胡椒中胡椒碱检测方案(液相色谱柱)

2010版中国药典电子书(三部齐全， pdf高清版，可复制)引领分析析技尽在北京谱朋企业QQ：40061 6516330 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 胡椒分析 胡椒的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为胡椒科植物胡椒Piper nigrum L.的干燥近成熟或成熟果实。秋末至次春果实呈暗绿色时采收，晒干，为黑胡椒；果实变红时采收，用水浸渍数日，擦去果肉，晒干，为白胡椒。 【功能与主治】温中散寒，下气，消痰。用于胃寒呕吐，腹痛泄泻，食欲不振，癫痫痰多。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(77：23)为流动相；检测波长343nm。理论板数按胡椒碱峰计算应不低于1500。 内标溶液的制备：精密称取对二甲氨基苯甲醛适量，置棕色量瓶中，加无水乙醇制成每1mL含0.5mg的溶液，即得。测定法：精密密取胡椒碱对照品适量，置棕色量瓶中，加无水乙醇制成每1mL含1mg的溶液。精密量取该溶液和内标溶液各2mL， 置25mL棕色量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，吸取10pL注入液相色谱仪，记录色谱图；另取本品中粉约0.25g，精密称定，置100mL棕色量瓶中，加无水乙醇约80mL， 超声处理(功率250W， 频率20kHz)至少30分钟，放冷，加无水乙醇至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液20mL与内标溶液2mL，置25mL棕色量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，吸取10pL注入液相色谱仪，按内标法以峰面积计算，即得。 胡椒药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中胡椒的含量测定以胡椒碱为质量评价依据，胡椒碱在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：在流动相组成为甲醇-水系统时，流动相的比例对胡椒碱与相邻色谱峰的分离具有显著的影响，甲醇比例越低分离度越高，考虑到分析效率，选择甲醇比例在65~75%(v/v)，柱温对胡椒碱与相邻色谱峰的分离及保留时间影响较小。采用上述色谱柱，优化流动相比例为甲醇-水(72：28)，柱温35℃。 胡椒 样品来源：本品为胡椒科植物胡椒Piper nigrum L.的干燥近成熟或成熟果实。产地：海南。 对照品：胡椒碱(含量：98.12%) 供试品溶液的制备：另取本品中粉约0.25g，精密称定，置100mL棕色量瓶中，加无水乙醇约80mL，超声处理 (功率250W，频率20kHz)至少30分钟，放置至室温后，加无水乙醇至刻度，摇匀，滤过，置25mL棕色量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，滤过，即得。 对照品溶液的制备：精密称取胡椒碱对照品适量，加甲醇制成每1mL含80ug的溶液，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-3(4.6x150mm， 5pm) 流动相：甲醇-水(72：28)柱温：35℃ 检测波长：343nm 流速： 1mL/min 进样量：： 110pL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-4(4.6x150mm，5pm)。 2010版中国药典电子书(三部齐全， pdf高清版，可复制) 引领分析科技在北北京京谱谱朋朋企业QQ：4006165163胡椒 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150mm， 5pm) LC-20ADXR高压泵 流动相：甲醇-水(65~75：35~25) DGU-20A3脱气机 柱 温： 35~45℃ SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 检测波长：343nm CTO-20AC柱温箱 检测波长：：：1.0mL/min CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC 自动进样器 标准样品 实际样品 名称 保留时间(min) 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 胡椒碱 7.248 12339307 765391 4628 1.11 胡椒碱标准曲线 重现性数据如下 No. 标准样品 保留时间 峰面积 实际样品 保留时间 峰面积 1 7.227 122401337.229 122478657.235 12163110 123467541235386412339307 23 7.248 12339307 AverageRSD% 7.231 12217036 7.249 12346642 0.04 0.06 0.06 0.38 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 浓度mg/L 色谱柱：Inertsil ODS-3(4.6 x 150mm , 5um)流动相: 甲醇-水(72 :28)柱温：35°C检测波长：343nm流速：1mL/min进样量：10 uL※此条件同样适用于Inertsil ODS-4(4.6 x 150mm, 5um)。