饲料中聚醚类抗生素检测方案(液相色谱仪)

ApplicationNews岛津SHIMADZU岛津企业管理(中国)有限公司岛津(香港)有限公司http：//www.shimadzu.com.cn用户服务热线电话： 800-810-0439第一版发行行：2021年3月400-650-0439 |前言 根据农林省第750号公告"，聚醚类抗生素被指定为饲料添加剂。关于这些组分的分析法，农林水产省消费/安全局长通知的《饲料分析标准》中列出了微生物学定量法、HPLC 法和LC/MS法2。 在微生物学定量法中，试验菌的继代保存和培养基的制备比较复杂，另外，由于试验菌要培养16~24小时，耗时久。另一方面， HPLC 法不使用微生物，因此不需要进行保存、培养试验菌等操作，即可快速进行分析。 在本文中，我们将介绍使用指定荧光检测法分析拉沙洛西钠的示例。此外，将报告01-00127-JP指定使用柱后衍生化可视检测法分析3种组分的示例。 |标准样品的分析 拉沙洛西钠的结构式如图1所示。由于拉沙洛西钠具有自发荧光，因此在通过色谱法将其与其他夹杂物质分离后，可以使用荧光检测器轻松进行测定。此外，使用本系统，可以实现装置从启动到停止的自动化。 图2为进样20 uL的0.1 ug(效价)/mL拉沙洛西钠标准溶液后得到的色谱图，分析条件如表1所示。。一次分析只需不到10分钟的时间，可快速进行分析。 图1拉沙洛西钠的结构式 图2拉沙洛西钠的色谱图 表1分析条件 系统 Nexera lite 色谱柱 Shim-pack ScepterTM C18-120 (250mm×4.6mm内径，5 um)” 流动相 水/甲醇/乙酸=60：940：1(v：v：v) 流速 1.0 mL/min 柱温 40°℃ 进样量 20 pL 样品瓶 岛津LabTotalM LC 1.5 mL己品瓶，玻璃** 检测 RF-20Axs Ex： 310 nm， Em：420nm *1P/N： 227-31020-06 ( *2在1000 mL水中溶解 2.72 g KHzPOa，随后通过添加 H，PO溶液将 pH调整至2.9至3.1 ) ( *3 P/N： 227-34001-01 ) 线性 《饲料分析标准》规定，1~15pg(效价)/mL的拉沙洛西钠标准溶液进样20uL，根据色谱图创建标准曲线。图3所示为根据该标准创建的标准曲线。线性相关系数(r)大于0.999，线性良好。 面积(x10，000，000) 浓度 图3拉沙洛西钠标准溶液的标准曲线(浓度：1~15pg(效价)/mL) 重现性 《饲料分析标准》中将所述目标饲料标准溶液的最低浓度规定为1ug(效价)/mL。进样20uL相当于规定最低浓度的十分之一，即0.1 ug(效价)/mL的溶液，连续分析6次。表2所示为保留时间、峰面积、各平均值和重现性(%RSD)。即使在低浓度下也获得了良好的重现性，由此可知，可在很宽的浓度范围内进行稳定的分析。 表20.1 pg(效价)/mL标准溶液的保留时间和峰面积的重现性 No. 保留时间 峰面积 1st 6.059 252485 2nd 6.060 251855 3d 6.059 251517 4th 6.060 252350 s th 6.059 252333 6th 6.059 250069 平均值 6.059 251768 RSD(%) 0.009 0.361 ( <参考文献> ) 根据农林省制定的《饲料及饲料添加剂组分标准等相关省令》3，规定在用于鸡饲料(包括肉仔鸡)时，作为饲料添加剂所含的拉沙洛西钠的量应为75g(效价)/t。因此，鸟类饲料规定的拉沙洛西钠检出浓度是否可以通过 HPLC 法进行分离和定量。 根据图4所示的“饲料分析标准”中所述的饲料萃取程序，在10.0g鸟饲料中加入相当于规定浓度的拉沙洛西钠，并确认了分离度和加标回收率。此时，溶液中的拉沙洛西钠浓度为7.5ug(效价)/mL。图5所示为进样该溶液20 uL进行分析时的色谱图，表3所示为加标回收率。可在不受夹杂组分影响的情况下对拉沙洛西钠进行分离和定量。 图4饲料的萃取程序 m 图5添加拉沙洛西钠的鸟类饲料萃取液的色谱图 表3拉沙洛西钠的加标回收率 饲料中的浓度 加标回收率 75g(效价)/t 96.9% 结论 在本文中，我们介绍了使用配备有荧光检测器的 Nexeralite分析饲料中的聚醚类抗生素拉沙洛西钠的示例。使用 HPLC 法，每次分析可在10分钟内快速完成分析，并在较宽的浓度范围内具有良好的重现性。此外，该装置从启动到停止均自动化，有助于提高工作效率。 岛津应用云 1)根据确保饲料安全性及质量改善相关的法律规定来确定饲料添加剂的事项(1976年7月24日农林省公告第750号) 2)饲料分析标准(2008年4月1日/19消安第14729号农林水产省消费/安全局长通知) ( 3)饲料以及饲料添加剂的组分标准等相关省令(1976年7月24日农林省令第35号) Nexera、Shim-packScepter 以及 SHIMADZULabTotal 是株式会社岛津制作所在日本及其他国家的商标。 ) *本资料未经许可不得擅自修改、转载、销售； ( *本资料中的所有信息仅供参考，不予任何保证。 ) 如有变动，恕不另行通知。 根据农林省第750号公告，聚醚类抗生素被指定为饲料添加剂。关于这些组分的分析法，农林水产省消费/安全局长通知的《饲料分析标准》中列出了微生物学定量法、HPLC法和LC/MS法。在微生物学定量法中，试验菌的继代保存和培养基的制备比较复杂，另外，由于试验菌要培养16～24小时，耗时久。另一方面，HPLC法不使用微生物，因此不需要进行保存、培养试验菌等操作，即可快速进行分析。在本文中，我们将介绍使用指定荧光检测法分析拉沙洛西钠的示例。此外，将报告01-00127-JP指定使用柱后衍生化可视检测法分析3种组分的示例。