化妆品中防腐剂检测方案(气质联用仪)

SSL-CA20-638Excellence in Science Excellence in ScienceGCMS-418 岛津应用云岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD. - Analytical Applications CenterTel： 86(21)34193996Email： sshzyan@shimadzu.com.cnhttp：//www.shimadzu.com.cn GCMS 法测定化妆品中19种防腐剂含量 GCMS-418 摘要：本文利用岛津气相色谱质谱联用仪建立了化妆品中19种防腐剂的测定方法。样品经甲醇超声萃取、离心并过滤后上机分析。分析结果表明：在0.2~10 ug/mL校准曲线浓度范围内，线性相关系数均大于0.999，线性良好。取浓度为 0.2 ug/mL标准溶液重复分析6次，峰面积相对标准偏差小于7%，重复性良好。对面霜类化妆品进行检测并加标，加标浓度为20 ug/g，加标回收率在76~111%之间，3次加标实验相对标准偏差小于5%。本方法参考国家药品监督管理局起草的《化妆品中防腐剂检测方法》，检出限、线性、重复性等满足标准相关要求，可以用于化妆品中防腐剂的测定。 关键词：气相色谱质谱联用仪防腐剂化妆品 化妆品在生产的过程中会加入各种营养物质，这些营养物质是微生物增生和繁殖的培养基地，因此在化妆品生产、使用和保存的过程中，会受到细菌的污染使产品出现异味和改变外观，为了抑制细菌的滋生和繁殖，必须在生产的过程中加入适量的防腐剂。过量的防腐剂对人体是有一定的伤害的，如苯氧乙醇在中等浓度下是有毒的，会对大脑和神经系统产生影响。欧盟化妆品 (Regulation(EC)1223/2009) 及《化妆品安全技术规范》2015版中严格规定可在化妆品中使用的 防腐剂种类及使用限量，并提供了部分防腐剂的检测方法。 2021年2月家家药品监督管理局组织起草了《化妆品中防腐剂检测方法》，其中部分化合物采用气相色谱法或气相色谱质谱联用法检测，相比于《化妆品安全技术规范》2015版中防腐剂检测方法，检出限更低，且检测防腐剂种类更多。本文参考此标准方法进行实验，结果表明检出限、线性、重复性等满足标准相关要求。 1.1仪器 气相色谱质普联用仪： GCMS-QP2020 NX 1.2分析条件 色谱柱： InertCap Pure Wax， 30 m×0.25 mm×0.25 um 柱温程序：40℃(1 min)_40℃ /min_80℃_10℃/min_230℃(1 min)_10℃ /min_260℃ (5 min) 进样口温度：250℃ 进样量：1uL 载气控制模式：恒流 离子源温度：230℃ 色谱柱流量：1mL/min) 接口温度：260℃ 检测器电压：调谐电压 +0.2 kV 采集模式：SIM，具体采集参数见表1。 结果讨论 2.1标准溶液色谱图 19种防腐剂标准溶液色谱图如图1所示，质量色谱图如图2所示。 图1 19种防腐剂标准溶液色谱图 5.03e4 Q105.00(+) 5.03e4 Q105.00(+) 10.5 苯甲酸丙酯 11.5 17.0 2，4-二氯苯甲醇 25.0 氯苯甘醚 4.24e4 12.0 苯甲酸丁酯 1.53e4 14.5 山梨酸 5.09e4 16.0 16.5 邻伞花烃-5-醇 8.02e4 17.5 18.0 苯甲酸苯基酯 表1 化合物信息 NO. 化合物名称 CAS号 保留时间(min) 定量离子(m/z) 定性离子(m/z) 1 甲酸 64-18-6 8.065 46 45，44 2 丙酸 79-09-4 8.066 74 73，45 3 三氯叔丁醇 6001-64-5 8.818 125 125，77 4 苯甲酸甲酯 93-58-3 9.152 105 77，136 5 苯甲酸异丙酯 939-48-0 9.550 105 123，77 6 苯甲酸乙酯 93-89-9 9.663 105 77，122 7 苯甲酸丙酯 2315-68-6 10.681 105 123，77 8 苯甲酸异丁酯 120-50-3 11.052 105 123，77 9 苯甲酸丁酯 136-60-7 11.830 105 123，122 10 苯甲醇 100-51-6 11.869 108 79，107 11 苯氧异丙醇 770-35-4 13.601 94 152，108 12 山梨酸 110-44-1 14.541 97 67，112 13 苯氧乙醇 122-99-6 14.55 94 138，77 14 2，6-二氯苯甲醇 15258-73-8 15.902 77 113，141 15 邻伞花烃-5-醇 39660-61-2 16.291 135 150，91 16 2，4-二氯苯甲醇 1777-82-8 17.064 77 141，113 17 十一烯酸 112-38-9 17.212 55 69，96 18 苯甲酸苯基酯 93-99-2 17.830 105 77，51 19 氯苯甘醚 104-29-0 25.181 130 130，202 2.2校准曲线和检出限 以甲醇为溶剂，配制0.2，0.5，1.0， 2.0，5.0， 10 ug/mL标准溶液，分析后得到各化合物标准曲线如图3所示，线性相关系数大于0.999，根据0.2 ug/mL标准溶液信噪比计算仪器检出限，具体线性相关系数及仪器检出限如表2所示。 图3 部分化合物标准曲线 表2 线性相关系数和仪器检出限 No. 化合物名称 相关系数R 仪器检出限(ug/mL) 1 甲酸 0.9998 0.030 2 丙酸 0.9999 0.002 3 三氯叔丁醇 0.9999 0.029 4 苯甲酸甲酯 0.9999 0.0012 5 苯甲酸异丙酯 0.9998 0.0011 6 苯甲酸乙酯 0.9999 0.0009 7 苯甲酸丙酯 0.9999 0.0007 8 苯甲酸异丁酯 0.9999 0.0007 9 苯甲酸丁酯 0.9999 0.0011 10 苯甲醇 0.9998 0.0018 11 苯氧异丙醇 0.9998 0.0009 12 山梨酸 0.9991 0.0041 13 苯氧乙醇 0.9998 0.0004 14 2，6-二氯苯甲醇 0.9999 0.023 15 邻伞花烃-5-醇 0.9999 0.0021 16 2，4-二氯苯甲醇 0.9999 0.015 17 十一烯酸 0.9997 0.011 18 苯甲酸苯基酯 0.9999 0.0016 19 氯苯甘醚 0.9999 0.0065 2.3重复性结果 取浓度为 0.2 ug/mL的标准溶液，重复分析6次，考察仪器重复性，具体结果见表3。 表3 重复性结果((n=6) No. 化合物名称 峰面积 RSD (%) 1 2 3 4 5 6 1 甲酸 6517 7544 7704 6670 7127 7055 6.57 2 丙酸 21806 22303 21007 22383 22955 23924 4.44 3 三氯叔丁醇 27437 28584 27742 28673 29699 32656 6.52 4 苯甲酸甲酯 89940 89828 89742 92673 92364 96153 2.74 5 苯甲酸异丙酯 85098 89249 88821 91345 91285 95051 3.67 6 苯甲酸乙酯 96280 98709 100025 102471 101216 106248 3.38 7 苯甲酸丙酯 97511 100825 101428 103736 103809 109011 3.75 8 苯甲酸异丁酯 101299 106335 106615 108939 108266 113319 3.65 9 苯甲酸丁酯 87575 91226 91321 94478 93284 98020 3.8 10 苯甲醇 42580 44438 43616 45322 45442 46438 3.12 11 苯氧异丙醇 82672 85467 85705 88139 88480 93278 4.14 12 山梨酸 30811 32986 33403 31989 34946 36863 6.43 13 苯氧乙醇 94020 96488 97178 99995 100186 104891 3.82 14 2，6-二氯苯甲醇 26519 27444 27673 27931 27638 29576 3.59 15 邻伞花烃-5-醇 110823 109750 110161 112911 113776 119165 3.11 16 2，4-二氯苯甲醇 21267 22637 22233 22956 23307 24176 4.33 17 十一烯酸 37334 36232 34262 37704 36620 37450 3.47 18 苯甲酸苯基酯 161134 170092 170278 173876 173755 182273 4.00 19 氯苯甘醚 78763 82237 85721 87742 88106 92918 5.75 2.4实际样品测试及加标回收率结果 取某面霜样品进行测定，样品中检出苯甲醇和山梨酸，1，色谱图如图4所示。对实际样品加标，加标浓度为20 ug/g，平行3次，样品中防腐剂浓度及加标回收率见表4。 图4 样品色谱图 表4 样品和回收率测定结果 No. 化合物名 样品平均浓度 加标后平均浓度 平均回收率 RSD (ug/g) (ug/g) (%) (%) 甲酸 N.D. 18.5 92.3 2.9 2 丙酸 N.D. 22.0 110.1 4.5 3 三氯叔丁醇 N.D. 21.7 108.4 1.3 4 苯甲酸甲酯 N.D. 20.6 103.2 1.8 5 苯甲酸异丙酯 N.D. 20.3 101.3 1.6 6 苯甲酸乙酯 N.D. 20.2 101.2 1.6 7 苯甲酸丙酯 N.D. 21.9 109.7 1.8 8 苯甲酸异丁酯 N.D. 21.9 109.6 2.1 9 苯甲酸丁酯 N.D. 22.2 110.8 2.1 10 苯甲醇 5.2 24.5 96.5 2.7 11 苯氧异丙醇 N.D. 20.2 101.2 3.0 12 山梨酸 93.7 112.5 110.1 2.4 13 苯氧乙醇 N.D. 20.4 102.0 3.5 14 2，6-二氯苯甲醇 N.D. 21.7 108.6 4.0 15 邻伞花烃-5-醇 N.D. 15.6 76.1 3.1 16 2，4-二氯苯甲醇 N.D. 22.2 110.8 4.9 17 十一烯酸 N.D. 20.7 103.4 3.1 18 苯甲酸苯基酯 N.D. 20.5 102.3 4.7 19 氯苯甘醚 N.D. 16.7 83.3 4.1 备注：N.D.表示未检出。 结论 本文建立了岛津 GCMS-QP2020 NX 气质联用仪测定女妆品中19种防腐剂的方法。分析结果表明：在0.2~10ug/mL标准曲线浓度范围内，线性相关系数均大于0.999，线性良好。取浓度为0.2 ug/mL标准溶液重复分析6次，峰面积相对标准偏差小于7%，重复性良好。对面霜类化妆品进行检测并加标，加标浓度为20 ug/g，加标回收率在76~111%之间，3次加标实验相对标准偏差小于5%。本方法参考国家药品监督管理局起草的《化妆品中防腐剂检测方法》，检出限、线性、重复性等满足标准相关要求，可以用于化妆品中防腐剂的测定。 本文建立了岛津GCMS-QP2020 NX气质联用仪测定化妆品中19种防腐剂的方法。分析结果表明：在0.2~10 μg/mL标准曲线浓度范围内，线性相关系数均大于0.999，线性良好。取浓度为0.2 μg/mL标准溶液重复分析6次，峰面积相对标准偏差小于7%，重复性良好。对面霜类化妆品进行检测并加标，加标浓度为20 μg/g，加标回收率在76~111%之间，3次加标实验相对标准偏差小于5%。本方法参考国家药品监督管理局起草的《化妆品中防腐剂检测方法》，检出限、线性、重复性等满足标准相关要求，可以用于化妆品中防腐剂的测定。