槐花中芦丁检测方案(液相色谱柱)

中国国典2010年版对应高效色谱方法图冬库(第一册)65163引领分析析技.在北尿谱牙oaQQo40061 .中国药典2010年版对应高效液色谱方法图谱库(第一册)65163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 槐花分析 槐花的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为豆科植物槐Sophorajaponica L.的干燥花及花蕾。夏季花开放或花蕾形成时采收，及时干燥，除去枝、梗及杂质。前者习称“槐花”，后者习称“槐米”。 【功能与主治】凉血止血，清肝泻火。用于便血，痔血，血痢，崩漏，吐血，衄血，肝热目赤，头痛眩晕。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试试：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-1%冰醋酸溶液(32：68)为流动相，检测波长为257nm。理论板数按芦丁峰计算应不低于2000。 对照品溶液的制备：精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粗粉(槐花约0.2g、槐米约0.1g)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，超声处理(功率250W， 频率25kHz)30分钟， 放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过。精密量取续滤液2mL，置10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10pL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 槐花药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中槐花的含量测定以芦丁为质量评价依据， 芦丁在Inertsil ODS-4中的色谱特点为：流动相为甲醇-冰醋酸系统时，流动相的比例对芦丁与相邻色谱峰的分离无显著影响，但会对保留时间产生影响，柱温越高分离度越好。采用上述色谱柱，优化流动相比例为甲醇-1%冰醋酸(32：68)，柱温45℃。此条件同样适用于Inertsil ODS-3色谱柱对槐花的分析。 槐花 样品来源：本品为豆科植物槐Sophorajaponica L.的干燥花及花蕾。产地：河北北 对照品：芦丁(上海止田生物技术有限公司，批号：08072223，含量：95.605%) 供试品溶液的制备：取本品粗粉(槐花约0.2g、槐米约0.1g)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL， 称定重量，超声处理(功率250W，频率25 kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过。精密量取续滤液2mL， 置10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 对照品溶液的制备：精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-4 (4.6×150mm， 5 pm) 流动相：甲醇-1%冰醋酸(32：68) 柱温：45℃ 检测波长：257nm 流速： 1.0mL/min 进样量：5pL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-3色谱柱。 .中国药典2010年版对应高效液色谱方法图谱库(第一册)引领分析析技.在北尿谱牙oaQQo4006165163 槐花 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： IntersilODS-4(4.6×150mm，5um) LC-20ADXR高压泵 流动相：甲醇-1%冰醋酸(25~40：75~60)； 柱温：330~55℃ DGU-20A3脱气机SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 检测波长：257nm CTO-20AC柱温箱 流速：1.0 mL/min CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC 自动进洋器 标准样品 槐花实际样品 ，AU(x100 3.0-257nm4nm{1.00) (1)槐花中的芦 2.5- 2.0- 1.S- (1) 1.0- 0.5- 0.0- 0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 槐米实际样品 标准样品 名称 保留时间(min) 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 芦丁 12.745 6573232 253974 5600 1.12 引领分析析技.在北尿谱牙oaQQ40061 实际样品槐花 名称 保留时间(min) 面积 高度 理论塔板 拖尾内子 芦丁 12.800 3673261 143276 5902 1.14 实际样品槐米 名称 保留时间(min) 面积 高度 理论塔板 拖尾因了 芦丁 12.813 4362913 176337 6340 1.12 芦丁标准曲线 浓度mg/L 重现性数据如下 No. 标准样品 实际样品槐花 实际样品槐米 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 2 3 12.745 6573232 12.800 3673261 12.813 4362913 12.754 6745262 12.794 3764264 12.805 4450691 12.754 6745262 12.800 3771798 12.814 4461362 AverageRSD% 12.751 6687919 12.798 3736441 12.810 4424989 0.0004 0.015 0.0003 0.015 0.0004 0.012 *本数据巾北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 中国药典word版exe版pdf版及培训资料精华帖http：//www.yaojia.org/forum. php?mod=viewthread&tid=fromuid= 色谱柱Inertsil ODS-4 (4.6 x 150 mm, 5μm)流动相 甲醇-1%冰醋酸(32:68)柱温: 45℃检测波长257nm流速1.0ml/min进样量: 5μL※此条件同样适用于Inertsil ODS-3色谱柱。