龙胆中龙胆苦苷检测方案(液相色谱柱)

2010版中国药典电子书(三部齐全，pdf高清版，可复制)引领分析析技尽在北京谱朋企业QQ：40061 65163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 龙胆分析 龙胆的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为龙胆科植物条叶龙胆Gentiana manshurica Kitag.、龙胆Gentiana scabra Bge、三花龙胆Gentiana triflorapall或坚龙胆Gentiana rigescens Franch.的干燥根及根茎。前三种习称“龙胆”，后一种习称“坚龙胆”。春、秋二季采挖，洗净，干燥。 ，【功能与主治】清热燥湿，泻肝胆火。用于湿热黄疸，阴肿阴痒，带下，湿疹瘙痒，肝火目赤，耳鸣耳聋，胁痛口苦，强中，惊风抽搐。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(3：7)为流动相；检测波长为270mm。理论板数按龙胆苦苷峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备：精密称取龙胆苦苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液。 测定法：精密量取该溶液和内标溶液各5mL，摇匀，取10pL注入液相色谱仪，记录色谱图；另取本品中粉约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇10mL，放置12小时，时时振摇，精密量取上清液2mL， 置10mL量瓶中，精密加内标溶液2mL，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液10uL注入液相色谱仪，按内标法以峰面积计算，即得。 龙胆药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中龙胆的含量测定采用内标法以龙胆苦苷为质量评价依据，我们以龙胆苦苷为对照品采用外标法进行分析，龙胆苦苷在Inertsil ODS-4中的色谱特点为：在流动相组成为甲醇-水系统时，动动相的比例对龙胆苦苷与相邻色谱峰的分离影响显著，甲醇比例越低分离度越高，选择甲醇比例在20~30%(v/v)，柱温对龙胆苦苷与与邻色谱峰的分离基本无影响。采用上述色谱柱，优化流动相比例为甲醇-水(25：75)，柱温35℃。此条件同样适用于Inertsil ODS-3色谱柱对龙胆的分析。 龙胆 样品来源：本品为龙胆科植物条叶龙胆Gentianamanshurica Kitag.、龙胆Gentianascabra Bge、三花龙胆Gentianatriflora pall或坚龙胆Gentiana rigescens Franch.的干燥根及根茎。前三种习称“龙胆”，后一种习称“坚龙胆”。春、秋二季采挖，洗净，干燥。产地：云南。 对照品：龙胆苦苷(含量：99.06%) 供试品溶液的制备：取本品粉末约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇10mL， 放置12小时，时时振摇精密量取上清液2mL， 置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。 对照品溶液的制备：精密称取龙胆苦苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液，摇匀，即得。 色谱柱：Inertsil ODS-4(4.6x150mm，5pm)i流动相：甲醇-水(25：75) 柱温：35℃检测波长：270nm 流 速：1mL/min 进样量：5pL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-3色谱柱对龙胆的分析。 2010版中国药典电子书(三部齐全， pdf高清版，可复制) 引领分析科技在北京京谱谱朋月朋业QQ：40061 65163龙胆 推荐使用条件范围： 色谱柱：Intersil ODS-4(4.6×150mm， 5um) 流动相：甲醇-水(20~30：80~70) 柱 温：30~55℃ 检测波长：270nm 仪器配置：LC-20ADXR 高压泵DGU-20A3脱气机SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器CTO-20AC柱温箱 流 速：：1.0mL/min CBM-20A 系统控制器 标准样品 实际样品 名称 保留时间(min) 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 龙胆苦苷 10.56 1586351 80212 6372 1.05 龙胆苦苷标准曲线 重现性数据如下 No. 标准样品保留时间 峰面积 实际样品 保留时间 峰面积 1 2 3 10.40 712309 1387014 10.41 704114 13698281404841 10.41 713519 10.55 1404841 AverageRSD% 10.41 709981 10.56 0.125 1387228 0.042 0.72 1.26 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-4(4.6x150mm, 5um)流动相：甲醇-水=(25:75)柱温：35℃检测波长：270nm流速：1mL/min进样量：5ul※此条件同样适用于Inertsil ODS-3色谱柱对龙胆的分析。