磷酸肌酸钠中含量测定检测方案

采用 TSKgel 色谱柱参考2015版《中国药典》分析色谱图集 磷酸肌酸钠 Creatine Phosphate Sodium 【基本信息】 磷酸肌酸二钠盐进入体内后以磷酸肌酸的形式存在。其主要作用即是磷酸肌酸所起，作用如下： (1)心肌保护剂 磷酸肌酸广泛地分布于身体各组织，90%在肌肉组织中，磷酸肌酸是用来维持 ATP 水平的。磷酸肌酸通过开放合成通路和减少分解作用，保护肌纤维膜免受缺血损害并维持细胞的核着酸储油。临床用于心麻痹症的心脏保护及心肌代谢窘迫的其他状况。适用于心肌缺血、肥厚、心梗及心衰的治疗(辅助治疗)。亦可用作各种心脏手术。 (2)缓冲肌肉中酸性物质突然增高 3)磷酸肌酸(CP)还参与能量运输 即把能量从线粒体运载到肌肉的其它部位。 (4)运动员首选的运补剂磷酸肌酸对于增加运动员的体能，提高运动成绩有明显的效果、安全有效，无副作用。在比赛中，磷酸肌酸(CP)水平的增加能提高训练和比赛成绩。(5)ATP 的贮存形式 磷酸肌酸可以把高能磷酸转移给 ADP 生成 ATP，因此磷酸肌酸是 ATP 的贮存形式。 (6)与ADP作用而产生 ATP 当体内肌酸磷酸激酶降低至零之前，脑组织缺氧时，磷酸肌酸均能与 ADP 作用而产生ATP。 (7)缓冲剂的作用 磷酸肌酸除提供能量外，在大强度练习中还可以对控制肌肉中的酸性物质起缓冲剂的作用。这是因为磷酸肌酸在合成 ATP 过程中需要消耗大强度练习中堆积在肌肉中乳酸释放出来的氢离子，而肌肉中氢离子过多会阻碍肌肉收缩，所以磷酸肌酸能起缓冲作用并推迟疲劳的出现。 (8)磷酸肌酸还具有刺激生长激素分泌的作用 使产品中的牛磺酸和磷酸肌酸相互配合促使合成作用得到加强，在有充足的蛋白质或氨基酸补充的前提下，肌肉蛋白的合成速度及效果更好。 【溶液的配制】 色谱流动相配制：：含0.2%磷酸二氢钾和0.1%四丁基氢氧化铵的水溶液 对照品溶液配制：取磷酸肌酸钠对照品、肌酸对照品和肌酐对照品适量，置于同一量瓶中，加流动相溶解并稀释制成每1mL中分别含1 mg、7.5 pg 和7.5ug的溶液，进样20 pL 【分析条件】 仪器： Thermo Ultimate 3000 色谱柱：TSKgel ODS-100V(4.6mmI.D.x25 cm， 5 um) 流速： 0.8 mL/min 柱温： 25C 样品盘温度：10℃ 进样量：20pL 检测器：：紫外检测器@210nm 【分析结果】 图1 分离色谱图 峰 名称 保留时间(min) 不对称因子As 分离度 理论塔板数 1 肌酸 3.760 1.19 一 16731 2 肌酐 5.200 1.26 10.06 14957 磷酸肌酸 5.765 1.14 3.09 13951 【结论】 TSKgel ODS-100V(4.6 mm I.D.x25 cm， 5pm)可满足2015版药典中的要求(磷酸肌酸峰理论塔板数不低于2000，肌酸峰与肌酐峰的分离度大于3.0)。 参照2015版中国药典二部，采用东曹C18柱TSKgel ODS-100V（5μm，4.6mm I.D.×250mm）分析磷酸肌酸钠。磷酸肌酸峰理论塔板数远高于药典规定的2000，且肌酸峰与肌酐峰的分离度大于3.0，满足药典的分离要求。