血清中甲氰菊酯等五种拟除虫菊酯类农药检测方案(气质联用仪)

SSL-CA20-397Excellence in Science Excellence in ScienceGCMS-383 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD. -Analytical Applications CenterEmail： sshzyan@shimadzu.com.cn Tel：86(21)34193996http：//www.shimadzu.com.cn ATLAS-LEXT 和 GCMS 联用测定血清中甲氰菊酯等五种拟除虫菊酯类农药含量 GCMS-383 摘要：本方法采用 ATLAS-LEXT 全自动样品处理平台和 GCMS-QP2020 NX 联用检测血清中甲氰菊酯等五种拟除虫菊酯类农药。该方法最大特点为采用 ATLAS-LEXT处理样品，实现萃取、真空干燥等流程的自动化处理。实验结果表明：该方法基质标准曲线线性良好、子准溶液连续6针平行测定，重复性良好，加标回收率在45.7-68.0%之间。该方法简单方便，能用于血清中5种拟除虫菊酯类农药含量的测定。 关键词：气相色谱-质谱联用仪ATLAS-LEXT全自动样品处理平台子血清 拟除虫菊酯类农药 毒物分析是刑事案件分析中经常接触的一个项目。常规分析方法是采用液液萃取或乙腈沉淀蛋白等前处理之后，用单四杆气质联用仪进行分析。乙腈沉淀蛋白法操作简单，但是沉淀蛋白过程中会导致部分毒物回收率很低。而且提取样品中引入了大量血液中的水分，不利于气质分析，通常需要溶剂转换才能上机。液-液萃取法采用乙酸乙酯作为萃取溶剂，回收率较乙腈沉淀蛋白较好，且由于其与水互溶性较乙腈差很多，其提取样品中水含量低，可以直接上机进行测试。但是，传统的液-液萃取法存在耗时长、溶剂用量大、对人体和环境危害大等特点。 岛津公司 ATLAS-LEXT全自动样品处理平台可以对唾液、尿液、血液等样品中的毒物自动进行液-液萃取，复溶后可进行液质联用分析或气质联用分析，自动化程度高，可节省大量时间，提高效率。同时ATLAS-LEXT可根据前处理需要进行自定义编程，从而完美实现复杂前处理步骤，包括多次萃取，酸碱萃取等。 本文利用岛津 ATLAS-LEXT 和GCMS-TQ2020 NX联用，通过 ATLAS-LEXT编程功能自动处理样品，建立血清中甲氰菊酯等五种拟除虫菊酯类农药的检测方法，供相关人员参考。 实验部分 1.1仪器 ATLAS-LEXT+GCMS-QP2020 NX 1.2分析条件 色谱柱： SH-Rxi-5Sil MS， (30m×0.25mm×0.25 um) 载气控制方式：色谱柱流量 柱温程序：90℃(1min)_10℃ /min_300℃ (15 min)离子源温度：230℃ 色谱柱流量：1.0 mL/min 接口温度：280℃ 进样口温度：280℃ 检测器电压：调谐电压+0.3 kV 进样方式：不分流进样 采集方式： SIM 进样量：1uL 样品前处理 取0.5 mL血清样品到 ATLAS-LEXT 专用试管中，采用 ATLAS 自定义程序进行液液萃取。萃取流程：向样品中加入2mL的乙酸乙酯，震荡离心之后取1.5 mL 上清液到干净样品管中，随后在萃取后的样品中加入1.5 mL 的乙酸乙酯再次进行萃取，震荡离心后取 1.5 mL上清液合并到干净样品管中，最后真空干燥。干燥完成后加入0.5mL丙酮复溶， 0.22 um 滤膜过滤上机分析。 图→1ATLAS 前处理流程 结果与讨论 3.1标准品图谱 根据1.2中分析条件上机分析，得到5种拟除虫菊酯类农药色谱图见图2，相关化合物信息见表1，拟除虫菊酯类农药质量色谱图如图3所示。 图2 拟除虫菊酯类农药标准品色谱图(5mg/L) 表1 5种拟除虫菊酯类农药化合物信息 No. 化合物名称 英文名称 CAS 号 保留时间 定量离子 定性离子 (min) (m/z) (m/z) 1 甲氰菊酯 Fenpropathrin 39515-41-8 10.514 97.10 181.10 2 高效氯氟氰菊酯-1 Lambda-Cyhalothrin 91465-08-6 10.899 181.10 197.05 3 高效氯氟氰菊酯-2 11.043 4 氯氰菊酯-1 12.881 5 氯氰菊酯-2 Cypermethrin 52315-07-8 13.015 163.00 181.05 6 氯氰菊酯-3 13.111 7 氯氰菊酯-4 13.158 8 氰戊菊酯-1 Fenvalerate 51630-58-1 14.348 125.00 225.10 9 氰戊菊酯-2 14.730 10 溴氰菊酯-1 Deltamethrin 52918-63-5 15.446 181.05 252.90 11 溴氰菊酯-2 15.884 图3 5种拟除虫菊酯类农药质量色谱图 (0.2mg/L) 3.2标准曲线及检出限 按照1.3处理空白血清样品以获得空白基质，用空白基质配制5个不同浓度的标准品溶液，浓度分别为0.1、0.2、0.5、1、2和4mg/L。各组分标准曲线见图4。采用组校准制作校准曲线，线性相关系数和检出限见表2. Area Area 图4 5 种拟除虫菊酯类农药校准曲线 表2 5种拟除虫菊酯类农药线性相关系数和检出限 序号 名称 校准曲线 相关系数r 检测限(ug/L) 定量限(ug/L) 1 甲氰菊酯 Y=2147549X+18918.18 0.9983 4.40 14.7 2 高效氯氟氰菊酯 Y=3247341X+162561.3 0.9989 3.50 11.6 3 氯氰菊酯 Y=1973172X+182775.7 0.9989 9.74 33.3 4 氰戊菊酯 Y=2160193X-226014.4 0.9990 8.21 27.4 5 溴氰菊酯 Y=1155092X-138055.0 0.9986 4.74 15.8 3.3重复性测试 分别取浓度为 0.2、1、2mg/L的标准品溶液，连续进样6次，考察仪器的重复性，测定结果见表3. 表3 5种拟除虫菊酯类农药重复性 (n=6) 序号 样品名称 RSD%(0.2mg/L) RSD% (1mg/L) RSD% (2 mg/L) 1 甲氰菊酯 2.46 1.34 2.13 2 高效氯氟氰菊酯 2.61 1.80 2.20 3 氯氰菊酯 6.39 3.35 2.73 4 氰戊菊酯 4.98 2.36 1.87 5 溴氰菊酯 6.27 3.48 2.84 3.4样品加标回收率 取血清样品，按照1.3步骤制备加标样品，2个水平加标浓度分别为1.0和2.0 mg/L， 各浓度平行处理3份，加标回收率及重复性结果见表4。 图5 血清样品色谱图 (x1，000，000) 图6 血清加标样品色谱图 (1mg/L) 表4 加标回收率(n=3) 序号 名称 样品浓度 加标浓度(1.0mg/L) 加标浓度(2.0mg/L) (mg/L) 回收率% RSD% 回收率% RSD% 甲氰菊酯 N.D. 55.6 0.27 62.0 0.87 2 高效氯氟氰菊酯 N.D. 52.8 1.99 62.9 0.88 3 氯氰菊酯 N.D. 46.8 2.80 59.6 1.95 4 氰戊菊酯 N.D. 55.6 1.11 68.0 1.87 5 溴氰菊酯 N.D. 45.7 3.03 60.6 0.74 注：N.D.表示未检出 结论 本方法采用 ATLAS-LEXT 和 GCMS-QP2020 NX联用检测血清中5种拟除虫菊酯类农药。在 0.1-4 mg/L 浓度范围内，各组分线性良好，相关系数均在0.998以上，方法检出限在3.50-9.74 ug/L 之间。分别取浓度为 0.2、1、2 mg/L标准品溶液连续进样6针，峰面积 RSD%均小于6.4%，精密度良好。加标回收实验中，各组分回收率在45.7-68.0%之间。该方法简单方便，能用于血清中5种拟除虫菊酯类农药含量的测定。 岛津应用云 本方法采用ATLAS-LEXT全自动样品处理平台和GCMS-QP2020   NX联用检测血清中甲氰菊酯等五种拟除虫菊酯类农药。该方法最大特点为采用ATLAS-LEXT处理样品，实现萃取、真空干燥等流程的自动化处理。实验结果表明：该方法基质标准曲线线性良好、标准溶液连续6针平行测定，重复性良好，加标回收率在45.7-   68.0%之间。该方法简单方便，能用于血清中5种拟除虫菊酯类农药含量的测定。