鱼肉中氯硝柳胺检测方案(液相色谱仪)

SSL-CA20-655Excellence in Science Excellence in ScienceLCMSMS-579 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD. -Analytical Applications CenterEmail： sshzyan@shimadzu.com.cn Tel：86(21)34193996http：//www.shimadzu.com.cn LCMSMS 测定鱼肉中的氯硝柳胺含量 LCMSMS-579 摘要：本文参照《食食安全国家标准水产品中氯硝柳胺残留量的测定液相色谱-串联质谱法》 (报批稿))，使用岛津三重四极杆液质联用仪，建立了鱼肉中氯硝柳胺的分析方法。鱼肉样品按照标准规定前处理步骤提取和净化后，进样分析。结果表明：氯硝柳胺在样品中的定量限低于 0.05 ng/mL，满足标准要求；处理后的空白样品中加加系列浓度氯硝柳胺，在0.5-20 ng/mL的线性范围内，外标法各校准点浓度准确度分别在 90.2-112.3%之间，R为0.9979；残留考察结果表明ULOQ 加标样品进样后无明显系统残留；空白样品添加不同浓度氯硝柳胺后进行处理，回收率在 80.1~83.4%，满足标准要求。该方法灵敏度和准确度高，适合鱼肉中的氯硝柳胺检测。 关键词： LCMSMS鱼肉氯硝柳胺 氯硝柳胺是一种人工合成的高效灭绦虫药，，也可用作杀鳗剂和灭螺剂，为水杨酰胺类衍生物。氯硝柳胺在水产行业主要用来防治血吸虫，其在鱼肉中存在富集风险，且可能通过食物链富集从而影响食用者的身体健康。 本文参照《食品安全国家标准水产品中氯硝柳胺残留量的测定液相色谱-串串质谱法》(报批稿)，使用岛津三重四极杆液质联用仪，建立了鱼肉中氯硝柳胺的分析方法。该方法灵敏度和准确度高，适合鱼肉中氯硝柳胺残留量的检测。 实验部分 1.1仪器 本实验采用岛津 Nexera LC-40B X3与三重四及杆质谱仪 LCMS-8045 联用系统。具体配置为： 系统控制器：CBM-40自动进样器： SIL-40C X3输液泵：LC-40BX3质谱仪： LCMS-8045柱温箱：CTO-40S色谱工作站： LabSolutions Ver. 5.99 SP2 1.2分析条件 液相色谱条件： 色谱柱： Shim-pack VP-ODS， 150 mm×2.0 mml.D.，5um(岛津(上海)实验器材有限公司，P/N：228-34937-94) 流动相：A-水；B-乙腈 柱温：35℃ 流速：0.30mL/min 进样量：5uL 洗脱方式：梯度洗脱，B相初始浓度为50% 表1 梯度洗脱程序 Time(min) Module Command Value 2.00 Pumps Pump B Conc. 50 2.50 Pumps Pump B Conc. 90 7.00 Pumps Pump B Conc. 90 7.10 Pumps Pump B Conc. 50 10.00 Controller Stop 质谱条件： 分析仪器：LCMS-8045 离子源： ESI 雾化气流速： 3.0 L/min 加热气流速：10.0 L/min 干燥气流速：10.0 L/min 加热模块温度：300℃DL温度：250℃离子源温度：400℃扫描模式：多反应监测(MRM)MRM参数：见表2 表2 MRM参数 序号 化合物名称 前体离子 产物离子 Q1 Pre Bias (V) CE Q3 Pre Bias (V) 1 氯硝柳胺 324.90 288.90* 22.0 17.0 30.0 170.95 16.0 28.0 18.0 *定量离子对 图11前处理过程 1.3样品前处理 参照《食品安全国家标准水产品中氯硝柳胺残留量的测定液相色谱-串联质谱法》》(报批稿)中“7.1提取”和“7.2净化”部分，过程如图1所示。 结果讨论 2.1专属性和灵敏度 空白样品和空白加标0.05 ng/mL样品(方法定量限浓度的 1/10) 的 MRM 色谱图如图2所示，空白样品无干扰。 图2空白样品和0.05 ng/mL 加标样品 MRM 色谱图 图33校准曲线 2.2校准曲线 处理后的空白样品中添加氯硝柳胺，得浓度分别为0.5、1、2.5、5、10、20 ng/mL的基质匹配标准溶液，外标法建立校准曲线如图3所示。 Q 324.90>288.90 (-) 4.83e3 图4残留考察 2.3残留考察 ULOQ 加标样品进样后，空白样品进样分析所得色谱图如图4所示(黄线)，氯硝柳胺保留时间处无明显色谱峰。 2.4重复性考察 对不同浓度的基质加标样品分别连续分析6次，，计算保留时间和峰面积的 RSD. 结果见表3，保留时间RSD 均不高于0.26%，峰面积 RSD 均不高于2.02%。 表3 传保留时间和面积RSD (n=6) 名称 进样浓度(ng/mL) 保留时间 RSD(%) 峰面积RSD)((%) 基质加标样品 0.5 0.26 2.02 2.5 0.12 0.65 500 0.10 0.37 2.5回收率考察 空白样品中添加不同浓度的氯硝柳胺后进行前处理，上机测定，考察回收率。两浓度加标样品回收率分别为80.1%和83.4%，符合标准中关于回收率在70~110%的要求。 表4 回收率 No. 样品名称 检测值 加标浓度 (ng/mL) 加标测定值(ng/mL) 回收率(%) 1 鱼肉 N.D. 一 2 鱼肉加标1 0.8 0.65 80.1 3 鱼肉加标2 10 8.34 83.4 注：N.D.代表未检出 结论 本文参照《食品安全国家标准水产品中氯氯柳胺胺留量的测定液相色谱-串联质谱法》 (报批稿))，使用岛津三重四极杆液质联用仪，建立了鱼肉中氯硝柳胺的分析方法。该方法灵敏度和准确度高，满足标准要求，适合鱼肉中的氯硝柳胺检测。 岛津应用云 本文参照《食品安全国家标准 水产品中氯硝柳胺残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》（报批稿），使用岛津三重四极杆液质联用仪，建立了鱼肉中氯硝柳胺的分析方法。该方法灵敏度和准确度高，满足标准要求，适合鱼肉中的氯硝柳胺检测。