医用包装弹性体密封件中亚硝胺检测方案(气质联用仪)

SSL-CA20-630Excellence in Science Excellence in ScienceGCMSMS-223 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD.- Analytical Applications CenterTel：86(21)34193996Email： sshzyan@shimadzu.com.cnhttp：//www.shimadzu.com.cn GC-MS/MS 法测定医用包装弹性体密封件提取液中12种亚硝胺含量 GCMSMS-223 摘要：本文采用岛津 GCMS-TQ8050 NX 对医用包装弹性体密封件中12种亚硝胺进行检测。结果显示：在0.1~100 ng/mL 浓度范围内，12种亚硝胺化合物线性相关系数均大于0.999，取浓度为1.0 ng/mL标准溶液重复进样6次，各组分峰面积 RSD 均小于5%，三个浓度水平加标实验的平均回收率在89.8%~120.3%范围内。检测方法预处理简单、灵敏度高、专属性好，适用于医用包装弹性体密封件中12种亚硝胺的筛查。 关键词：弹性体密封件 亚硝胺 可提取物GC-MS/MS NDBA)、N-亚硝基吗啉(N-nitrosomorpholine，NMOR)、N-亚硝基哌啶(N-nitrosopiperidine，NPIP)、NPYR；国际癌症研究协会确定了对人体有致癌活性的7种亚硝胺： NDMA、NDEA、N-亚硝基二丙胺(N-nitrosodi-npropylamine， NDPA)、NDBA、NMOR、NPYR 和 NPIP。 本文涵盖了上述亚硝胺化合物，同时结合文献报道可能存在的其他亚硝胺，采用三重四极杆气质联用仪 (GC-MS/MS) 建立了12种亚硝胺化合物同时测定的方法，以期为弹性体密封件中亚硝胺的质量控制提供参考。 1.1仪器 三重四极杆气质联用仪 GCMS-TQ8050 NX 1.2分析条件 色谱柱： SH-Stabilwax，30 m×0.25 mm×0.25 um 柱温程序：40℃ (1 min)_30℃/min_130℃ (2min)_2℃/min_140℃_40℃ /min_250℃ (10 min) 载气控制方式：线速度(36.7 cm/sec) 离子源温度：230℃ 进样口温度：220℃ 接口温度：250℃ 进样方式：不分流 检测器电压：相对于调谐结果+0.7 kV 进抹量： 1pL 采集方式：MRM，化合物信息见表1。 表1 12种亚硝胺化合物信息表 No. 中文名称 英文简写 CAS 号 保留时间 (min) 目标离子对 (m/z) CE 定性离子对 (m/z) CE 2 N-亚硝基二甲胺 NDMA 62-75-9 5.002 74.00>42.10 18 74.00>44.10 6 N-亚硝基甲乙胺 NMEA 10595-95-6 5.336 88.00>71.10 3 88.00>73.10 6 N-亚硝基二乙胺 NDEA 55-18-5 5.575 102.00>85.10 3 102.00>56.10 15 N-亚硝基二丙胺 NDPA 621-64-7 7.001 130.00>113.20 3 130.00>43.10 12 N-亚肖基二丁胺 NDBA 924-16-3 10.097 116.00>99.10 6 158.00>99.20 9 N-亚硝基-N-甲基苯胺 NMPHA 614-00-6 10.290 107.00>77.10 24 107.00>51.10 33 7 N-亚硝基-N-乙基苯胺 NEPHA 612-64-6 10.363 121.00>106.10 12 121.00>77.10 30 8 N-亚硝基哌啶 NPIP 100-75-4 10.720 114.00>84.10 9 114.00>97.20 6 N-亚硝基吡咯烷 NPYR 930-55-2 11.396 100.00>68.10 12 100.00>70.10 6 10 N-亚硝基吗啉 NMOR 59-89-2 12.080 116.00>56.10 12 116.00>86.10 6 11 N-亚削基二苯胺 NDPHA 86-30-6 16.313 169.00>167.10 27 168.00>166.10 27 12 N-亚硝基二苄胺 NDBZA 5336-53-8 19.759 181.00>103.10 18 181.00>166.10 12 样品前处理 样品前处理如图1所示： 图1 样品前处理流程图 结果与讨论 3.1.标准品色谱图 12种亚硝胺化合物标准溶液色谱图图见图2。质量色谱图见图4，各物质出峰时间见表1。 图2 12种亚硝胺化合物标准溶液色谱图(100 ng/mL) NEPHA. NPIP NPYR 图3 亚硝胺质量色谱图图 (1.0ng/mL) 3.2标准曲线及仪器检出限 以甲醇为溶剂，配制亚硝胺标准溶液，浓度梯度为0.1、0.5、1.0、2.0、5.0、8.0、10、20、50、80、100ng/mL， 以浓度为横坐标，，化合物峰面积为纵坐标绘制标准曲线，部分亚硝胺化合物标准曲线如图2所示。表2罗列了亚硝胺各组分的标准曲线回归方程的相关系数(R)和平均相对响应因子的相对标准偏差(RRFRSD%)，以3倍信噪比计算仪器检出限(1(MDL)，结果如表2所示. 表2 标准曲线及仪器检出限 No. 化合物名称 相关系数R RRFRSD)((%) MDL(ng/mL) 1 NDMA 0.9999 3.78 0.01 2 NMEA 0.9998 5.11 0.01 3 NDEA 0.9998 5.14 0.02 4 NDPA 0.9999 6.63 0.01 5 NDBA 0.9999 9.30 0.02 6 NMPHA 0.9996 11.21 1.32 NEPHA 0.9996 11.60 0.03 8 NPIP 0.9999 3.21 0.02 9 NPYR 0.9999 3.20 0.04 10 NMOR 0.9999 3.56 0.01 11 NDPHA 0.9997 3.19 0.01 12 NDBZA 0.9997 3.78 0.02 Area 2.0e5-N-亚硝基二甲基胺 Curve Fit： Default (Linear) 1.5e5 Weighting： Default(None) ，Zero： Default (Not Forced) 1.0e5 5.0e4 0.0e0 Area Area·N-亚硝基二乙基胺1.y=2009.805x-487.8009ly=7439.724x-2396.666lR2=0.9998991 R=0.9999495R2=0.9997988R=0.99989946.0e54C.0e5urve Fit： Default (Linear)Weighting： Default (None)Zero： Default (Not Forced)3.0e54.0e52.0e5-2.0e51.0e5-0.0e000 50 50 0Conc. (ppm)Conc. (ppm) NDMA NDEA NDBA Area ·2.0e5· 1.5e5 1.0e5 5.0e4 0.0e0· Conc. (ppm) 图4 部分亚硝胺化合物标准曲线 3.3重复性 取1.0 ng/mL的标准溶液，连续进样6针，考察重复性。结果见表3. 表3 峰面积重复性结果 No. 化合物名称 #1 #2 #3 #4 #5 #6 RSD(%) 1 NDMA 8628 8384 8608 8253 8414 8706 2.1 2 NMEA 55642 53110 53963 52412 52727 53739 2.2 3 NDEA 35937 35697 35988 34106 34877 35119 2.1 4 NDPA 25386 25840 25238 23953 24338 24599 2.8 5 NDBA 20875 20354 21415 19925 20140 20829 2.7 6 NMPHA 17162 16193 16495 16877 17638 17069 3.0 7 NEPHA 40525 37511 40183 37556 37181 37003 4.1 8 NPIP 36079 37175 36770 34374 34753 36031 3.1 9 NPYR 10331 10518 10596 9733 10330 10128 3.0 10 NMOR 42778 42828 42682 40003 41355 41081 2.8 11 NDPHA 188886 193047 189969 177066 181985 183121 3.2 12 NDBZA 22732 22512 22749 20984 21085 21171 4.0 3.4实际样品分析 按照前文所述方法对医用胶塞样品进行了前处理后上机测定，样品测试谱图如下图5所示。对实际样品进行加标测试，加标浓度为5.0、10和20 ng/g。样品中各组分含量、样品加标量及加标回收率结果见表4。结果显示样品加标回收率在89.8%~120.3%之间。 图5)桂样品测试谱图 表4 样品及回收率测试结果 No. 化合物名称 样品测试浓度 加标测试浓度 平均回收率(%) (ng/g) (ng/g) (n=3) 5.91 118.2 NDMA N.D. 10.02 100.2 18.38 91.9 5.94 118.7 2 NMEA N.D. 10.40 104.0 18.54 92.7 5.98 119.6 3 NDEA N.D. 10.72 107.2 18.90 94.5 5.82 116.3 4 NDPA N.D. 10.52 105.2 19.13 95.6 5.19 103.9 5 NDBA N.D. 10.74 107.4 19.80 99.0 7.34 103.4 6 NMPHA 2.17 12.54 103.7 22.80 103.1 4.49 89.8 NEPHA N.D. 9.52 95.2 18.42 92.1 6.02 120.3 8 NPIP N.D. 10.42 104.2 19.03 95.2 5.08 101.7 9 NPYR N.D. 10.25 102.5 19.01 95.0 6.72 118.8 10 NMOR 0.78 10.65 98.7 19.01 91.2 6.40 110.9 11 NDPHA 0.86 10.09 100.9 18.71 93.5 5.52 110.5 12 NDBZA N.D. 9.81 98.1 19.00 95.0 结论 使用岛津 GCMS-TQ8050 NX 建立了医用包装弹性体密封件提取液中12种亚硝胺的测定方法。在0.1~100ng/mL浓度范围内，12种亚硝胺化合物线性相关系数均大于0.999，取浓度为1.0 ng/mL标准溶液重复进样6次，各组分峰面积 RSD 均小于5%。对实际样品进行分析，样品加标回收率在89.8%~120.3%范围内。方法重复性好、灵敏度高，可用于药用胶塞中12种亚硝胺的筛查。 岛津应用云 使用岛津GCMS-TQ8050 NX建立了医用包装弹性体密封件提取液中12种亚硝胺的测定方法。在0.1~100 ng/mL浓度范围内，12种亚硝胺化合物线性相关系数均大于0.999，取浓度为1.0 ng/mL标准溶液重复进样6次，各组分峰面积RSD均小于5%。对实际样品进行分析，样品加标回收率在89.8%~120.3%范围内。方法重复性好、灵敏度高，可用于药用胶塞中12种亚硝胺的筛查。