蜂蜜中异构化糖检测方案

HPLC 和 TLC 法鉴定蜂蜜中异构化糖 目前蜂蜜样品常规检测项目仅限于食品添加剂、农残等对人体有明显危害成分，对蜜源搀杂、搀假没有强制检测。假蜂蜜几乎没有营养价值可言，而且糖尿病、龋齿、心血管病患者喝了还可能加重病情。常见的假蜜成分有：糖浆，砂糖，转化糖，异构化糖等等，常见的假蜜源作物有大米，麦子，甘 仪器概况 岛津 Prominence LC-20A 高效液相色谱仪系统。配置为 LC-20AD输液泵，DGU-20A3在线脱气机， SIL-20A 自动进样器， CTO-20A 高效液相色谱分析方法 色谱柱： Inertsil ODS-EP 4.6×250mm，10um进样量：50pL流动相：水洗脱方式：等度洗脱流速 ：0.8mL/min分析时间：60分钟 检测器池温：40℃C 薄层色谱分析方法 薄层色谱选用展开溶剂为水，乙酸，正厂醇，混合比例为1：1：2。显色试剂为 1g二苯胺盐酸盐， 1mL 苯胺，50mL丙酮和5mL磷酸的混合液。 在展开槽中加入20mL 展开溶剂，平衡 蜂蜜样品 油菜花蜜和洋槐蜜样品由日本 Sakura公司提供，异构化糖加标量分别为2.5%和5%。 样品前处理方法 样品前处理方法由日本 Sakura 公司提供，具体步骤如图1所示。 蔗，甜菜，玉米，西米等等。目前国际上广泛采用碳同位素法、TLC 法、HPLC 法等做为假蜜搀杂鉴定的检测手段。其中薄层色谱法具有操作简单，成本低廉的优点而逐步普及；液相色谱法具有重现性好、灵敏度高，检出限低等特点，是假蜜检测的发展方向。 柱温箱， RID-10A示差检测器，CBM-20A系统控制器和 LCSolution 色谱工作站。 20min， 待有机溶剂挥发平衡后将点好的硅胶板放入。约4小时后待溶剂扩展至硅胶板3/4处，取出硅胶板。用吹风机吹干展开溶剂。喷显色剂后再吹干并放入干燥箱中显色。 分析结果 高效液相色谱法 图2为本方法检测洋槐样品空白色谱图及5%异构化糖搀杂的加标色谱图。 图2洋槐样品空白色谱图(a)及加标图谱(b) 图3 薄层色谱板分析结果(从左至右依次 为a，洋槐阴性；b洋槐阳性；c油菜花阴性； d油菜花阳性 如图2所示，5%加标样品在 32.5 min 处出现异构化糖的色谱峰，空白样品则没有出峰。 薄层色谱法 如图3所示，洋槐及油菜花阳性样品中出现异构化糖的样品点，而阴性样品中没有出现。 结论 高效色谱法及薄层色谱法可用于蜂蜜中异构化糖搀杂的鉴定。样品前处理方法简单易行。薄层色谱法操作简单，成本低廉，液 ( 注：数据出自日本 CSC ) 相色谱法较薄层色谱法大大缩短了分析时间。