使君子中胡芦巴碱检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：400611(65163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 使君子分析 使君子的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为使君子科植物使君子Quisqualis indica L. 的干燥成熟果实。秋季果皮变紫黑色时采收，除去杂质，干燥。【功能与主治】杀虫消积。用于蛔虫、蛲虫病，虫积腹痛，小儿疳积。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以氨基键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(80：20)为流动相；检测波长测265 nm。理论板数按葫芦巴碱峰计算应不低于4000。 对照品溶液的制备：取葫芦巴碱对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1 mL含0.1mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品种仁粉末(果实除去外壳，取仁打粉，过二号筛)约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇20mL，密塞，称定重量，超声处理(功率250W， 频率33 kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分分精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10pL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 2.使君子药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中使君子的含量测定以胡芦巴碱为质量评价依据，胡芦巴碱在Inertsil氨基柱中的色谱特点为：检测波长在265 nm时紫菀酮吸收最强，色谱图较好；在流动相组成为乙一-水系统时，流动相的比例对胡芦巴碱及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，乙腈的比例越低，胡芦巴碱的保留时间越短，流动相乙腈的比例在80左右时，其分离度最好，选择乙腈比例在70~85%(v/v)之间均可以获得满意的分离度及分析效果，考虑到分析时间，采用上述色谱柱，优化流动相比例为乙腈-水(80：20)；柱温对胡芦巴碱的保留时间的影响较小，温度越高，保留时间稍微缩短，样品在25到45度均有较好的分析效果。考虑到样品的稳定性及分析效果，本次采用35度条件对使君子样品进行分析测定。 使君子 样品来源：本品为使君子科植物使君子Quisqualis indica L. 的干燥成熟果实。产地：河北 对照品：胡芦巴碱(中国药品生物制品检定所，批号：110883-200502) 供试品溶液的制备：取本品种仁粉末(果实除去外壳，取仁打粉，过二号筛)约0.5 g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇20 mL，密塞，称定重量，超声处理(功率250 W， 频率33 kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：取葫芦巴碱对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液，即得。 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：400611(65163 色谱柱： Inertsil-NH2(4.6×150 mm， 5 um) 推荐使用条件范围： 流动相：乙腈-水(80：20) 色谱柱： Inertsil- NH2 (4.6×150 mm， 5 pm) 柱温： 35℃ 流动相：乙腈-水(70~85：30~15) 检测波长：265 nm 柱温：25~45℃ 流 速：： 1.0 mL/min 检测波长：265nm 进样量： 10pL 流 速：：1.0 mL/min 仪器配置： LC-20ADXR高压泵 SPD-M20A二极管列列紫外可见光检测器 CTO-20AC柱温箱 CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC自动进样器 对照品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 胡芦巴碱 10.582 1511885 87978 9182 0.96 葫芦巴碱标准曲线 重复性数据如下： 胡芦巴碱 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 10.582 1511885 10.632 1924237 2 10.557 1511230 10.647 1915190 3 10.547 1511988 10.656 1954236 Average 10.562 1511701 10.645 1931221 RSD% 0.18 0.04 0.13 1.06 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil- NH2(4.6 x 150 mm，5um)流动相：乙睛-水(80:20)柱温：35 ℃检测波长：265 nm流速：1.0 mL/min进样量：10 ul