LC-MSMS测定动物性食品中阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱、利多卡因、普鲁卡因残留量

本文建立了一种使用岛津三重四极杆液质联用仪测定动物性食品中阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱、利多卡因、普鲁卡因残留量的方法。各化合物在线性范围在0.1~10 μg/L间，相关系数R＞0.999。在猪肉基质中添加低、中、高三个浓度（0.5、1、5 μg/kg）的混标，回收率在78.0-102%之间，RSD在1.12~8.31%之间。该分析方法灵敏度高，重复性好，准确度高，稳定可靠。可供相关行业检测人员参考使用。SSL-CA23-090Excellence in Science Excellence in ScienceLCMSMS-755 LC-MSMS 测定动物性食品中阿托品、东莨菪 碱、山莨菪碱、利多卡因、普鲁卡因残留量 LCMSMS-755 摘要：依据 GB 31658.19-2022《食品安全国家标准动物性食品中阿托品、东 莨 菪碱、山莨菪碱、利 多卡因、普鲁卡因残留量的 测 定液相色谱-串联质谱法》，建立了使用岛津 三 重四极杆液质联用技术测定动物性食品中 阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱、利多卡因、普鲁卡因残留量的方法 。采用外标法建立基质匹配校准曲线，在0.1~10ug/L 浓度范围内线性关系良好，相关系数大于0.999。在0.1、1、10 ug/L 三个浓度下，各化合物的保留时间 和峰面积的 RSD% 分别在 0.09~0.16%和1.28~6.51%之间，仪器精密度良好。对空白猪肉样品进行了0.5、1、5 ug/kg 三个浓度水平的加标回收实验，回收率在78.0-102%之间。该方法灵敏度高，分析 时 间短，结果准确，可用于动物性食品中阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱、利多卡因、普鲁卡因残留量的快速检测 。 关键词：LC-MS/MS 动物性食品 阿托品 东莨菪碱 山莨菪碱 利多卡因 普鲁卡因 技术特点： 心阿托品、东莨菪碱、、山莨菪碱、利多卡因 、普鲁卡因灵敏度远高于标准要求。 畜肉注水通常是活体注入，利用机械泵等强行向 猪、八 牛、羊等体内灌水，此时由 于 外部的刺激，动物 体就会由于疼痛而产 生 应激反应，在这种条件下宰杀 的畜肉品质较差的肉，大大影 响 肉的销售质量。为了 提高肉的质 量 ，确保肉的感官状态良好，同时躲避监 管及处 罚 ，不法商贩对注水方式进行改良，在注水的 同时，为动物注射一些保水药物和消炎药物，便于肌 肉蓄积大量水分，并缓解其疼痛感。目前报道的用 于 保水剂的药物有 阿 托品、东莨菪碱、L 山莨菪碱、利多 卡因和普鲁卡因等。残留的药物毒性较大，会引起如 反应迟顿、精神衰颓、昏迷、口干、瞳孔放大等症状。因此，为保障畜禽产品的质 量 安全和资源环境的可持续 发展，有必要对动物性食品中阿托品、东莨菪碱、山莨 菪碱、利多卡因和普鲁卡因的残留进行严格监管。 本文依据 GB 31658.19-2022《食品安全国家标准 动物性食品中阿托品、东莨菪碱、山 莨菪碱、利多卡因、普鲁卡因残留量的测定液相色谱-串联质谱法》，使用 岛津三重四极杆液质联用仪，建立了动物性食品中阿托 品、东莨菪碱、山莨菪碱、利多卡因、普 鲁 卡 因残留量 的检测方法，，可为相关从业人 员 提供参考。 1.1仪器 岛津三重四极杆液质联用仪 LCMS-8050，配置信息如下： 系统 控 制器： CBM-20A 脱气机： DGU-20A 5R 输 液 泵 灵 ：LC -30AD×2柱温箱：CTO-20AC 自动进样器 号 ：SIL-30AC 质 质 谱 仪：LCMS-8050占 色谱工作站 ： Labsolutions Ver.5.109 1.2分析条件 液相色谱条件 色 谱 柱：：Shim-pack GIST C18-AQ HP (50 mm x2.1mml.D.，1.9 um， 岛津(上海)实验器材有限公司，P/N：227-30807-01) 流 动 相： A-0.1%甲酸水+2mM甲酸铵溶液；B-0.1%甲酸乙 腈 进样体积：1uL 柱 温：40°℃流 速：0.3 mL/min 洗 针 液：甲醇/水=1：1(v：v) 洗脱方式： 梯度洗脱，B相起始浓度为5%，时间程序如表1所示。 表 1梯度洗脱时 间 程序 时间 (min) 单元 处理命令 值 0.50 泵 B Conc 5 1.00 泵 B Conc 30 1.50 泵 B Conc 90 2.50 泵 B Conc 90 2.51 泵 B Conc 5 4.00 控制器 STOP 质谱条件 离 子 化模式：ESI十 雾化气流速：：3.0 L/min 接口电压：4kV干燥气流速：10.0L/min 接口 口 温 度：3300℃加热气流速：：10.0L/min DL 温 度：2250℃碰 撞 气：氩气 加热模块温度：400℃扫 描 模式：多反应监测(MRM) MRM 参 数：见表2 表2 MRM 参数 序号 中文名称 英文名 CAS 号 前体离子 产物离子 Q1 Pre Bias(V) CE(V) Q3 Pre Bias(V) 1 阿托品 Atropine 51-55-8 290.10 93.05124.10* -10-10 -31-24 -17-24 138.05* -11 -24 -26 2 东莨菪碱 Scopolamine 51-34-3 304.10 156.05 -11 -17 -16 122.05 -11 -29 -24 3 山莨菪碱 Anisodamine 17659-49-3 306.20 140.05* -11 -25 -27 4 利多卡因 Lidocaine 137-58-6 235.20 58.00 -11 -37 -10 86.05* -12 -20 -30 5 普鲁卡因 Procaine 59-46-1 237.20 100.10* -14 -17 -19 164.05 -10 -18 -28 代表定 量 离子对 ■样品前处理 图 1 样品前处理 步 骤 ■结果与讨论 3.1标准样品谱图 图20.1 ug/L 猪肉基质标准溶液的 MRM色谱图 3.2校准曲线和灵敏度 分别配制0.1、0.2、0.5、1、2、5、10 pg/L的猪肉基质匹配标准溶液按1.2中的分析条件进行 测 定，外标法定量。以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制校准曲线。根据 0.1 ug/L标样数据，以3倍信噪比、10倍信噪比计算 检出限、定量限。各化合物线性方程、相关系数、检出限以及定量限如表3所示。 表3线性方程及灵敏度 序号 化合物 校准曲线 相关系数r 检出限 (ug/L) 定量限 (ug/L) 1 阿托品 Y=44348X-2042 0.9999 0.036 0.120 2 东莨菪碱 Y=21661X-326 0.9999 0.003 0.010 3 山莨菪碱 Y=39108X-1851 0.9996 0.006 0.019 4 利多卡因 Y=105773X-5810 0.9998 0.006 0.022 5 普鲁卡因 Y=11180X-781 0.9996 0.029 0.097 3.3重 复性 实 验 取 0.1、1和10 ug/L猪肉基质匹配混合标准溶液，连续进样6次，考察仪器的重复性，测定结果见表4。 表4保留时间和峰面积重复性结果 (n =6) 序号 化合物 RSD%(0.1ug/L) RSD% (1 ug/L) RSD% (10 ug/L) R.T Area R.T Area R.T Area 1 阿托品 0.10 4.81 0.10 2.03 0.14 2.04 2 东莨菪碱 0.12 5.94 0.09 2.62 0.14 3.48 3 山莨菪碱 0.17 6.51 0.10 3.90 0.15 1.28 4 利多卡因 0.12 5.66 0.10 2.08 0.14 2.08 5 普鲁卡因 0.12 3.28 0.14 5.00 0.16 1.82 3.4加标回收率 将猪肉空白样品进行低、中 、高三个浓度水平加标，按照上述前处理方法处理后上机，每个水平重复测定4次。结果如表5所示：平均回收率在78.0-102% 之间， RSD 在 1.12~8.31%之间。 表5 添加回 收 率结果 (n =4) 序号 化合物 低浓度 (0.5 ug/kg) 中浓度(1 ug/kg) 高浓度 (5 ug/kg) 平均回收率(%) RSD(%) 平均回收率(%) RSD(%) 平均回收率(%) RSD(%) 1 阿托品 102 4.49 98.1 4.90 88.2 1.49 2 东莨菪碱 86.2 6.87 84.2 4.02 90.8 3.15 3 山莨菪碱 99.2 6.45 90.8 8.31 83.3 4.18 4 利多卡因 96.7 5.30 90.8 1.93 78.0 1.12 5 普鲁卡因 101 5.28 95.6 5.14 80.7 4.28 结论 本文建立了一种使用岛津三重四极杆液质联用仪测定动物性食品中 阿 托品、东莨菪碱、山莨菪碱、利多卡因、普鲁卡因残留量的方法。各化合物在线性范围在0.1~10 ug/L间，相关系数R> 0.999。在猪肉基质中添加低、中 、高三个浓度(0.5、1、5ug/kg) 的混标，回收率在 78.0-102% 之间， RSD 在1.12~8.31%之 间 。该分 析 方 法灵敏度高，重复性好，准确度高，稳定可靠。可 供相关行业检测人员参考使用。 岛津应用云