枳实中橙皮苷检测方案(液相色谱柱)

2010版中国药典电子书(三部齐全， pdf高清版，可复制)引领分析科技.在北京谱朋企业QQ：40061L665163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 枳实分析 枳实的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培变种或甜橙Citrus sinensis Osbeck的干燥幼果。5~6月收集自落的果实，除去杂质，自中部横切为两半，晒干或低温干燥，较小者直接晒干或低温干燥。 【功能与主治】破气消积，化痰散痞。用于积滞内停，痞满胀痛，泻痢后重，大便不通，痰滞气阻，胸痹，结胸，脏器下垂。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-磷酸二氢钾水溶液(取磷酸二氢钾0.6g，十二烷基磺酸钠1.0g， 冰醋酸1mL，加水溶解并稀释至1000mL)(50：50)为流动相；检测波长为275nm。理论板数按辛弗林峰计算应不低于2000。 对照品溶液的制备：精密称取以五氧化二磷为干燥器减压减燥4小时的辛弗林对照品适量，加水制成每1mL含30pg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品中粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL， 称定重量，加热回流1.5小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10mL，蒸干，残渣加水10mL使溶解，摇匀，通过聚酰胺柱(60~90目， 2.5g， 内径1.5cm， 干法装柱)，用水25mL洗脱， 转移至25mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。 测定法：分分精密吸取对照品溶液与供与品溶液各10~20pL， 注入液相色谱仪，测定，即得。本品按干燥品计算，含辛弗林(CgH13NO2)不得少于0.30%。 枳实高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中枳实的含量测定以橙皮苷为质量评价依据，枳实在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：在流动相组成为甲醇-醋酸水系统时，流动相的比例对橙皮苷与相邻色谱峰的分离具有显著的影响，选择甲醇比例在35~45%(v/v)之间均可以获得满意的分离度，考虑到分析时间长短，优化流动相比例为甲醇-水(40：60)；柱温对橙皮苷与相邻色谱峰的分离基本无影响，故选用40℃柱温。 枳实 样品来源：芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培变种或甜橙Citrus sinensis Osbeck的干燥幼果。产地：江西。 对照品：橙皮苷(含量：97.69%) 供试品溶液的制备：取本品细粉约0.2g，精密称定，置50mL量瓶中，加甲醇30mL，超声处理30分钟，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2mL， 置5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 对照品溶液的制备：精密称取橙皮橙对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液，即得。 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150mm， 5pm) 流动相：甲醇-水(35~45：65~55) 柱温：40℃检测波长：284nm 流 速： 1mL/min 进样量：10pL ※此条件同样适用于Inertsil ODS-4(4.6×150mm，5um)。 2010版中国药典电子书(三部齐全， pdf高清版，可复制) 引领分析科技在北京京谱QQ.400611665163枳实 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150mm， 5um) LC-20ADXR高压泵 流动相：甲醇-水(35~45：65~55) SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 柱 温：35~45℃ CTO-20AC柱温箱 检测波长：284nm CBM-20A 系统控制器 检测测长：1.0mL/min SIL-20AC 自动进样器 标准样品 实际样品 mAU 25-12284nm，4nm (1.00) (1) 20- (1)实实中的橙皮苷 15- 10- 0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 35.0 min 名称 保留时间(min) 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 橙皮苷 10.42 614219 22061 3301 1.23 橙皮苷标准曲线 重现性数据如下 峰面积 No. 样品分析 保留时间 峰面积 1 10.40 712309 2 10.41 704114 3 10.41 713519 Average 10.41 709981 RSD% 0.042 0.72 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-3(4.6x 150mm, 5um ) 流动相：甲醇- 水(35-45:65-55)柱温：40℃，检测波长：284nm流速：1mL/min进样量：10uL※ 此条件同样适用于Inertsil ODS-4(4.6 x 150mm, 5um)。