化妆品中214种风险物质检测方案(液质联用仪)

SSL-CA20-755Excellence in Science Excellence in ScienceLCMS-QTOF-038 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD. -Analytical Applications CenterTel：86(21)34193996Email： sshzyan@shimadzu.com.cnhttp：//www.shimadzu.com.cn 岛津高分辨液质联用仪快速筛查化妆品中214种风剑物质 LCMS-QTOF-038 摘要：本文利用岛津超高效液相色谱-四极杆杆行时间串联质谱仪，建立了化妆品中214种风险物质的鉴别和确认方法。使用 LabSolutions insight 建立了200余种风险物质的高分辨二级质谱库，根据保留时间及精确质量数进行鉴别，并使用二级质谱库及典型二级碎片离子丰度比进行确认。10 ng/mL 浓度的两种基质加标样品(柔肤水、护肤霜)，以溶剂标液进行定量计算，超过70%的化合物回收率在50-120%之间。该方法可用于化妆品中风险物质的快速筛查。 关键词： LCMS-Q-TOF化妆品风险物质 作为一种直接作用于人体的化学工业产品，化妆品给我们带来美丽的同时，健康安全必须得到保障，然而，我国化妆品行业一些不健康的现象，例如：不法厂家给化妆品中添加可能危害健康的禁用物质等行为给爱美人士的健康带来隐患。 备受关注的《化妆品监督管理条例》正式出台，于2021年1月1日起施行。 《条例》共6章80条， 从四个方面对化妆品生产经营活动及其监督管理予以规范。 本文参考相关标准，建立了基于岛津超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱的化妆品中风险物质物质的筛查方法，MS1一级高质量准确度数据快速筛查，MS2二级特征碎片离子匹配精准定性。为化妆品中风险物质物筛查方法建立提供参考。 实验部分 1.1仪器 岛津 LCMS-9030 超高效液相色谱四飞杆飞行时间质谱联用仪，具体配置为 输液泵： LC-30AD×2 系统控制器： CBM-20Alite 自动进样器：SIL-30AC 飞行时间质谱仪：LCMS-9030 柱温箱： CTO-20AC 色谱工作站： LabSolutions Ver. 5.98 在线脱气机： DGU-20A5R LabSolutions Insight Ver. 3.7 1.2分析条件 液相色谱条件 色谱柱： Shim-pack GIST-HP C18 100 mm l.D.× 2.1 mm I.D..，1.9um(岛津(上海)实验器材有限公司，P/N： 227-30807-02) 流动相：A相-0.1%甲酸水+2mM 甲酸铵；B相-乙腈 洗针模式：进样前后洗针， External only (进样针外壁清洗)， Rinse Port 流速：0.25mL/min 柱温：40℃ 进样体积：5uL 洗针液：甲醇/水=1：1 (v：v) 洗脱方式：梯度洗脱，B相初始浓度为5%，时间程序见表1。 表1 梯度洗脱时间程序 Time(min) Module Command Value 0.50 泵 B.Conc 5 5.00 泵 B.Conc 30 13.00 泵 B.Conc 60 16.00 泵 B.Conc 98 18.00 泵 B.Conc 98 18.50 泵 B.Conc 5 22.00 控制器 Stop 质谱条件 离子源： ESI+/ESI-加热模块温度：400℃雾化气流速：3.0L/minDL温度：250C加热气流速：10.0L/min接口温度：300℃ 干燥气流速：10.0 L/min 扫描模式： MSScan(m/z 50-1000)& DDA MS/MS (m/z 50-1000) 1.3试剂 乙腈：色谱级，室温保存。 实验用水：由 Milli-Q Plus 水净化系统经去离子与二次净化制得。 甲酸：色谱级，纯度98%，室温保存。 甲酸铵：色谱级，纯度99%，室温保存。 1.4样品前处理 精密称量 0.5g柔肤水、护肤霜样品置于 15mL离心管中，加入2mL乙腈，充分涡旋2 min，使其充分与样品混合均匀，再加入7mL乙腈，超声提取10 min， 静置至室温，乙腈定容10 mL，充分摇匀，4000 r/min离心 5 min， 取1mL上清液过0.22 um滤膜后上机分析。 结果与讨论 2.1准确质量数提取结果 214种风险物质提取离子流色谱图 EIC图 (10ng/mL)如图1所示。 图1 214种风险物质提取离子流色谱图 EIC图 (10 ng/mL) 2.2方法检出限 配制浓度 10 ng/mL的214种风险物质混合标准样品，上机进行测定，214种风险物质品种信息、中英文名、CAS、一级离子、保留时间、定量限((ASTM，S/N=10)等结果见表2。 表2 214种风险物质化合物信息 LCMS-QTOF-038 LCMS-QTOF-038 LCMS-QTOF-038 197 西玛津 Simazine 122-34-9 C-HCIN M+H 202.08540 10.7 198 十三吗啉 Tridemorph 24602-86-6 C19H39NO M+HT 298.31044 15.5 199 二苯胺 Diphenylamine 122-39-4 C12H11N M+HTT 170.09643 16.2 200 炔苯酰草胺 Propyzamide 23950-58-5 C2HuCLNO M+HT 256.02905 15.6 201 甲草胺 Alachlor 15972-60-8 C14H20CINO， M+HT 270.12553 16.2 农 残 202 倍硫磷 Fenthion 55-38-9 C10H1503PS2 M+HT 279.02730 16.9 203 腈菌唑 Myclobutanil 88671-89-0 C15H17CIN4 M+HT 289.12145 15.0 204 氟硅唑 Flusilazole 85509-19-9 C16H15F2N3Si M+H一T 316.10761 15.8 205 氯苯嘧啶醇 Fenarimol 60168-88-9 C17H12CI2N20 [M+HT 331.03995 15.0 206 特乐酚 Dinoterb 1420-07-1 C10H12N205 M-H 239.06734 16.8 207 碘苯腈 loxynil 1689-83-4 C-H3INO M-HT 369.82313 13.8 208 氨苄西林三水合物 Ampicillin Trihydrate 7177-48-2 C16H19NO4S·3Hz0 M-3H，O+H 350.11690 11.9 209 青霉素G 钾盐 Penicillin G potassium salt 113-98-4 C16H17N204SK M-K+2HT 335.10600 10.0 青 210 青霉素V钾盐 Penicillin V potassium salt 132-98-9 C16H17N20，SK M-K+2HT 351.10092 10.8 211 苯唑西林钠 Oxacillin sodium monohydrate 7240-38-2 C19H18NNaO，S·H20 [M-Na-H，O+2H]T 402.11182 11.5 212 氯唑西林钠 Cloxacillin sodium hydrate 7081-44-9 C19H19CINNaO，S·H20 [M-Na-2H，0+2H] 436.07285 12.3 213 萘夫西林钠 Nafcillin sodium hydrate 7177-50-6 C21H23N2NaOS·H20 [M-Na-2H，O+2H]* 415.13222 12.7 214 双氯西林钠 Dicloxacillin sodium hydrate 13412-64-1 C19H16CIN，NaO，S·H，O [M-Na-H，O+2H] 470.03387 13.4 2.3二级高分辨质谱库建立 配制 100 ng/mL 的214种风险物质混合标准样品溶液，按照前述条件进行前处理，上机分析。进行一级MS扫描，以及 MS/MS(DDA)扫描，获得不同碰並能(10V、20V、30Ⅴ、40V、50V、60V)下的二级质谱图，使用LabSolutions insight 软件进行二级质谱库的建立。200余种风险物质高分辨二级质谱库收载了1000 余张二级质谱图，以及化合物的中英文名、分子式、保留时间、色谱条件，高分辨质荷比等信息。 图2 风险物质二级质谱库预览 2.4化妆品样品加标鉴别与确认 按照前述分析条件，制备100 ng/mL加标样品，根据保留时间及精确质量数进行鉴别，二级质谱库或典型二级碎片离子丰度比进行确认。以磺胺氯哒嗪为例演示加标样品的定性过程，混合标液中磺胺黄哒嗪m/z285.0208 色谱出峰时间 RT=8.321 min。利用岛津 LabSolutions Insight Explore 的谱库检索功能，对加标样品中 m/z 285.0208 的化合物进行二级质谱图谱库匹配，相似度得分96分，如图4所示。典型碎片离子与标准谱库中质量偏差小于5 ppm， 如表3所示。 图3 m/z 285.0208提取离子流图 图4 m/z 285.0208二级质谱图谱库检索结果 表3m/z 285.0208二级质谱图典型碎片离子质量偏差 化合物 典型二级碎片离子1 典型二级碎片离子2 标准谱库 92.04920 156.0115 加标样品 92.04933 156.0110 质量偏差 1.41229 3.076696 2.5加标回收率 10 ng/mL 柔肤水、护肤霜两种加标样品进行计算加标回收率，回收率结果如图5、6所示，柔肤水、护肤霜两种化妆品的回收率在 50-120%之间的化合物数量分别为156和179个。 — 图5柔肤水基质加标(10ng/mL)回收率结果 图6 护肤霜基质加标(10ng/mL) 回收率结果 结论 本文采用岛津公司 LCMS-9030 超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱联用仪，建立了化妆品中214种风险物质鉴别与确认的方法，同时创建了二级质谱库。经添加回收样品分析，质谱库匹配度良好。该方法简便、灵敏、定性筛查准确性好，可用于化妆品中风险物质的快速定性筛查。 岛津应用云 本文采用岛津公司LCMS-9030超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱联用仪，建立了化妆品中214种风险物质鉴别与确认的方法，同时创建了二级质谱库。经添加回收样品分析，质谱库匹配度良好。该方法简便、灵敏、定性筛查准确性好，可用于化妆品中风险物质的快速定性筛查。