泮托拉唑钠中有关物质检测方案(液相色谱柱)

Dec.5.2016LC Application Lab， Shiseido ChinaNo.31， BDA International Business Park，2 Jing Yuan Street， BeijingEconomic Technological Development Zone，Beijing， China 100176Phone 010-6785-6803，FAX 010-6785-6882 泮托拉唑钠(Pantoprazole Sodium) USP方法对有关物质的检测 客户提供泮托拉唑钠的杂质A、B、C、DF(杂质D和F为混合溶液，没有分离要求)、E及左旋泮托拉唑单标溶液各一个，浓度均为0.06mg/mL，混标溶液一个，各杂质浓度为1.3pg/mL， 要求各杂质之间分离度大于2.0。实验室选用最常规色谱柱CAPCELL PAK C18 MGII S5； 4.6mml.D.×150mm (A4AB 06712)进行分离，杂质DF和E分离度为1.33，其他杂质满足分离要求。分析结果如图1。 图1MGII S5； 4.6mml.D.×150mm分析结果 因 MGII S5；4.6mml.D.×150mm对杂质 DF 和E分离效果不理想，现选用高极性 CAPCELL PAK C18 AQS5； 4.6mml.D.x150mm (A6AB 02098)色谱柱进行分析，杂质DF和E分离度为2.41，可达到分离要求。分析结果如图2。 图2AQS5； 4.6mml.D.x150mm分析结果 由于客户希望杂质峰保留时间与之前实验一致，建议使用250mm 色谱柱，且通过实验对比， AQ色谱柱分离效果更理想，故选用 CAPCELL PAK C18 AQ S5； 4.6mml.D.x250mm(A6AD 03797) 色谱柱进行实验，保留时间有所延长，但杂质DF和E分离度为1.61，未达到分离要求。分析结果如图3. 图3 AQ S5； 4.6mml.D.x150mm分析结果 因考虑到 MGII色谱柱批间差异小，结果重现性好，故选用 MGII色谱柱进行柱型筛选。选用 CAPCELLPAK C18 MGII S3； 4.6mml.D.x150mm (A8AB02510)色谱柱进行实验，杂质DF 和E分离度为2.67，分离效果良好。分析结果如图4. 图4MGII S3； 4.6mml.D.×150mm分析结果 色谱条件 ： 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MGII S5； 4.6mml.D.×x150mm； CAPCELL PAK C18 AQ S5； 4.6mml.D.x150mm； CAPCELL PAK C18 AQ S5；4.6mml.D.x250mm； CAPCELL PAK C18 MGII S3；4.6mml.D.×150mm 流动相：(A) 0.01mol/L 磷酸氢二钾溶液(磷酸调pH7.0)(B)乙腈 B： 20%(0min) ->80%(40min)->20%(45min)->20%(50min) 流速1.0mL/min温度检测 40°C PDA290nm， 305nm 进样量： 20pL浓 度： 1.3pg/mL(稀释剂：0.001mol/LNaOH： 乙腈=50：50) HPLC Conditions ： Column ：CAPCELL PAK C18 MGII S5； 4.6mml.D.x150mm；CAPCELL PAK C18 AQ S5： 4.6mml.D.×150mm：CAPCELL PAK C18 AQ S5； 4.6mml.D.×250mm； CAPCELL PAK C18 MGII S3； 4.6mml.D.×150mm Mobile phase ： (A))00.01mol/LK2HPO4(adjusted to pH7.0with H3PO4)(B)CH3CN B： 20%(0min) ->80%(40min)->20%(45min)->20%(50min) Flow rate ： 1.0mL/min Temperature 40°C Detection PDA290nm， 305nm Inj.vol 20pL Centration 1.3pg/mL (Diluent： 0.001mol/LNaOH： CH3CN=50： 50) 综上，选用 CAPCELL PAK C18 AQ S5；4.6mml.D.×150mm 和 MGII S3； 4.6mml.D.x150mm色谱柱各杂质之间分离度均可达到大于2.0的分离要求，本实验选用资生堂 NANOSPACE 二元高压泵系统，客户可根据需要酌情考虑。 (注：图上所标数值为分离度；数据存储路径：仪器：IBM-02：DD：\YY\泮托拉唑钠) ( 杨杨 郭彦丽 )