.072 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 中国药典word版exe版pdf版及培训资料精华帖http：//www. yaojia.org/forum. php?mod=viewthread&tid=fromuid= 色谱柱Inertsil ODS-4 (4.6X 150 mm, 5μm)流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液(75：25) 柱温35℃检测波长: 254 nm 流速1.0 ml/min进样量10μL此条件同样适用于Inertsil ODS-3 (4.6 x 150 mm, 5μm)