化妆品中西咪替丁检测方案(液质联用仪)

SSL-CA19-269Excellence in Science Excellence in ScienceLCMSMS-444 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD. - Analytical Applications CenterTel：86(21)34193996Email： sshzyan@shimadzu.com.cnhttp：//www.shimadzu.com.cn LCMS-8045 应用于化妆品中西咪替丁成分的定量分析优化 LCMSMS-444 摘要：本文利用岛津 LCMS-8045 液质联用仪，建立了化妆品中西咪替丁成分的分析检测方法。该方法分析时间短，目标物和其他组分色谱峰分离效果良好。在2~100 ng/mL 的浓度范围内建立标准曲线，线性关系良好，相关系数R²大于0.9999；在5~30ng/g加标量下，西咪替丁的回收率分布在 88.70%~98.40%之间。该方法适用于液体及膏体化妆品中西咪替丁成分的准确定量分析。连续8针进样，西咪替丁物质的保留时间和峰面积两者的 RSD 分别在 0.550%~0.737%和 0.759%~0.968%之间，西咪替丁物质灵敏度测试 (S/N=3)LOD=0.55 ng/mL， (S/N=10) LOQ=1.80 ng/mL表明仪器灵敏度良好。该方法操作简捷、灵敏度高、分析速度快，特别适合大批量样品的定性定量分析。 近年来，人们对化妆品的品质要求越越越高， 够或是生产过程中产生或带入的安全危害成分的认识国家也对化妆品的安全性要求更加严格。人们不仅追 和控制力不够等因素必须引起高度重视。添加西咪替求大牌产品，还更加注重化妆品内所含有的成分。例 丁成分的化妆品对慢性荨麻疹、痤疮、女性多毛症等如，在化妆品中的云母、矿物油、合成香料、二苯甲 有一定治疗作用，但是长期使用会导致严重心肺疾病、酮等都是有害物质，如果长期使用含有这些成分的化 严重肝肾功能不全、器质性脑病等副作用。本实验使妆品，对于皮肤健康是不利的。化妆品安全性问题主 用 LCMS-8045 液相色谱和质谱联用系统，对化妆品中要来源于：违规添加禁用物质，超范围使用限量物质 的西咪替丁成分进行了研究，该方法分析时间短，精或是违规使用未经批准的原材料；对于非人为或不可 密度高，且稳定性良好，能够为化妆品中有害物质的避免原因由原材料引入的不明成分的安全危害认识不 定性定量分析提供帮助。 图11西咪替丁物质结构式 实验部分 1.1仪器配置 本实验使用岛津超高效液相色谱 LC-30A 与三重四极杆质谱仪 LCMS-8045联用系统。具体配置为 LC-30AD×2输液泵， SIL-30AC自动进样器， CTO-20AC 柱温箱， CBM-20A系统控制器， LCMS-8045三重四极杆质谱仪， LabSolutions Ver. 5.93 色谱工作站。 图2岛津LCMS-8045超高效液相色谱三重四极杆质谱联用仪 1.2分析条件 液相色谱条件： 色谱柱： Shim-pack XR-ODS II色谱柱(2.0mml.D.×100 mm L， 2.2 um) 流动相：A：0.1%甲酸+0.002 mol/L 乙酸铵水溶液，B：乙腈 流速：0.3mL/min 柱温：40℃ 进样量： 1uL 洗脱方式：梯度洗脱，B相初始浓度为10%，时间程序见表1. 表1梯度洗脱时间程序 Time(min) Module Command Value 3.00 Pumps Pump B Conc. 10 4.00 Pumps Pump B Conc. 50 5.00 Pumps Pump B Conc. 50 5.10 Pumps Pump B Conc. 10 7.00 Controller Stop LCMS-8045质谱条件： 离子源 ：ESI(+) 雾化气流速 ： 3.0 L/min 加热模块温度 ： 400℃加热气流速 ： 10.0L/min 扫描模式 ：多反应监测(MRM)接口温度 ：300℃ 干燥气流速 ： 10.0 L/minDL 温度 ：250°℃ MRM 参数 ：见表2 表2MRM优化参数 名称 CAS# 前体离子 产物离子 Q1 Pre Bias(V) CE(V) Q3 Pre Bias(V) 95.05* -28 -29 -16 西咪替丁 51481-61-9 253.2 159.15 -17 -15 -14 117.25 -28 -16 -23 注：*表示定量离子 1.3标准溶液的配置 用流动相 (VA：VB=9：1) 溶液将西咪替丁标准品做故度稀释，依次配制成2、5、10、20、50、100 ng/mL的标准系列溶液。 1.4样品前处理方法 准确称取样品0.5g(精确到0.001g)于25mL比色管中，加入20.0 mL色谱级甲醇，在涡旋混匀器上高速振荡30 s，使样品与提取溶剂充分混匀。然后超声提取20 min，静置至室温，再用色谱级甲醇定容至刻度摇匀，准确移取1mL样品溶液放进色谱瓶中用氮吹仪将其吹干后再用流动相 (VA：VB=9：1)溶液定容至1mL，经0.22um 滤膜过滤后取滤液作为待测溶液，必要时可用适量的流动相(VA：VB=9：1)溶液做稀释。 结果与讨论 2.1线性范围 按照1.3配制成各浓度的标准溶液，以西咪替丁目标物的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，以外标法绘制标准曲线如图3所示，所得标准曲线线性关系良好，相关系数 R'大于0.9999。线性方程情况见表3。 图3西咪替丁标准曲线 表3标准曲线参数 名称 校准曲线 线性范围((ng/mL) 相关系数R' 准确度% 西咪替丁 Y=44318.68X-6637.31 2~100 0.99991 97.1~101.4 2.2 精密度实验 按照1.3步骤配制低、中、高三个浓度的标准溶液，连续进样8次，考察分析方法保留时间和峰面积的重复性。结果表明：西咪替丁保留时间的 RSD 在 0.550%~0.737%的范围，峰面积的 RSD 在 0.759%~0.968%的范围，以上数据表明此方法的精密度良好。 表4标准品溶液精密度的结果(n=8) 序号 2ng/mL 10ng/mL 50 ng/mL R.T Area R.T. Area R.T. Area 1 1.420 106，884 1.388 509，954 1.422 2，658，420 2 1.409 103，695 1.395 515，580 1.411 2，601，309 3 1.401 105，561 1.408 513，135 1.408 2，658，843 4 1.399 105，471 1.415 521，378 1.43 2，649，037 5 1.401 104，594 1.405 519，463 1.406 2，638，886 6 1.417 106，171 1.397 525，080 1.401 2，644，449 7 1.412 105，952 1.419 515，360 1.412 2，617，214 8 1.408 104，621 1.405 519，715 1.406 2，634，284 RSD% 0.550 0.968 0.737 0.940 0.686 0.759 2.3样品加标实验 图4西咪替丁标准品色谱图(10ng/mL) 图5化妆品样品色谱图 取化妆品样，按照1.4步骤制备样品和加标样品，三个水平加标浓度如下表5所示，各样品平行测定6次。测试结果显示：西咪替丁成分的低中高三个梯度的加标回收率分别在92.50%~97.50%、96.7%~98.40%、88.70%~93.30%之间，加标回收率RSD 在0.65%~2.18%之间，均满足检测的条件要求。 表5样品加标实验结果 序号 物质名称 样品含量平均值 样品加标回收率(%) (ng/g) 5ng/g 10 ng/g 30ng/g 1 95.0 98.1 88.9 2 西咪替丁 27.0 92.5 98.3 88.9 3 95.0 98.0 88.7 4 95.0 98.3 91.1 5 95.0 98.4 93.3 6 97.5 96.7 92.2 回收率 RSD( (%) 1.66 0.65 2.18 2.4灵敏度实验 在化妆品空白样中加入浓度为 2 ng/mL的西咪替丁标样，按照1.4进行样品前处理，考察方法法灵敏度，将处理好的样品按1.2中的分析条件进行测定。通过软件计算检出限和定量限，西咪替丁的方法检出限和定量限如下表6所示。在上述条件下，目标物的检出限和定量限分别为 0.55 ng/mL 和1.80ng/mL， 均满足分析检测要求。 表66方法检出限、定量限 名称 检出限(ng/mL) 定量限(ng/mL) 西咪替丁 0.55 1.80 结论 本实验使用岛津 LCMS-8045 液质联用仪，参照国家药监局发布2019年第48号通告《化妆品中西咪替丁的检测方法(高效液相色谱法)》进行方法优化，有针对性的建立了化妆品中西咪替丁成分及含量的测定方法。结果表明，西咪替丁在 2~100 ng/mL的范围内线性良好，相关系数R²大于0.9999；精密度实验中，西咪替丁保留时间的 RSD 在0.550%~0.737%之间；峰面积的 RSD 在0.759%~0.968%之间，仪器精密度良好；并且西咪替丁的回收率分布在 88.70%~98.40%之间。岛津LCMS-8045 液质联用仪具有分析速度快、稳定性好、结果准确度高等特点，适用于多种相关行业的质量控制及分析检验等工作。 岛津应用云 采用LCMS-8045建立化妆品中西咪替丁成分分析方法优化，岛津LCMS-8045液质联用仪具有分析速度快、稳定性好、结果准确度高等特点，适用于多种相关行业的质量控制及分析检验等工作。