莱菔子中芥子碱硫氰酸盐检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 莱菔子分析 莱子的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为十字花科植物萝卜Raphanus sativus L. 的干燥成熟种子。夏季果实成熟时采割植株，晒干，搓出种子，除去杂质，再晒干。 【功能与主治】消食除胀，降气化痰。用于饮食停滞，脘腹胀痛，大便秘结，积滞泻痢，痰壅喘咳。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以苯基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-3%冰醋酸溶液(15：85)为流动相；检测波长为326 nm。理论板数按芥子碱峰计算应不低于5000。 对照品溶液的制备：取芥子碱硫氰酸盐对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1 mL含40 pg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇50 mL，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率50kHz)30分钟，取出，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液置棕色瓶中，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5uL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 2.莱服子药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中莱子的含量测定以芥子碱硫氰酸盐为质量评价依据，芥子碱硫氰酸盐在Inertsil Ph-3中的色谱特点为：检测波长在326 nm时芥子碱硫氰酸盐吸收最强，色谱图较好；在流动相组成为乙腈-乙酸溶液系统时，流动相的比例对芥子碱硫氰酸盐及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相乙腈的比例在8左右时，其分离度最好，选择乙腈比例在6~15%之间均可以获得满意的分离度及分析效果，考虑到分析时间，采用上述色谱柱，优化流动相比例为乙腈-3%冰醋酸溶液(8：92)；柱温对芥子碱硫氰酸盐的保留时间也有一定影响，温度越高，保留时间越短，样品在25到45度均有较好的分析效果，但温度的降低会明显改善芥子碱硫氰酸盐与相邻色谱峰的分离效果。考虑到样品的稳定性及分析效果，本次采用35度条件对莱菔子样品进行分析测定。 莱子 样品来源：本品为十字花科植物萝卜Raphanus sativus L. 的干燥成熟种子。产地：河北 对照品：芥子碱硫氰酸盐(中国药品生物制品检定所。批号：111702，含量：98%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇50 mL， 密塞，称定重量，超声处理.功率250W， 频率50kHz)30分钟，取出，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液置棕色瓶中，即得。 对照品溶液的制备：取芥子碱硫氰酸盐对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1 mL含40 pg的溶液，即得。 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 色谱柱： Inertsil Ph-3(4.6×150 mm， 5 um) 推荐使用条件范围： 流动相：乙腈-3%乙酸溶液(8：92) 色谱柱： Intersil Ph-3 (4.6×150 mm， 5 pm) 柱温：35℃ 流动相：乙腈-3%乙酸溶液(6~15：94~85) 检测波长：326nm 柱温：25~45℃ 流 速：1.0mL/min 检测波长：326 nm 进样量： 10uL 流 速：1.0mL/min 仪器配置： _C-20ADXR高压泵 PD-M20A二极管列列紫外可见光检测器 CTO-20AC 柱温箱 CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC 自动进样器 对照品 实际样品 Detector A Ch1：326nm (1)莱子中的芥子碱硫氰酸盐 (1) 人 (I)芥子碱硫氰酸盐 (1) 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 芥子碱硫氰酸盐 19.496 965595 27313 6890 1.46 芥子碱硫氰酸盐标准曲线 重复性数据如下：芥子碱硫氰酸盐 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 19.271 1697476 19.496 965595 2 19.252 1715388 19.495 967710 3 19.263 1713256 19.494 974656 Average 19.262 1708707 19.495 969320 RSD% 0.05 0.58 0.01 0.49 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱： Inertsil Ph-3(4.6 x 150 mm, 5um)流动相：乙腈-3%乙酸溶液(8:92)柱温：35°C检测波长：326 nm流速：1.0 mL/min进样量：10 ul