奶粉及奶制品中三聚氰胺检测方案(液相色谱仪)

使用岛津 HPLC 法测定奶粉及奶制品中三聚氰胺的残留 设备的准备及前处理： 1、试剂 1.1甲醇：色谱纯。 1.2乙腈：色谱纯。 1.3氨水：浓度25%-28% 1.4混合性阳离子交换固相萃取柱： 60mg，3mL。 1.5三氯乙酸溶液 10g/L：称取 10g 三氯乙酸加水至1000mL. 1.6氨水甲醇溶液：量取5mL氨水，溶解于100mL 甲醇中。 1.7乙酸铅溶液 22g/L： 取 22g乙酸铅用约 300mL 水溶解后定容至 1L。 1.8滤膜：0.45um， 有机相。 1.9甲醇溶液：200mL甲醇(1.1)加入800mL一级水，混匀。 1.10流动相：尔取2.02g庚烷磺酸钠和2.10g柠檬酸于1L容量瓶中，用水溶解并稀释释刻度。取该溶液900mL 加入100mL乙腈(1.2)。 1.11三聚氰标准品(纯度≥99%)。 1.12三聚氰胺标准溶液 1.12.1标准储备液：称取100mg(精确到0.1mg)的三聚氰胺标准品，用甲醇溶液(1.9)溶解并定容于100mL容量瓶中，该溶液浓度为 1mg/mL， 寸4℃冰箱内贮存，有效期3个月。 1.12.2标准中间液：吸取标准储备液5.00mL，于50mL容量瓶内，用甲醇溶液(1.9)定容至50mL， 该溶液三聚氰胺浓度为 100ug/mL，于4℃冰箱内贮存，有效期1个月。 1.12.33标准工作液：用移液管分别移取标准中间液1mL、5mL、10mL、25mL、50mL 于5个100mL容量瓶内，用甲醇溶液(1.9)定容，该溶液三聚氰胺浓度为1.0ug/mL、5.0ug/mL、10ug/mL、25ug/mL、50ug/mL。于4℃冰箱内贮存，有效期1周。 2、仪器设备 高速离心机(转速可达到10000r/min 以上) 漩涡混合器 超声波清洗器 氮吹仪(控温可达到60℃以上) 固相萃取装置及混合型阳离子交换固相萃取柱(与农业部行业标准有改动，省略) 高速匀质器 索氏提取器 震荡摇床 3、测定步骤 3.1提取 奶粉样品取样5g、液态奶制品20g(精确至0.01g)， 准确加入50mL三氯乙酸溶液(1.5)，加入乙酸铅溶液(1.7)。摇匀，超声提取 20min。静置2min， 取上层提取液约30mL转入离心管，在 10000r/min 离心机上离心 5min。 3.2净化(与农业部行业标准有改动) 分别用 3mL 甲醇，3mL水活化混合型阳离子交换固相萃取柱，准确移取10mL 离心液分次上柱，控制过柱速度在 1mL/min 以内。再用 3mL 水和3mL 甲醇洗涤混合型阳离子交换固相萃取柱，抽近干后用氨水甲醇溶液(1.6)3mL 洗脱。洗脱液50℃氮气吹干，准确加入甲醇溶液(1.9)，漩涡振荡 1min， 过 0. 45um滤膜，上机测定。 仪器设备： .T恒流泵(LC-20AT、LC-20AD、LC-10AvpPLUS) 2.进样系统：手动、1、自动 3.检测器： SPD-20A、LC-10AvpPULS 紫外-可见 (PDA-20A二极管阵列检测器) 4. 色谱柱： CAPCELL PAK CR 5.柱 箱： CTO-20A、CTO-10Avp 6.数据处理系统：： LCsolutioon、LCsolution-Lite 分析条件： 色谱柱： CAPCELL PAK CR 液相色谱柱(SHISEIDO公司)， 4.6mmID×150mm 流动相流速：1.500mL/min 温：： 30℃(室温) 检测波长：243nm(与农业部 行业标准有改动) 100KD1：244nm 75- 50- 25- 标样 0- 100AD1：243nm 加标 75- 50- 25- 此检测方法需保持 pH 值在3.0一致，稍有偏离就会导致保留时间偏移。 检测限：农业部饲料中三聚氰胺 NYT 1372-2007 的测定行业标准规定为2.0ppm。 北京市质量技术监督局 实测为1.0ppm 以下。