奶粉中香兰素，乙基香兰素检测方案(固相萃取仪)

Preekem 全自动固相萃取-液相色谱法检测奶粉中的香兰素、乙基香兰素 编扁： SUFET-1-J 摘要：本文建立了奶粉中香兰素、乙基香兰素素的ASPE-HPLC (ASPE， Automatic Solid-Phase Extraction)测定方法。奶粉中分别添加浓度为5 ug的香兰素、乙基香兰素的标准物质，经纯水提取后进行ASPE净化。 HPLC检测显示：香兰素、乙基香兰素在0.5-10 ug/mL范围内，线性关系均良好，平均回收率分别为香兰素105.8%、乙基香兰素102.5%，平行测定三次添加回收的相对标准偏差(RSD) 为香兰素0.57%、乙基香兰素0.76%。该方法回收率、重复性和精密度好，适用范围广，满足香兰素、乙基香兰素检测的要求。 关键词：奶粉，香兰素，乙基香兰素， ASPE-HPLC 1奶粉样品处理 1.1样品提取 称取奶粉粉品1.0g ↓ 加入10mL水溶液，置于摇床振摇(300r/min)30min冷冻离心(5℃，1000r/min)5min，取上清液 5mL待净化 1.2样品 ASPE 净化 (1)待净化液采用EXTRA-ASPE 进行净化 (2)在 HLB (60mg，3mL)小柱上装上3mL柱密封塞 (3)将塞好密封塞的固相萃取小柱放入 EXTRA 全自动固相萃取仪的3 mL SPE 架上。 (4)将溶剂瓶 S1 中装入500 mL甲醇溶液；溶剂瓶V1中装入800 mL水溶液。 (5)在控制 EXTR-ASPE 系统的 PC软件方法设置界面上，设置奶粉中香兰素、乙基香兰素的固相萃取方法(详细步骤参见表1)。 表1 ASPE 净化详细方法列表 动作 位置 溶剂 体积 抽溶剂速度 打溶剂速度 清洗 外针 水 6mL 120 mL/min 120 mL/min 活化 甲醇 3mL 15 mL/min 1.5mL/min 空气 0mL 上样并收集 样品 5mL 15 mL/min 1.0 mL/min 空气 1mL 15 mL/min 2.0 mL/min 清洗 外针 水 6mL 120 mL/min 120 mL/min 淋洗 水 20mL 15 mL/min 1.5 mL/min 空气 6mL 60 mL/min 60 mL/min 上样并收集 甲醇 1mL 8mL/min 1.0 mL/min 空气 6mL 60 mL/min 60 mL/min (6)将待净化样品放入样品架内。 (7)设置运行界面，开始样品净化操作。 (8)固相萃取完成后，洗脱液经0.002mol/L 乙酸铵定容至 5mL，混匀后上 HPLC分析 2气相色谱检测条件 色谱柱： CNW Athena C18-WP 4.6mm*250mm， 5um 柱温：30℃ 检测器： DAD 检测波长：273nm 流动相：乙乙：0.1甲酸水溶液=33：67 流速：1.0mL/min 进样量：10uL 3结果分析 3.1香兰素、乙基香兰素的标准色谱图 图1香兰素、乙基香兰素的标准 HPLC色谱图 3.2奶粉中香兰素、乙基香兰素的标准添加色谱图 图2奶粉中香兰素、乙基香兰素标准添加 HPLC色谱图 平行测定3次添加实验，计算方法的平均回收率及相对标准标差(RSD)如表2 表2样品加标回收实验 序号 化合物名称 标准加入量(ug) 回收一(%) 回收二(%) 回收三(%) 平均回收率(%) RSD(%) 1 香兰素 5 105.4 105.5 106.5 105.8 0.57 2 乙基香兰素 102.1 102.0 103.4 102.5 0.76 3..结论 建立了 APSE-HPLC 法测定奶粉中香兰素、乙基香兰素的分析方法。，3实验显示：香兰素的平均回收率为105.8%、方法精密度为0.57%，乙基香兰素的平均回收率为102.5%、方法精密度0.76%。 实验结果表明：该方法准确可靠，操作方便，重现性好。适合奶粉中香兰素、乙基香兰素的快速、准确检测。