奶粉中三聚氰胺检测方案(气质联用仪)

在线前处理 GPC-GCMS 联用技术分析检测乳制品(奶粉、牛奶)中的三聚氰胺 摘要 GPC凝胶净化色谱和SPE 固相萃取是目前在食品安全检测实验室常用的样品前处理方式。在线GPC 可以实现 GPC 净化的在线完成，对乳制品中三聚氰胺的分析中能够进行较好的去除基质，使衍生化进行得更加彻底，检测限可以达到 0.01mg/kg。 关键词凝胶净化色谱；气质联用仪；；三聚氰胺；前处理 1实验部分 仪器条件和参数 岛津在线前处理联机系统 GPC-GCMS 1.1 GPC条件： 流动相：丙酮+环己烷=3+7，流量0.1mL/min。进样量20uL。 1.2 GCMS条件： 色谱柱： DB-5ms (30m×250um×0.25um)： 柱温：90℃， 5min； 15℃/min； 190， 0min； 30℃/min；290，0min。 PTV进样口：120℃， 5min； 80℃/min； 280， 8min。 5min 后关闭分流阀。 质谱条件： scan 模式，扫描范围m/z 86~400。SIM模式： m/z342、327、328、171，定量离子m/z 342。 色质谱图见图2~6. 2前处理方法 提取净化方法参照 NY/T 1372-2007。 取样1~5g，按比例加入10倍量的二乙胺/水/乙腈=10/40/50(体积比)提取溶剂，混匀超声提取，取约 1.5mL 混合液， 10000rmp 离心 5min， 准确吸取 1mL 上清液过 MCX (Waters，3cc， 60mg)柱，依次用3mL水和3mL甲醇洗涤固相萃取柱，最后用3mL 5%氨化甲醇洗脱，洗脱液于70℃氮气吹干。按法衍生化，最后用氮气吹干衍生试剂，加入1mL 流动相(GPC)后 GPC-GCMS 测定，进样20uL。 如图1，三聚氰胺 TMS (3TMS)衍生物的 GPC 保留时间为 3.29min (4min 为溶剂峰)，按仪器说明书编制 GPC-GCMS 的 GPC 部分的条件。 3结果与讨论 3.1 GPC在线前处理方法的优势 按 NY/T 1372-2007 (GC-MS 法检出限0.05mg/kg)， 取 5g样品， 50mL提取液，最后取10mL(相当于1g样品)提取液过阳离子交换柱净化，很容易造成净化柱堵住，且取10mL过柱后由于杂质较多，衍生化的重现性很难做。本法只取1mL(相当于 0.1g样品)提取液过阳离子交换柱，液体流过很通畅，最后净化效果与过柱10mL 比要好得多。本方法检出限为 0.05mg/kg(相当于 0.1g样品)。因为净化效果较好，衍生后的定容体积可以到 0.2mL，检测限可以到 0.01mg/kg(相当于0.1g样品)。 3.2提取液的选择 同时测试了美国FDA 用于测定宠物饲料的方法，用甲醇提取奶粉中的三聚氰胺，回收率很低(小于10%)，且提取液中糖的含量较高，影响最后三聚氰胺的衍生化产率。用其它 有机溶剂提取的方法都存在糖对衍生化的干扰，最后都要用阳离子交换的方法去除。 图1标样和样品的 GPC 图 % 1001 149 50- 207 327 o1 86m 171 191. 223238253 267285 342 295. 355 368386.400 100 150 200 250 300 350 400 图2 40ng/mL三聚氰胺一3TMS(13.9min) 标样 SCAN 模式下提取离子色谱图和质谱图。 % 342 图3 100ng/mL 三聚氰胺-3TMS标样(13.9min) SIM 模式下提取离子色谱图和质谱图。 图4阴性样品提取离子色谱图(13.9min) 图5上述样品加标2mg/kg 的提取离子色谱图(回收率92%)。 图6某奶粉样品提取离子色谱图(20mg/kg). 4小结 本文使用了在线前处理联机系统GPC-GCMS在奶制品中三聚氰胺的检测中，不但减少了样品分析的取样量，减少前处理时溶剂的使用量，使样品快速通过前处理柱，更好地去除干扰基质，使样品中目标化合物衍生化时更迅速、完全，检测的灵敏度更高，回收率结果满意，检测限可达到0.01mg/kg， 满足各行业对乳制品中三聚氰胺的分析检测要求。