Openfield 的行为观察

Openfield 的行为观察   一.　通常观察啮齿类动物在0F中的如下行为：    1-探究行为(explore)  包括用鼻子嗅闻空气和旷场地板气味等运动行为。该运动通常 表现为弯曲的运动路线，运动速度很慢．而且动物身体腹部常紧贴着旷场地板。    2-走动行为(walk)  常表现为较直的运动路线和相对较快的活动速度，且不用鼻子嗅 闻空气和旷场地板气味等运动行为。    3．旋转行为(spinturn) 包括追逐自己尾巴而形成的固定模式的环绕运动。    4·自我梳理行为(selfgroom) 快速清洁面部、前足和身体的行为。典型的完全的梳理 过程通常开始于动物轻轻地搔抓面部。动作逐渐增多并沿着身体向下．终止于尾尖。不论完 全梳理和非完全梳理过程(常在梳理身体时中断)均应被计人“梳理”过程。     5·坐(sit) 睁着眼睛而嗅闻空气的非运动状态。定义“坐”的最小非运动时间应为3s。     6．睡眠(sleep) 眼睛紧闭且完全不运动状态。     7·伸展注意行为(stretchattend)  动物伸展身体，特别是从比较安全之处(如旷场角落) 向着相对较不安全之处(旷场中央部分)伸展身体．是动物对危险的评价行为。动物腹部保持 平坦紧贴旷场底部，并用鼻子嗅闻空气和地板气味。当头部和前足向前伸展时，后足保持不 动一该行为往往结束于前足“后退一步”，从而使身体不再伸展。当进行一系列伸展注意行为 时或者伸展注意行为之后进行运动活动则“后退一步”行为就不完整：在此情况下，应对任何 一次身体完全伸展记数为。伸展注意”行为．    8·返回行为(return)  当进行非常慢的探索行为时，动物经常返回到起点。在整个过程 中动物腹部紧贴旷场底部保持平坦．    9·后腿站立(rear)动物站立．双前足离开地板：沿旷场侧壁站立时．动物常靠在旷场 侧壁上。    10．gt6(jump)所有四足全部离开旷场地板。  通常研究的指标还包括累积运动(locomotion)包括探究和走动。对于运动、走动、探索．旋转、坐、梳理和睡眠等行为．既要记录行为的发生频率(frequency)，也要记录行为的持续时间(duration)，通常记录5min测试时间内的发生频率和总持续时间；对于伸展注意、返回行为、后腿站立和跳动则仅记录5rain内的发生率一同时，还应记录从动物放入OF的一刻起．到所发生任何一个行为的潜伏期．OF通常分为5个部分(图30一1)，按照发生每个行为时所处的位置对每个行为进行打分： ①四角之一(总面积的8．16％)： ②四壁之一(40．82％)； ③外环(32．65％)：  ④内环(16．33％)； ⑤中央(2．04％)。 当动物四足全部进入图中某个领域时方可认为动物已经进入该领域。由于伸展注意行为是一个“定向性”的行为，所以不以动作发生时的位置评分，而以动作所指的区域(如伸展注意外环就是指伸展姿势由旷场侧壁指向外环)。另外，动物在旷场角落和沿侧壁的时间总和记作趋触性总分。  动物从放入OF的一刻起的各种潜伏期也可用于评估，如离开角落潜伏期、离开侧壁潜伏期、进入内环潜伏期、进入中央潜伏期、后腿站立潜伏期、位于中央时后腿站立潜伏期、沿侧壁后腿站立潜伏期、非趋触性位置后腿站立潜伏期、自我梳理潜伏期、返回行为潜伏期、走动潜伏期、伸展注意潜伏期或伸展注意不同旷场部位的潜伏期等。 动物接受不同剂量电离辐射作用后，通过检测动物在旷场中各种行为指标的变化反映电离辐射对动物行为的作用规律。 二、器材    动物行为测量和分析自动化系统．包括】．0m×1．0m大小的旷场箱、变焦摄像头、图像采集卡、计算机、行为测量和分析自动化软件；5％醋酸，  三、方法和步骤  实验时，旷场上方的摄像机采集动物在旷场中的行为表现，通过图像采集卡传人计算机记录、存储并分析。具体过程如下：     (--)辐射动物    成年雄性SD大鼠60只，随机分为4组，分别受到0、8、20、25Gy的1射线照射，以制备假辐射(OGy)、中度骨髓型放射病(8Gy)、肠型放射病(20Gy)和脑型放射病(25Gv)等动物模型。分别于照后即刻、24h、48h对各组动物进行分组测量，每个时问点测量每组动物5只，每只动物仅测量一次。不重复检测。     (二)旷场测量    1．调整旷场位置，使之位于摄像头正下方；    2．调整实验室内光线，使之形成漫反射光．而且旷场内部没有较大的反光斑：    3．用5％的醋酸一水溶液清洗旷场，使之不残留其余异味．以后每只动物检测之后均需用5％的醋酸一水溶液清洗旷场，以免动物之间通过气味传递信息；    4．将动物分别从同一起步点放入旷场箱，进入旷场箱后随其自由活动，同时开启行为记录和分析自动化系统程序，通过计算机记录动物活动情况；    5．每只动物测量5min，测试每只大鼠后．对每只动物的排便情况进行记录和清理，并用5％醋酸彻底清洁实验箱；    6．实验中应严格控制实验环境．如背景噪音不得高于65dB．实验环境应在弱光照射条件下进行，同时应避免人为因素对动物行为的干扰。