LC-MS/MS法测定动物性食品中左旋咪唑残留量

本文参考标准方法GB 31658.21-2022《食品安全国家标准 动物性食品中左旋咪唑残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》，建立了使用岛津三重四极杆液质联用仪检测动物性食品中左旋咪唑残留量的方法。在0.5~50 μg/L浓度范围内线性良好，相关系数r在0.999以上。加标浓度为1、5和10 μg/kg的样品，回收率在79.7%~92.7%之间。该分析方法灵敏度高，重复性好，准确度高，稳定可靠。可供相关行业检测人员参考使用。SSL-CA23-093Excellence in Science Excellence in ScienceLCMSMS-756 LC-MS/MS 法测定动物性食品中左旋咪唑残 留量 LCMSMS-756 摘要：本文建立了使用岛津三重四极杆液质联用技术测定动物性食品中左旋咪唑残留量的方法。采用外标法 建立基质匹配校准曲线，在0.5~50 ug/L浓度范围内线性关系良好，相关系数大于0.999。在高、中、低 三 个 浓度下，化合物的保留时间和峰面积的RSD% 分别在 0.26~0.58%和0.72~2.12%之间，仪器精密度良好。对 空白样品进行了1、5、10 ug/kg三个浓度水平的加标回收实 验 ，回收率在79.7~92.7%之间 。该方法灵敏度高，分析时间短，结果准确，，可用于动物性食品中左旋咪唑残留的准确定量检测。 关键词：三 重 四极杆液质联用仪 动物性食品 左旋 咪 唑 技术特点： ※左旋咪唑灵敏度远高 于 标准 GB31658.21-2022的要求。 小分析速度快，3.5分钟完成分析，优于标准方法。 左旋咪唑是一种常用的驱肠虫药物，主要用于控制 牛、羊、猪、鸡等动物 胃 肠道和肺脏中的线虫，具有广 谱、高效、性质稳定等优点；同时又是一种免疫调节剂，能提高细胞免疫功能，增强机体抗感染的作用，对某些 急慢性病有良好的辅助治疗作用，在我国畜牧养殖业中 具有十分广泛的用途。如果不当使用，容易造成在动物 产品中的残留，对处于食物链末端的人类的身体健康造 成不良影响。 我国GB31650-2019《食品安全国家标准食品中兽 药最大残留限量》中 规定，牛、羊、猪、家禽(泌乳期禁用、产蛋期禁用)肌肉、脂肪、肾中左旋咪唑的最大残留限 量为 10 ug/kg， 肝中为 100 ug/kg。 因此，为保障畜禽 产品的质量安全和资源环境的可持续发展，有必要对动 物性食品中左旋咪唑的残留进行严格监管。 本文使用岛津三 重 四极杆液质 联 用仪，参考 GB 31658.21-2022《食品安全国家标准动物性食品 中 左旋咪 唑残留量的测定液相色谱-串联质谱法》中的方法，建 立了 一 种快速准确测定动物性食品中左旋咪唑的方法。 1.1仪器 岛津三重四极杆液质联用仪 LCMS -8050，配置信息如下： 系统控制器 CBM-20A 气 7机：：DGU-20A 5R 脱 输 液 泵 LC -30AD×2 柱温 箱：CTO-20AC 质1谱 自动进样器 SIL -30AC 仪： LCMS-8050 色谱工作站： Labsolutions Ver . 5.109 1.2分析条件 液相色谱条件 色 谱 柱： Shim-pack GIST C18-AQ HP (50 mm x 2.1 mm l.D.，1.9 um，岛津 (上海)实验器材有限公司， P/N：227-30807-01) 流 动 相 目： A-0.1%甲酸水+2mM甲酸铵溶液；B-0.1%甲酸乙腈 进样体积：lpL 柱 温：40℃流 速 0.4 mL/min 洗针液：甲醇/水=1：1(v：v) 洗脱方式： 梯 度 洗脱，B相起始浓度为10%，时间程序如表1所示。 表 1 梯度洗脱时间程序 时间 (min) 单元 处理命令 值 0.50 泵 B Conc 10 1.50 泵 B Conc 95 2.00 泵 B Conc 95 2.01 泵 B Conc 10 3.50 控制器 STOP 质谱条件 离子化模式：ESI十 雾化气流速：3.0L/min 接口电压：4kV 干燥气流速：10.0L/min 接口 温 度：3300℃加热气流速：10.0L/min DL温 度：250℃碰 撞 气：氩气 加热模块温度：400℃扫描模式：多反应监测(MRM) MRM参 数：见表2 表2 MRM 参数 中文名称 英文名 CAS 号 前体离子 产物离子 Q1 Pre Bias(V) CE(V) Q3 Pre Bias(V) 178.0* -10.0 -23.0 -19.0 左旋咪唑 Levamisole 16595-80-5 205.1 123.0 -11.0 -28.0 -22.0 *代表定量离子对 。 ■样品前处理 1 样品前处理步骤图 ■结果与讨论 3.1标准溶液谱图 图2 猪肉基质匹配标准溶液 MRM 色 谱图 (0.5ug/L) 图3校准曲线 3.2校准曲线和灵敏度 分别配制0.5、1、2、5、10、20、50 ug/L的左旋咪唑猪肉基质匹配标准溶液，取1uL进样，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标做标准曲线，校准曲线如图3所示。根据0.5 ug/L 基质标样数据，以3倍信噪比计算仪器检出 限为 0.0044 ug/L， 10倍信噪比计算定 量 限为 0.0148 ug/L。 3.3重复性 实 验 取 0.5、10和50 ug/L左旋咪唑猪肉基质匹配标准溶液，连续进样6次，考察仪器的重复性，测 定结果见表3。 表3保留时间和峰面积 重 复性结果(n =6) 化合物 RSD% (0.5 ug/L) RSD% (10 ug/L) RSD% (40 ug/L) R.T Area R.T Area R.T Area 左旋咪唑 0.58 2.12 0.43 1.73 0.26 0.72 3.4加标回收率 将猪肉空白样品进行低、中、高三档浓度水平加标，按照上述前处理方法处理后 上 机，每个水平重复测定4次，平均回收率在79.7~92.7%之 间 ，具体结果见表4。 表4添加 回 收 率结果(n =4) 名称 低浓度 (1ug/kg) 中浓度 (5ug/kg) 高浓度 (10ug/kg) 平均回收率(%) RSD(%) 平均回收率(%) RSD(%) 平均回收率(%) RSD(%) 左旋咪唑 92.7 7.10 85.7 2.00 79.7 6.16 结论 本文参考标准方法GB 31658.21-2022《食品安全国家标准动物性食品中左旋咪唑残留量的测定液相色 谱-串联质谱法》，建立了使用岛津 三 重四极杆液质联用仪检测动物性食品 中 左旋咪唑残留量的方法 。在 0.5~50 ug/L 浓度范围内线性良好，相关系数r在0.999以上。加标浓度为1、5和10 ug/kg 的样品，回收率在 79.7%~92.7%之间。该分析方法灵敏度高，重复性好，准确度高，稳定可靠。可供相关行 业 检测人 员 参考使用。