大青叶中靛玉红检测方案(液相色谱柱)

2010版中国药典电子书(三部齐全， pdf高清版，可复制)引领分析科技在北京朋业QQ：40061L665163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 大青叶分析 大青叶的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为十字花科植物菘蓝Isatis indigotica Fort.的干燥叶。夏、秋二季分2~3次采收，除去杂质，晒干。 【功能与主治】清热解毒，凉血消斑。用于温病高热，神昏，发斑发疹，疟腮，喉痹，丹毒，痈肿。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷基合硅胶为填充剂；以甲醇-水(75：25)为流动相；检测波长为289nm。理论板数按靛玉红峰计算应不低于4000。 内标溶液的制备：精密称取靛玉红对照品适量，加甲醇制成每1mL含2ug的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品细粉0.25g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷，浸泡15小时，加热回流提取至提取液无色。回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解并转移至100mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分分精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20pL，注入液相色谱仪，测定，即得。 大青叶药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中大青叶的含量测定以靛玉红为质量评价依据，靛玉红在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：在流动相组成为甲醇-水系统时，流动相的比例对靛玉红与相邻色谱峰的分离具有显著的影响，甲醇比例越低分离度越高，考虑到分析效率，选择甲醇比例在65~75%(v/v)，柱温对靛玉红与相邻色谱峰的分离，影响较小，但较高的柱温可以缩短分析时间。采用上述色谱柱，优化流动相比例为甲醇-水(75：25)，柱温45℃。 大青叶 样品来源：本品为十字花科植物菘蓝Isatis indigotica Fort.的干燥叶。产地：东北。 对照品：靛玉红(含量：98.65%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：精密称取靛玉红对照品适量，加甲醇制成每1mL含2ug的溶液，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-3(4.6×250mm， 5um) 流动相：甲醇-水(75：25) 柱温：45℃ 检测波长：289nm 流 速： 1mL/min 进样量：10pL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-4(4.6×150mm，5um)。 2010版中国药典电子书(三部齐全， pdf高清版，可复制) 引领分析科技在北京京谱QQ.400611665163 大青叶 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×250mm， 5pm) LC-20ADXR高压泵 流动相：甲醇-水(65~75：35~25) DGU-20A3脱气机 柱 温：35~45℃ SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 检测波长：289nm CTO-20AC柱温箱 检测波长：：1.0mL/min CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC 自动进样器 标准样品 实际样品 289nm，4nm (1.00) (1)大青叶中的靛玉红 (1) (1) (1)靛玉红标准品 木 名称 保留时间(min) 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 靛玉红 13.293 320445 17624 12061 1.09 靛玉红标准曲线 重现性数据如下 峰面积 No. 标准样品 保留时间 峰面积 实际样品 保留时间 峰面积 1 2 3 13.211 338552 318621320445319378 13.196 338784 13.293 320445 13.202 336622 13.297 319378 AverageRSD% 13.203 337986 319481 0.29 0.06 0.35 0.03 0.29 ( *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 ) 色谱柱: Inertsil ODS-3(4.6 x 250mm, 5um)流动相：甲醇-水(75:25)柱温：45℃检测波长：289nm流速：1mL/min进样量：10 uL※此条件同样适用于Inertsil ODS-4(4.6 x 150mm, 5um)