化妆品中6-甲基香豆素检测方案(气相色谱仪)

【仪电分析】化妆品中6-甲基香豆素的测定-气相色谱法 香豆素是一种可以在很多植物中发现的化合物，此外还可以人工合成这种物质。由于具有特殊的气味，很多人喜欢用它作为食品添加剂和香水成分使用。香豆素被视为对肝脏和肾脏存在潜在毒性，有毒理实验发现，香豆素是大鼠的可疑致肿瘤物，此外，对人体肝脏有损伤。因此，香料的安全性将直接影响化妆品的安全性。 本方法参考《化妆品安全技术规范》(2015版)中第二法：气相色谱法，该方法适用于液态水基类、膏霜乳液类、粉类化妆品中6-甲基香豆素含量的测定。 一、、方法原理 样品处理后，经气相色谱仪分离，氢火焰离子化检测器(FID)检测，根据保留时间定性，峰面积定量，以标准曲线法计算含量。 二、主要仪器及试剂 a.气相色谱仪：GC128，配备FID 检测器； b.毛细管色谱柱： HP-5MS， 30m×0.32mm×25um； C.分析天平； d. 超声波清洗机； e.甲醇：色谱纯； f.无水硫酸钠：分析纯； g.6-甲基香豆素：纯度≥99.0%； 三、实验方法 3.1气相色谱参考条件 柱箱温度：90℃保持 1min， 以10℃/min 的速率升温至210℃，保持 5min； 进样口温度：200℃； 检测器温度：200℃； 柱流量：1.0 mL/min； 进样量：1.0pL； 进样方式：分流进样； 分流比：5： 1。 3.2标准曲线的绘制 3.2.16-甲基香豆素标准储备液：准确确取标准品6-甲基香豆素 0.100g于100mL 的容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度。即得浓度为 1000ug/ mL 的6-甲基香豆素的标准储备溶液。 3.2.2标准工作液：准确移取1mL标准储备液于 10 mL容量瓶中，用甲醇定容，充分摇匀，即得 100 ug/ mL 的标准工作溶液。分别取 0.25 mL、 0.5mL、1.5mL、 2.5mL、 4mL标准工作液于 5 mL 容量瓶中甲醇定容，即得到浓度为5ug/mL、10ug/mL、30ug/mL、50ug/mL、80ug/mL的标准工作溶液，在4℃冰箱中，可使用1周。 按上述参考色谱条件，浓度由低到高分别进样1uL，以溶液的浓度为横坐标，对应的峰面积为纵坐标，作标准曲线得线性回归方程。 3.3样品预处理 称取化妆品 1.0g(精确至 0.01g)样品于 50mL 锥形瓶中，加6mL甲醇。超声振荡 20min，溶液转入10mL容量瓶中，用少量甲醇清洗锥形瓶，洗液移入10mL容量瓶，用甲醇定容后加入3g无水硫酸钠脱水，经0.45um 滤膜过滤，滤液作为待测样液。 四、实验结果 4.标1准工作曲线 6-甲基香豆素的标准工作曲线如图1所示： 工作曲线【校正计算：标准曲线】(注：更改某一组分保留时间，名称或浓度数据时，请先取消“全部组分"复选框。 图16-甲基香豆素标准工作曲线 4.2标准溶液色谱图 浓度为100ug/mL的6-甲基香豆素标准溶液的色谱图如图2所示： 图2浓度为100ug/mL的6-甲基香豆素标准溶液色谱图 4.3样品色谱图 样品经前处理，按照仪器参考条件分析测定，得到的色谱图如图3所示： [pA] 图3样品色谱图 4.4结果计算 6-甲基香豆素含量按下式计算： 式中： X-试样中6-甲基香豆素的质量百分比含量% C一从标准曲线中得出的6-甲基香豆素浓度，单位为微克每毫升(ug/mL) Ⅴ一试样溶液的体积，单位为毫升(mL) m一试样的质量，单位为克(g) 计算结果保留两位有效数字 4.5实际样品测试 对市面上某化妆品进行分析测定，测试结果未检出。 4.6定性、定量重复性测试 以某一浓度溶液连续进样7次，计算相对标准偏差，结果如图4所示。由结果可以看出，定性测试的相对标准偏差为0.14%，定量测试的相对标准偏差为2.71%。 标题 组分1->时间 组分1->浓度 组分1->面积 02)20210 10.2783 70.0000 188.2905 03)20210 10.2733 70.0000 186.7392 004)_20210E 10.2833 70.0000 190.3765 005)_202109 10.3033 70.0000 178.5888 06)_20210 10.2833 70.0000 191.1795 07 )_20210 10.2583 70.0000 179.5316 01)_20210 10.2633 70.0000 183.7937 8 RSD=0.0014 平均值=10.2776极大值=10.3033极小值=10.2583 极差值=0.0450 RSD=0.0000 平均值=70.0000极大值=70.0000极小值=70.0000 RSD=0.0271 平均值=185.5000极大值=191.1795极小值=178.5888 9 10 11 12 极差值=0.0000 极差值=12.5907 图4重复性测试结果 【仪电分析】化妆品中6-甲基香豆素的测定-气相色谱法香豆素是一种可以在很多植物中发现的化合物，此外还可以人工合成这种物质。由于具有特殊的气味，很多人喜欢用它作为食品添加剂和香水成分使用。香豆素被视为对肝脏和肾脏存在潜在毒性，有毒理实验发现，香豆素是大鼠的可疑致肿瘤物，此外，对人体肝脏有损伤。因此，香料的安全性将直接影响化妆品的安全性。本方法参考《化妆品安全技术规范》（2015版）中第二法：气相色谱法，该方法适用于液态水基类、膏霜乳液类、粉类化妆品中6-甲基香豆素含量的测定。一、方法原理 样品处理后，经气相色谱仪分离，氢火焰离子化检测器（FID）检测，根据保留时间定性，峰面积定量，以标准曲线法计算含量。二、主要仪器及试剂a. 气相色谱仪：GC128，配备FID检测器； b. 毛细管色谱柱：HP-5MS，30m×0.32mm×25μm；c. 分析天平；d. 超声波清洗机；e. 甲醇：色谱纯；f. 无水硫酸钠：分析纯；g. 6-甲基香豆素：纯度≥99.0%；三、实验方法3.1 气相色谱参考条件柱箱温度：90℃保持1min，以10℃/min的速率升温至210℃，保持5min；进样口温度：200℃；检测器温度：200℃；柱流量：1.0 mL/min；进样量：1.0 μL；进样方式：分流进样；分流比：5：1。3.2标准曲线的绘制3.2.1 6-甲基香豆素标准储备液：准确称取标准品6-甲基香豆素0.100g于100mL的容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度。即得浓度为1000μg/ mL的 6-甲基香豆素的标准储备溶液。3.2.2 标准工作液：准确移取1 mL标准储备液于10 mL容量瓶中，用甲醇定容，充分摇匀，即得100μg/ mL的标准工作溶液。分别取0.25 mL、 0.5 mL 、1 .5 mL、 2.5 mL、 4 mL标准工作液于5 mL容量瓶中甲醇定容，即得到浓度为5μg/ mL、10μg/ mL、30μg/ mL、50μg/ mL、80μg/ mL的标准工作溶液，在4℃冰箱中，可使用1周。按上述参考色谱条件，浓度由低到高分别进样1μL，以溶液的浓度为横坐标，对应的峰面积为纵坐标，作标准曲线得线性回归方程。3.3 样品预处理称取化妆品1.0g(精确至0.01g)样品于50mL锥形瓶中，加6mL甲醇。超声振荡20min,溶液转入10mL容量瓶中，用少量甲醇清洗锥形瓶，洗液移入10mL容量瓶，用甲醇定容后加入3g无水硫酸钠脱水，经0.45μm滤膜过滤，滤液作为待测样液。 四、实验结果4.1 标准工作曲线6-甲基香豆素的标准工作曲线如图1所示： 图1 6-甲基香豆素标准工作曲线4.2 标准溶液色谱图浓度为100μg/ mL的6-甲基香豆素标准溶液的色谱图如图2所示： 图2 浓度为100μg/ mL的6-甲基香豆素标准溶液色谱图4.3 样品色谱图样品经前处理，按照仪器参考条件分析测定，得到的色谱图如图3所示： 图3 样品色谱图4.4 结果计算 6-甲基香豆素含量按下式计算：X=式中：X—试样中6-甲基香豆素的质量百分比含量%C—从标准曲线中得出的6-甲基香豆素浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）V—试样溶液的体积，单位为毫升（mL）m—试样的质量，单位为克（g）计算结果保留两位有效数字4.5 实际样品测试对市面上某化妆品进行分析测定，测试结果未检出。4.6 定性、定量重复性测试以某一浓度溶液连续进样7次，计算相对标准偏差，结果如图4所示。由结果可以看出，定性测试的相对标准偏差为0.14%，定量测试的相对标准偏差为2.71%。 图4 重复性测试结果