三重四极杆液质联用法检测血液中氟乙酸根含量

本文参照中华人民共和国公共安全行业标准《GA/T 1916-2021 法庭科学 生物检材中氟乙酸根离子检测 液相色谱-质谱法》，建立了使用岛津LCMS-8045测定血液中氟乙酸根含量的方法，可满足血液中氟乙酸根离子含量的检测。SSL-CA23-118Excellence in Science Excellence in ScienceLCMSMS-766 三重四极杆液质联用法检测血液中氟乙酸根 含量 LCMSMS-766 摘要：本文建立了使用三重四极杆液质联用法 测 定血液中氟乙酸根含量的方法。该方法检出限低于 5.3ng/mL， 优于标准《GA/T 1916-2021》中 35 ng/mL 的检出限要求；35 ng/mL基质加标样品连续6次进样重复 性分析，保留时间和峰面积的 RSD 分别为 0.37%和4.04%；可满足血液 中 氟乙酸根离子含量的检测 。 关键词：三重四极杆液质联用仪 血液 氟乙酸根 技术特点： 小相较 《GA/T 1916-2021》，本方法检测氟乙酸根的灵敏度优 于 标准。 ※进样时使用更小的进样体积，可减少样品基质对仪器的污染。 氟乙酸及其盐毒性极强，主要用于杀灭老鼠等啮齿 类动物。相关研究表明，大鼠经口 半 数致死量为 0.22mg/kg， 其对人类也有剧毒，一旦进入人体后会严 重 损害神 经细胞和心脏等组织，造成心脏骤停或呼吸衰竭而死亡。为安全计，1982年起我国开始禁止生 产、销 售和使用该 类物质。 2021法庭科学生物检材中氟乙酸根离子检 测 液相色谱 -质谱法》规定了使用液相色谱 -高分辨质谱或液相色谱-三 重 四极杆质谱法检测氟乙酸根含量的方法。本文参照 该标准，使用岛津LCMS-8045 建立了血液中氟乙酸根的 检测方法。该方法快速、简单、灵敏，可实现对血液中 氟乙酸根含量的有效检测。 中 华人民共和国公共安全行业标准 《GA/T 1916- 实验部分 1.1仪器 本实验采用三重四极杆液质联用仪。具体配置为： 系统控制器 SCL-40 自动进样器 器：：SIL-40C X3 输液 泵 LC-40B X3 质 谱 仪：：LCMS-8045柱温 箱：CTO-40S 色谱工作站： LabSolutions Ver . 5.114 在线脱气机：[DGU-405 1.2分析条件 液相条件 色谱柱 主： Shim-pack Velox PFPP (100 mm×.2.1 mml.D， 2.7 um)岛津(上海))实验器材有限公司 ， P/N： 227-32021-03 动相 A 相-10mM乙酸铵水溶液(pH8)， B相-乙腈 流 ：柱 温 40°C 流 速 束：：0.3 mL/min 洗脱方式： 梯度洗脱，初始浓度为B相98%， 进样体积：2uL 时间程序见表1 表1 梯度洗脱程序 Time Module Command Value 2.00 Pumps Pump B Conc. 98 2.10 Pumps Pump B Conc. 95 6.00 Pumps Pump B Conc. 95 6.10 Pumps Pump B Conc. 50 8.00 Pumps Pump B Conc. 10 8.10 Pumps Pump B Conc. 98 11.00 Controller Stop 离 子 源：ESI，负 离子模式 DL管温度：150°C 接口电压：-3kV 加热模块 温 度：：4400℃ 雾 化 气：氮气 3.0 L/min 接口温度：300°℃ 干 燥 气：舞氮气 10 L/min 扫 描 模 式： 多反应监测(MRM) 加 热 气：空气10L/min MRM 参 数：见表2 碰 撞 气：氩气(230kPa) 表2 MRM 参 数 化合物 化学分子式 CAS NO. 前体离子 产物离子 Q1 Pre Bais(V) CE(V) Q3 Pre Bais(V) 氟乙酸 C2H3FO2 144-49-0 76.90 57.00* 30.0 15.0 10.0 33.00 27.0 16.0 13.0 *表示定量离 子 样品前处理 参考 《GA/T 1916-2021法庭科学生物检材中氟乙酸根离子检测液相色谱-质谱法》中“7.1.1样品前处理”部分对血液样品进行蛋白沉淀。 结果与讨论 3.1专属性 空 白样品和质控样品(基质添加浓度 35 ng/mL) 的 MRM 色谱图如图1所示，色谱峰分离良好，通道无干扰。 图1 空白样 品 和质控样品(基质添加浓度 35ng/mL) 的MRM 色谱图 3.2检出限 浓度为 8 ng/mL 的基质加标样品，其定量与定性 离 子色谱峰的 S/N 均大于4.5，其检出限低于 5.3 ng/mL，满足标准关于 35 ng/mL 的检出限要求。 图2 8 ng/mL 基质 加 标样品 3.3重复性实验 以 35 ng/mL 基质加标样品，连续进样6次，考察仪器的重复性，测定结果见表3。 表3 基质加标样品保留时间和峰 面 积重复性结果 (n=6) 目标物 加标浓度 (ng/mL) 保留时间 RSD (%) 峰面积 RSD (%) 氟乙酸根 35 0.37 4.04 3.4样品测试和回收率考察 平行处理2份空白加标样品(空白基质加标 100 ng/mL)，依据标准要求，以保留 时 间(偏差不超过2.5%)和离子丰度比(相对偏差不超过20%)作为定性依据，检测样品中氟乙酸根含量，相对相差应不超过20%，回 收率为 91.4~103.8%，结果如表4所示。 表44样 品 检测结果 名称 保留时间偏差 (%) 离子丰度比偏 差(%) 检测浓度 (ng/mL) 加标浓度 (ng/mL) 回收率 (%) 平均浓度 (ng/mL) 相对相差 (%) 平行样1 0.36 12.7 91.4 100 91.4 97.6 6.4 平行样2 0.29 10.8 103.8 103.8 结论 本文参照中华人民共和国公共安全行业标准《GA/T 1916-2021 法庭科学生物检材中氟乙酸根离子检测液相色谱 -质谱法》，建立了使用岛津LCMS-8045 测定血液中氟乙 酸 根含量的方法，可满足血液中氟乙 酸 根离子含量的检测 。 岛津应用云 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心