免疫球蛋白中氮含量检测方案(定氮仪)

K-262-202009 凯氏定氮仪测定免疫球蛋白中的氮含量 1前言 免疫球蛋白指具有抗体活性的动物蛋白。主要存在于血浆中，也见于其他体液、组织和一些分泌液中，是一类重要的免疫效应分子，由高等动物免疫系统淋巴细胞产生的蛋白质，经抗原的诱导可以转化为抗体。因结构不同可分为 IgG、IgA、IgM、IgD和IgE 5种，多数为丙种球蛋白。测定其氮含量可知其有效成分的含量，因此本实验参照《中国药典2020年版通则0704测测定法第三法定氮仪法》对免疫球蛋白中的氮含量进行测定。 2仪器与试剂 2.1仪器 K1160全自动凯氏定氮仪， SH420F 石墨消解仪，分析天平。 2.2试剂 硫酸(分析纯)， 20g/L硼酸溶液，溴甲酚绿-甲基红混合指示剂， 400g/L氢氧化钠，混合催化剂(3gK2SO4、0.2gCuSO4)， 0.1mol/L 硫酸标准滴定液。 3实验方法 3.1取样 使用移液管精密移取1mL样品，加入消化管。加入混合催化剂3.2g，沿消化管壁加入浓硫酸10mL。 3.2消解 设定消解参数 表1消解参数设置 阶段 温度/℃ 保持/min 1 230 20 2 350 15 3 420 90 3.4测试 表2定氮仪参数设置 硼酸 稀释水 碱液 蒸馏量 蒸汽流量 蛋白系数 滴定酸浓度 20mL 50mL 40mL 5min 100% 0 0.1144mol/L 4结果与讨论 4.1实验结果 表3免疫球蛋白中的氮含量测试结果 样品名称 氮含量% 氮含量mg/mL 平均值mg/mL RSD% 样品1 0.5373 5.373 5.385 0.193 0.5393 5.393 0.5388 5.388 样品2 0.5086 5.086 5.066 0.438 0.5069 5.069 0.5042 5.042-2- 4.2结论 测试结果显示本次测试的免疫球蛋白氮含量为 5.385mg/mL 和 5.066mg/mL。且 RSD 值均小于0.5%，重复性良好。 ( 参拷文献 ) ( [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].四部.北京：中国医药科技出版社，2020：附录0704测测定法第三法(定氮仪法) ) -- -- 1 前言1 前言免疫球蛋白指具有抗体活性的动物蛋白。主要存在 于血浆中，也见于其他体液、组织和一些分泌液中，是一类重要的免疫效应分子，由高等动物免疫系统淋巴细胞产生的蛋白质，经抗原的诱导可以转化为抗体。因结构不同可分为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE 5种，多数为丙种球蛋白。测定其氮含量可知其有效成分的含量，因此本实验参照《中国药典 2020年版 通则0704 氮测定法 第三法 定氮仪法》对免疫球蛋白中的氮含量进行测定。2 仪器与试剂2.1仪器K1160全自动凯氏定氮仪，SH420F石墨消解仪，分析天平 。                  2.2试剂硫酸（分析纯），20g/L硼酸溶液，溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，400g/L氢氧化钠，混合催化剂（3gK2SO4、0.2gCuSO4），0.1mol/L硫酸标准滴定液。