胡黄连中胡黄连苷检测方案(液相色谱柱)

2010版中国药典电子书(三部齐全， pdf高清版，可复制)引领分析技平在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 胡黄连分析 胡黄连的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为玄参科植物胡黄连Picrorhiza scrophulariiflora Pennell的干燥根茎。秋季采挖，除去须根及泥沙，晒干。【功能与主治】退虚热，除疳热，清湿热。用于骨蒸潮热，小儿疳热，湿热泻痢，黄疸尿赤，痔疮肿痛。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸(35：65：0.1)为流动相；检测波长为275nm。理论板数按胡黄连苷1峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备：精密称取胡黄连苷|对照品、胡黄连胡I对照品各10mg，置50mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1mL， 置5mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每1mL中含胡黄连苷|与胡黄连苷各40ng)。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL， 密集，称定重量，超声处理(功率250W，频率33kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液1mL，置5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10uL，注入液相色谱仪，测定，即得。 胡黄连药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中胡黄连的含量测定以胡黄连苷Ⅰ和胡黄连苷Ⅱ为质量评价依据，胡黄连苷!和胡黄连昔Ⅱ在Inertsil ODS-4中的色谱特点为：在流动相组成为甲醇-磷酸盐系统时，流动相的比例对胡黄连苷Ⅱ与相邻色谱峰的分离影响显著，甲醇比例越低分离度越高，对胡黄连苷与相邻色谱峰分离基本无影响但考虑到分析时间对选择甲醇比例在20~35%(v/v)，柱温对龙胆苦苷与相邻色谱峰的分离基本无影响。采用上述色谱柱，优化流动相比例为甲醇-0.1%磷酸溶液(30：70)， 柱温35℃。 胡黄连 样品来源：本品为玄参科植物胡黄连Picrorhiza scrophulariflora Pennell的干燥根茎。秋季采挖，除去须根及泥沙，晒干。产地：云南。 对照品：胡黄连昔(含量：98.41%) 胡黄连苷Ⅱ(含量：99.25%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL， 密集，称定重量，超声处理(功率250W，频率33kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液1mL， 置5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 对照品溶液的制备：精密称取胡黄连黄!和胡黄连苷Ⅱ对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液，摇匀，即得。 2010版中国药典电子书(三部齐全，pdf高清版，可复制) 引领分析技在北京谱朋企业QQ：40061 65163 胡黄连 色谱柱：InertsilODS-4(4.6x150mm，5um)流动相：甲醇-水-磷酸(30：70：0.1) 柱温：35℃检测波长：275nm 流速：1mL/min 进样量：5uL ※该条件同样适用于Inertsil ODS-3(4.6×150mm，5um)。 推荐使用条件范围：色谱柱： Intersil ODS-4(4.6×150mm， 5pm)流动相：甲醇-水-磷酸(20~35：80~65：0.1) 柱温：30~55℃检测波长：275nm 流充 速：1.0mL/min 仪器配置： LC-20ADXR 高压泵 DGU-20A3脱气机 SPD-M20A二极管列列紫外可见光检测器 CTO-20AC柱温箱 CBM-20A系统控制器SIL-20AC 自动进样器 标准样品 实际样品 名称 保留时间(min) 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 胡黄连苷Ⅱ 21.389 1347593 8827 7156.870 1.073 胡黄连苷Ⅰ 44.385 1008029 6736 8870.688 1.033 重现性数据如下 No. 胡黄连苷Ⅱ 保留时间 峰面积 胡黄连苷Ⅰ 保留时间 峰面积 1 2 21.389 134759321.382 1338547 21.386 11338448 44.385 44.354 44.357 1008029 992939 1003186 3 AverageRSD% 21.385 1341529 1001385 0.76 0.02 0.39 0.04 0.76 ★本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-4(4.6x 150mm, 5um)流动相：甲醇-水-磷酸(30:70:0.1)柱温：35℃检测波长：275nm流速：1mL/min进样量：5ul※该条件同样适用于Inertsil ODS-3(4.6 x 150mm, 5um)