医用胶原蛋白海绵中粗蛋白质检测方案(定氮仪)

K-712-201711 海能仪器：凯氏定氮法测定医用胶原蛋白海绵中粗蛋白质含量 1前言 胶原蛋白海绵是以牛跟腱为原材料，通过酶解、纯化制取高纯I型胶原，再根据互贯网络技术制成。 胶原分子兼有修复、止血和填充三种作用，能够激活内源性凝血途径，在使用时通过压迫创面激活内源性凝血，以达到止血效果。本文采用《中国药典》2015年版中氮测定法第三法以全自动凯氏定氮仪进行实验，操作简单，测得结果平行性良好。 2仪器与试剂 2.1仪器 K1160 全自动凯氏定氮仪， SH420F 石墨消解仪 2.2试剂 硫酸(分析纯)、硼酸(分析纯)、氢氧化钠(分析纯)、溴甲酚绿-甲基红混合指 示剂、硫酸钾(分析纯)、硫酸铜(分析纯)、0.1mol/L 硫酸标准滴定液等。 3实验方法 3.1取样 将胶原蛋白海绵置于恒温干燥箱80℃干燥3h，干燥完后放置于干燥器中备用。将样品剪成小块状，然后准确称量样品100mg(精确至0.1mg)，加硫酸钾0.3g与硫酸铜0.02gg，，再加硫酸2mL。同时做空白实验。 3.2消解 利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨炉上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，设定消解温度参数如下表： 温度(℃) 时间(min) 1 180 10-15 2 420 50 3.33上机测试 待消化管内溶液冷却至室温后，将消化管放置于定氮仪上，开始蒸馏滴定。定氮仪设置程序如下： 硼酸 稀释水 碱液 蒸馏量 蒸汽流量 25mL 30mL 10mL 5min 100% 海1 4结果与讨论 4.1实验结果：仪器自动滴定并计算，计算公式如下： 蛋白质含量P%=N%×5.79 式中：C-标准酸摩尔浓度(mol/L) W-样品质量(g) Vo-空白样滴定标准酸消耗量(mL) V-样品滴定标准酸消耗量(mL) 5.79-样品蛋白系数 编号 取样量(g) 氮含量(%) 蛋白质含量(%) 蛋白质含量平均值(%) RSD(%) 1 0.01059 16.6162 96.2078 95.339 0.81 2 0.01104 16.3589 94.7178 3 0.01145 16.4234 95.0913 4.2实验结论 通过以上测得数据可知，利用全自动凯氏定氮仪测定医用胶原蛋白海绵蛋白质含量平行性良好，且具有操作简单，安全性高，节省人力等优点。 ( 参考文献 ) 《中国药典》2015年版第四版0704氮测定法第三法 1 前言胶原蛋白海绵是以牛跟腱为原材料，通过酶解、纯化制取高纯Ι型胶原，再根据互贯网络技术制成。 胶原分子兼有修复、止血和填充三种作用，能够激活内源性凝血途径，在使用时通过压迫创面激活内源性凝血，以达到止血效果。本文采用《中国药典》2015年版中氮测定法第三法以全自动凯氏定氮仪进行实验，操作简单，测得结果平行性良好。2 仪器与试剂2.1仪器K1160全自动凯氏定氮仪，SH420F石墨消解仪 2.2试剂硫酸（分析纯）、硼酸（分析纯）、氢氧化钠（分析纯）、溴甲酚绿-甲基红混合指示剂、硫酸钾（分析纯）、硫酸铜（分析纯）、0.1mol/L硫酸标准滴定液等。