蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖检测方案(液相色谱仪)

LSDPTOP 药典蜂蜜中蔗糖和麦芽糖的含量测定 1 实验部分 1.1仪器配置 LC1620APlus 高效液相色谱仪泵一台 RI-201H 示差折光检测器1台， ERC-3215在线脱气机一台 AD 适配器一套 GMP软件一套 SHODEX NH2P-50 4E 4.6mm*250mm 色谱柱一根 FA2004 电子分析天平(上海舜宇恒平科学仪器有有公司)； 果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖标准品(>97%，国药试剂)； 乙腈(色谱纯，美国 Tedia)； 纯净水(杭州娃哈哈)。 1.2标准品溶液配制 分别精密称取果糖对照品1.0g，葡萄糖对照品0.8g，置同一具塞锥形瓶中，精密加入40%乙腈20ml，溶解，摇匀，作为果糖、葡萄糖对照品储备液。另精密称取蔗糖对照品0.2g，麦芽糖对照品0.2g，置同一具塞锥形瓶中，精密加人40%乙腈10ml， 溶解，摇匀，作为蔗糖、麦芽糖对照品储备液。分别精密量取果果、葡萄糖对照品储备液和蔗糖、麦芽糖对照品储备液，加40%乙腈配成不同浓度的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖混合对照品溶液。 序号 混标浓度(mg/ml) 果糖 葡萄糖 蔗糖 麦芽糖 1 10 8 0.5 0.5 2 15 12 1.0 1.0 3 20 16 2.0 2.0 4 25 20 4.0 4.0 5 30 24 6.0 6.0 1.3样品前处理 取蜂蜜约Ig，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加人40%乙腈20ml， 溶解，摇匀，滤过，取续滤液，作为样品溶液。 1.4色谱条件： 色谱柱： Shodex NH2P-50 4E(4.6×250mm) 流动相：乙腈/水=75/25 流速：：1.0ml/min 柱温：30℃ 进样量：20ul 2 实验结果 2.1标准曲线 将一系列浓度的标准溶液由低浓度到高浓度进样，，以峰面积(纵坐标Y轴)对标准品浓度(横坐标X轴， mg/ml)进行线性回归，求算标准曲线，结果如下： 上海舜宇恒平科学仪器有限公司 2.2含量测定 2.2.1样品中糖含量的测定 按“样品前处理”操作制备样品，按上述所建立的 HPLC 方法，对蜂蜜样品进行了分析。测定结果计算如下： 表1蜂蜜含量的测定结果 A/果糖 A/葡萄糖 A/蔗糖 A/麦芽糖 含量 mg/ml 21.1680 17.0152 0.0864 1.3158 含量(%) 39.4788 38.3485 0.1754 1.5156 药典要求葡萄糖+果糖>60%，果糖/葡萄糖>1，蔗糖和麦芽糖<5%，符合药典要求。 蜂蜜样品的 HPLC 谱图 3 结论 使用 LC1620Plus 泵配合 shodex 示差检测器，按药典方法操作，四种糖在Shodex NH2P-50氨基柱上能得到良好的分离效果，按3倍噪声值计算，理论检出限为 0.2mg/ml， 符合2015版药典的要求。 上海舜宇恒平科学仪器有限公司 SHANGHAI SUNNY HENGPING SCIENTIFIC INSTRUMENT CO.，LTD. 药典蜂蜜中蔗糖和麦芽糖的含量测定 实验部分 仪器配置LC1620APlus高效液相色谱仪泵一台RI-201H示差折光检测器1台，ERC-3215在线脱气机一台AD适配器一套GMP软件一套SHODEX NH2P- 50 4E 4.6mm*250mm色谱柱一根FA2004电子分析天平（上海舜宇恒平科学仪器有限公司）；果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖标准品(>97%，国药试剂)；乙腈(色谱纯，美国Tedia)；纯净水(杭州娃哈哈)。