紫珠叶中毛蕊花糖苷检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 紫珠叶分析 紫珠叶的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为马鞭草科植物杜虹化Callicarpa formosana Rolfe 的干燥叶。 【功能与主治】凉血收敛止血，散瘀解毒消肿。用于衄血，咳血，吐血，便血，崩漏，外伤出血，热毒疮疡，水火烫伤。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.5%磷酸溶液(17：83)为流动相；检测波长为332 nm。理论板数按毛蕊花糖苷峰计算均应不低于3000。 对照品溶液的制备：取毛蕊花糖苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1mL含50pg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过四号筛)约0.25 g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入水50%甲醇50 mL， 密塞，称定重量，放置过夜，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10pL，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含毛蕊花糖苷(CH，015)不得少于0.50% 2.紫珠叶药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中紫珠叶的含量测定以毛蕊花糖苷为质量评价依据， 其在Inertsil ODS-3(4.6×150 mm，5 pm)中的色谱特点为：在流动相组成为乙腈-0.5%磷酸系统时，流动相的比例对毛蕊花糖苷及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相乙腈的比例在17%左右时，其分离度最好，紫珠叶色谱图中杂质峰较少且与毛蕊花糖苷相比含量很低，因此选择乙腈比例在15~17%(v/v)之间均可以获得较好的分析效果；柱温对枸橼酸的保留时间及与相邻色谱峰的分离度影响很小。经过考察，在流动相乙腈-0.5%磷酸比例为17：83，柱温35℃的色谱条件下能得到较满意的分析效果。使用Inertsil ODS-4(4.6×150 mm，5 um)柱亦能得到较满意的分析效果。 紫珠叶 样品来源：本品为马鞭草科植物杜虹化Callicarpa formosana Rolfe 的干燥叶。产地：广东 对照品：毛蕊花糖苷(中国药品生物制品检定所，批号：111530-200706，含量：98%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过四号筛)约0.25 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入水50%甲醇50 mL，密塞，无称定重量，放置过夜，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得 对照品溶液的制备：取毛蕊花糖苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1 mL含50ug的溶液，即得。 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 色谱柱： Inertsil ODS-3 (4.6×150 mm， 5 um) 推荐使用条件范围： 流动相：乙腈-0.5%磷酸溶液(17：83) 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150 mm， 5 um) 柱：1温：35℃ 流动相：乙腈-0.5%磷酸溶液(15~17：85~83) 检测波长：332 nm 柱 温：35~37℃ 流 速：1.0 mL/min 检测波长：332nm 进样量：1(10 pL 流 速：1.0mL/min 仪器配置： LC-20ADXR高压泵 SPD-M20A 二极管阵列紫外可见光检测器 DGU-20A，脱气机 CTO-20AC柱温箱 CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC 自动进样器 对照品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 毛蕊花糖苷 13.036 1155124 47286 6571 1.05 毛蕊花糖苷标准曲线 重复性数据如下： 毛蕊花糖苷 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 13.058 1151272 13.062 834059 2 13.079 1156954 13.042 839369 3 13.036 1155124 13.054 837371 Average 13.058 1154450 13.053 836933 RSD% 0.17 0.26 0.08 0.32 浓度 mg/mL *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-3 (4.6 x 150 mm, 5um)流动相：乙腈-0.5%磷酸溶液(17:83)柱温：35℃检测波长：332 nm流速：1.0 mL/min进样量：10ul