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条件性恐惧实验

条件性恐惧实验 (一)条件性恐惧实验实验原理: 条件性恐惧实验系统(FCS)用于小型啮齿类动物(大、小鼠)环境相关条件性恐惧实验研究。啮齿类动物在恐惧时会表现出特有的不动状态(immobility),动物在这种情况下倾向于保持静止不动的防御姿势。抗抑郁药和抗中枢兴奋药可以明显缩短不动状态持续的时间。 在条件性恐惧实验中,实验对象被给与一个声音信号(条件刺激),随后给予电击(非条件)刺激。该训练称为条件性训练,训练结束后实验动物进行声音信号或环境联系性实验。一般情况下啮齿类动物对相应的环境和不同环境下同样的声音信号都会做出明显的条件性恐惧反应,比如静止不动。这种测试可以在训练结束后立刻或几天后进行可以提供在条件信号影响下短期和长期记忆的信息。 (二)条件性恐惧实验步骤: 现举例如下: 实验分为三个阶段: 第一阶段:条件性训练(1天) 无刺激 180s 声音信号 30s 电击 2s 无刺激 20s 第二阶段:环境相关(2天) 无刺激 180s 第二阶段将实验动物放入第一阶段中的环境中以期评价环境相关的条件性恐惧程度。 第三阶段:改变的环境相关信息(2天+2h) 无刺激 180s 声音 180s 无刺激 60s
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抑郁症动物模型

大小鼠强迫游泳实验: 又称Porsolt’s test,此模型是最广泛用来评估抗抑郁药的行为学模型,强迫游泳实验操作简单,对抗抑郁药敏感,能够检出广谱的抗抑郁药,缺点是仅对急性治疗的药物敏感,对5-羟色胺重摄取抑制剂类的药有效性不确定,有导致动物低体温的风险,现多用于抗抑郁药的初筛。 小鼠悬尾实验: 是与强迫游泳实验相似的经典实验,悬尾小鼠为克服不正常*而挣扎活动,但活动一定时间后,出现间断性不动,显示“绝望”状态,此模型与强迫游泳实验的共同点是操作简单,对抗抑郁药敏感,测量其不动状态的适应性行为是一致的。不同点:抗抑郁药作用的底物不同,两种模型中动物脑内多种神经递质的变化及受体功能改变不一致。小鼠悬尾实验能够反映应激性低体温而强迫游泳实验不能,而小鼠悬尾实验仅适用于小鼠应激,而不适用于大鼠,目前也多用于抗抑郁药的初筛。 获得性无助模型: 获得性无助是一种更接近于疾病病因学和遗传学的动物模型。值得注意的是,大部分小鼠获得性无助模型只是短期的,在终止刺激后几天内就恢复正常,但因为某些未知原因,仅仅有部分小鼠仍然保持无助的症状,这反映了潜在的基因与环境交互作用。获得性无助模型目前不仅用于抗抑郁药的筛选,且已日益用于此类药物的作用机制及抑郁症的神经生物学的研究,与强迫游泳实验、悬尾实验相似的是,获得性无助模型不能检测出慢性抗抑郁药的药效。
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迷宫与动物行为研究

在动物心理学的实验研究中,迷宫是很常用的一种仪器。文章介绍了迷宫的发展历史、类型以及应用的研究领域,并讨论了未来迷宫方法的进一步改进及其广泛的应用前景。 迷宫在实验动物心理学形成及发展中的作用至关重要:从19世纪末20世纪初开始,迷宫已经成为心理学家测试动物能力时常用的仪器(啮齿类,猫,狗,以及灵长类)。迷宫任务对实验室测试特别适用,因为仪器本身可以告知动物需要它们做的是什么(类似于人类实验的指示语)。 1 发展历史及迷宫类型 2 研究现状 3 我国学者利用迷宫进行的研究 国内己有一些研究中应用迷宫方法,特别是采用T迷宫或Y形迷宫作为考察辨别学习的工具,检验动物学习记忆特点及其脑机制以及药物对动物学习行为的影响。进入90年代以来,Morris水迷宫的应用较多。研究者用水迷宫来测量空间认知,考察脑损伤(如颞叶、海马、基底神经节损伤或切除等)对大鼠空间学习和记忆能力的影响。隋南等人还依照Morris迷宫实验的特点设计了简便易行的Morris迷宫图象自动采集系统,此系统包括数据采集、实时数据处理、实验数据分析并生成所需各种数据文件和数据图等一系列功能,而成本仅为国外同类产品的1/5。这些行之有效的工具和方法为动物学习、记忆等认知过程及其脑机制的研究提供了重要的证据。
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Openfield 的行为观察

一. 通常观察啮齿类动物在0F中的如下行为: 1-探究行为(explore) 包括用鼻子嗅闻空气和旷场地板气味等运动行为。该运动通常 表现为弯曲的运动路线,运动速度很慢.而且动物身体腹部常紧贴着旷场地板。 2-走动行为(walk) 常表现为较直的运动路线和相对较快的活动速度,且不用鼻子嗅 闻空气和旷场地板气味等运动行为。 3.旋转行为(spinturn) 包括追逐自己尾巴而形成的固定模式的环绕运动。 4·自我梳理行为(selfgroom) 快速清洁面部、前足和身体的行为。典型的完全的梳理 过程通常开始于动物轻轻地搔抓面部。动作逐渐增多并沿着身体向下.终止于尾尖。不论完 全梳理和非完全梳理过程(常在梳理身体时中断)均应被计人“梳理”过程。 5·坐(sit) 睁着眼睛而嗅闻空气的非运动状态。定义“坐”的最小非运动时间应为3s。 6.睡眠(sleep) 眼睛紧闭且完全不运动状态。 7·伸展注意行为(stretchattend) 动物伸展身体,特别是从比较安全之处(如旷场角落) 向着相对较不安全之处(旷场中央部分)伸展身体.是动物对危险的评价行为。动物腹部保持 平坦紧贴旷场底部,并用鼻子嗅闻空气和地板气味。当头部和前足向前伸展时,后足保持不 动一该行为往往结束于前足“后退一步”,从而使身体不再伸展。当进行一系列伸展注意行为 时或者伸展注意行为之后进行运动活动则“后退一步”行为就不完整:在此情况下,应对任何 一次身体完全伸展记数为。伸展注意”行为. 8·返回行为(return) 当进行非常慢的探索行为时,动物经常返回到起点。在整个过程 中动物腹部紧贴旷场底部保持平坦. 9·后腿站立(rear)动物站立.双前足离开地板:沿旷场侧壁站立时.动物常靠在旷场 侧壁上。 10.gt6(jump)所有四足全部离开旷场地板。
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心理应激动物模型的制作与行为学测试

心理应激动物模型的制作与行为学测试 一、心理应激动物模型的制作 人们在复制心理应激动物模型方面做了大量工作,但情绪毕竟是复杂的,躯体应激与心理应激因素的区别始终是应激研究中的难关,难于绝对地在实验中进行模拟或类比。下面是几种常见的动物模型制作方法,为进行心理应激研究提供参考。 1 . 社交失败应激动物模型: 雄性大鼠放入单独饲养大鼠笼中, 单独饲养大鼠会攻击实验组大鼠, 撕咬侵入者的头部、颈部和背部(无外伤发生)。社交失败的定义是:实验大鼠至少受到一次攻击, 并且表现出驯服的姿势, 如防御性直立、仰 卧、静止不动等 。由于最后得到的实验对象未受到明显的躯体刺激, 因而可以认为是较理想的心理应激模型。 2 .Communication Box 大鼠模型: 被电击的大鼠惊叫、惊跳; 实验组大鼠不受电击, 但旁观其他大鼠遭受电击的过程,通过视觉、听觉等而产生心理应激。每次持续30分钟,隔天1次, 连续两周 。 3 . 行为限制( 束缚制动) : 将造模大鼠置于自制束缚制动盒内, 限制大鼠的活动空间, 每日1 次, 每次2小时,造模大鼠在制动期间禁食、禁水。6天后进行检测。 4 . 多重复合慢性应激: 将隔离应激、新环境应激、拥挤、社交失败应激等4 种刺激随机安排到28 日内,每日1种,产生慢性轻度不可预见性的应激。由于慢性应激是模拟抑郁症的环境诱因,动物的行为特征改变、血浆皮质激素升高等均与内源性抑郁症状相似,作为抑郁模型具有较高的价值。
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改善记忆作用检验方法

1动物实验 1.1跳台实验 1.1.1原理 反应箱底铺有通36v电的铜栅,动物受到电击,其正常反应是跳上箱内绝缘的平台以避免伤害性刺激。多数动物可能再次或多次跳至铜栅上,受到电击又迅速跳回平台,如此训练5min,并记录每鼠受到电击的次数或叫错误次数,以此作为学习成绩。24h或48h重作测验,此即记忆保持测验。记录受电击的动物数、第一次跳下平台的潜伏期和3min内的错误总数。停止训练5天后(也可以在训练后的一周、两周或其它时间点)进行记忆消退实验。 1.1.2仪器与试剂 跳台仪:该装置为10×10×60cm3的被动回避条件反射箱,用黑色塑料板分隔成5间。底面铺以铜栅,间距为0.5cm,可以通电,电压强度由一变压器控制。每间左后角置一高和直径均为4.5cm的绝缘平台。 试剂:樟柳碱、环已酰亚胺、乙醇。 1.1.3实验方法 1.1.3.1实验动物 断乳鼠,体重10g左右;或成年鼠,体重18-22g用于改善老年人记忆的产品必须采用成年鼠。雌雄均可,单一性别不少于10只(最后有效数据)。推荐使用近交系小鼠。 1.1.3.2剂量设计和分组 共设高、中、低、对照四个组,根据推荐的人体每日每公斤体重摄入量,扩大10倍作为其中一个剂量组,根据受试样品的具体情况另设两个剂量组。经口给样。原则上连续给样30天,也可根据实验需要自行设定给样期限。
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显微操作技术

显微操作技术包括细胞核移植、显微注射、嵌合体技术、胚胎移植以及显微切割等,例如多莉羊就是运用细胞核移植技术而成功的;而转基因技术指的是将外源基因导入体细胞并能稳定的嵌入宿主动物的生殖细胞染色体中的一门技术,基因转殖动物被定义为由人为的方式将外源基因引入体内而引起基因改变的动物,并可将遗传特质传递到接续的每一世代中。 微注射应用的范围非常广泛,从辅助(体外)细胞受精技术至分子和细胞基本组分的转运都需使用这一技术,比较典型的是将某些物质注射进细胞中以操作和/或监测某种特定的存活细胞中的基本机体生物化学状态。这些可以注射进细胞的物质包括有:各种细胞器、激酶、组织化学标志物(比如辣根过氧化物酶或者荧光黄)、蛋白质、代谢物质、微磁头、离子、抗体、基因、分子生物学的mRNA和DNA等等。运用这一技术,也可以实现用于单个细胞或一组细胞的较少量(皮升至毫升)药剂或药物的精确输送(微灌注),例如药理学的药物检验。转基因动物的制作,可以利用基因微注射(gene microinjection)、胚干细胞(embryonic stem cells,ES cells)、精子载体(sperm vector)、反转录病毒感染(retroviral vectorinfection)及体细胞核移置(somatic cell nucleartransfer)等方法达成,其中显微注射为目前应用最普遍之方法之一。
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如何运用BLS细胞融合仪及胚胎聚集针创建胚胎

如何运用BLS细胞融合仪及胚胎聚集针创建胚胎 注射器内吸入培养基,在35mm组织培养板上微滴(大致直径3mm)点样成若干行(列)。向培养板内小心注入石蜡油使其覆盖整板,注意不要使石蜡油直接倾倒在微滴上。石蜡油很容易越过这些微滴。石蜡油的量要完全覆盖这些微滴。使用配件按照说明操作,制作凹陷。 37度,5%CO2条件下孵育培养板几小时,目的是让培养基在液滴内达到平衡。这一步可以在形成凹陷的步骤之前进行。 实验前准备好待聚集的细胞,组织或胚胎,不要将它们长时间暴露在室温下或脱离最适培养条件时间过长。通过在组织培养板盖上加入几滴M2培养基和Tyrode’s酸溶液来去除卵透明带。将组织培养板的培养区域表面如此处理后,胚胎将本能的黏附在表面—因此我们需要使用盖。确认所有培养基溶液和酸液都接近室温。将胚胎放置在一滴M2培养基上。取尽可能少的内含10-20个胚胎的培养基,并移到一滴酸液上。重复这个步骤并将胚胎移到新的一滴酸液上。让胚胎在吸头内保持上下移动,观察卵透明带是如何溶解的。迅速将胚胎移入M2培养基。用几滴培养基溶液洗涤并移入刚才制成的凹陷中。 胚胎培养条件是聚集产量的一个重要因素,因为胚胎要培养过夜,如果是四倍体胚胎在移入母体前需要培养48小时。在培养的每个细节都必须小心操作控制。这包括温度,大气,培养基,室温操作时间及矿物油质量。
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胚胎显微操作-胚胎分割

胚胎显微操作-胚胎分割 (一)概况 胚胎分割是通过对胚胎进行显微操作,人工制造同卵双生或同卵多生的技术,它是扩大胚胎来源的一条重要途径,其理论依据是早期胚胎的每一个卵裂球都具有独立发育成个体的全能性。 本世纪三十年代,Pinrus等首次证明兔2细胞胚的单个卵裂球在体内可发育成体积较小的胚泡。之后,Tarkowski等人的实验胚胎学研究成果进一步证明了哺乳动物2细胞胚的每一个卵裂球都具有发育成正常胎儿的全能性。七十年代以来,随着胚胎培养和移植技术的发展和完善,哺乳动物胚胎分割取得了突破性进展。Mullen等于1970年二分2细胞期鼠胚,通过体外培养及移植等程序,获得了小鼠同卵双生后代。Willadsen于1979年通过分离早期胚胎的卵裂球,成功地获得了绵羊的同卵双生后代。国内张涌等通过分割小鼠、山羊早期胚胎,均获得了同卵双生后代。进一步研究表明,四分胚,八分胚也可以发育成新个体。窦忠英等将7日龄的牛胚胎一分为四,实现了同卵三生。值得说明的是,随着胚胎分割次数的增多,分割胚的发育能力明显降低,这可能与胞质的不断减少有关。 (二)分割方法 胚胎分割方法主要有显微操作仪分割和徒手分割两种。
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绿色荧光蛋白GFP的应用

绿色荧光蛋白GFP的应用 绿色荧光蛋白GFP的应用主要集中在利用其荧光性质的基础上作为一种标记物。 1 绿色荧光蛋白GFP在分子生物学上的应用 1.1 绿色荧光蛋白GFP作为报告基因 报告基因是一种编码可被检测的蛋白质或酶的DNA,如传统的荧光素酶(LUX)基因和β-葡萄糖苷酶(GUS)基因。绿色荧光蛋白GFP作为基因报告可用来检测转基因效率,把绿色荧光蛋白GFP基因连接到目的基因的启动子之后,通过测定GFP的荧光强度就可以对该基因的表达水平进行检测。目前,此方法无论在农杆菌介导或基因枪介导的植物遗传转化中还是在活细胞、转基因胚胎和动物中都已得到非常广泛的应用,特别是在活细胞基因表达的时空成像方面。 1.2 绿色荧光蛋白GFP作为融合标签 绿色荧光蛋白GFP最成功的一类应用就是把绿色荧光蛋白GFP作为标签融合到主体蛋白中来检测蛋白质分子的定位、迁移、构象变化以及分子间的相互作用,或者靶向标记某些细胞器。在多数情况下,绿色荧光蛋白GFP基因在N-或C-末端与异源基因用常规的分子生物学手段就可以接合构成编码融合蛋白的嵌合基因,其表达产物既保持了外源蛋白的生物活性,又表现出与天然GFP相似的荧光特性。GFP的这种特性为蛋白质提供了一种荧光标记,不仅可以检测蛋白质分子的定位、迁移,还可以研究蛋白质分子的相互作用以及蛋白质构象变化,并依靠荧光共振能量转移即FRET来进行检测。
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仪器信息网行业应用栏目为您提供1690篇其他检测方案,可分别用于荧光成像检测、DNA纯度检测、种类检测、分离纯化检测,参考标准主要有等