白鲜皮中黄柏酮检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 白鲜皮分析 白鲜皮的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为芸香科植物白鲜 Dictamnus dasycarpus Turcz. 的干燥根皮。春、秋二季采挖根部，除去泥沙及粗皮，剥取根皮，干燥. 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(60：40)为流动相；检测波长为236 nm。理论板数以从酮峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备： 取楼酮对照品、黄柏酮对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1 mL含60 ug、100 pg的溶液，即得。 供品溶液的制备： 取本品粗粉(过四号筛)约1.0g， 加甲醇25mL，加热回流1小时，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液溶10pL， 注入液沐色谱仪，测定，即得。 2.白鲜皮药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中白鲜皮的含量测定以定酮和黄柏和为质量评价依量，楼酮和黄柏梣在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：检测波长在236 nm时楼酮和黄柏酮吸收较强，色谱图较好；在流动相组成为甲醇-水系统时，流动相的比例对楼酮和黄柏酮及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相甲醇的比例在55%左右时，其分离度较好，选择甲醇比例在50~60%(v/v)之间均可以获得满意的分离度及分析效果，考虑到分析时间，采用上述色谱柱，优化流动相比例为甲醇-水55：45)；柱温对榉酮和黄柏酮的保留时间也有一定影响，温度越高，保留时间越短，样品在25到45度均有较好的分析效果，考虑到样品的稳定性及分析效果，本次采用35度条件对白鲜皮样品进行分析测定。 白鲜皮 样品来源：本品为芸香科植物白鲜 Dictamnus dasycarpus Turcz. 的干燥根皮。产地：黑龙江 对照品：棒酮(中国药品生物制品检定所，批号：200501-111700，含量：98%)，黄柏酮(成都曼斯特生物科技有限公司，号：A0265，含量：98%) 供试品溶液的制备：取本品粗粉(过四号筛)约1.0 g， 加甲醇25 mL， 加热回流1小时，放冷，再称定重量，加甲醇补足减矢的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：取酮对照品、黄柏酮对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1mL含60 ug、100pg的溶液即得。 色谱柱： Inertsil ODS-3(4.6×250 mm， 5 um)流动相：：甲醇-水(55：45柱温：35℃检测波长：236nm流速：1.0 mL/min进样羊：10pL 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： Inertsil ODS-3(4.6×250 mm， 5 um) 流动相：甲醇-水(50~60：50~40) 柱温：25~45℃ 检测波长：236 nm 流 速：1.0 mL/min LC-20ADXR高压泵SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器CTO-20AC柱温箱CBM-20A 系统控制器SIL-20AC 自动进样器 对照品 对照品 n4nm (1.00) (2)黄柏酮 (2) 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 梣酮 29.892 1732160 45539 13998 1.05 黄柏酮 25.070 1347268 33656 9232 1.11 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163酮的标准曲线 重复性数据如下： 梣酮 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 29.892 1732160 32.872 1006932 2 29.876 1701078 32.899 984817 3 29.899 1705045 32.974 981132 Average 29.889 1712761 32.915 990960 RSD% 0.04 0.99 0.16 1.41 黄柏酮的标准曲线 黄柏酮 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 25.121 1337043 25.610 1860511 2 25.070 1347268 25.617 1834609 3 25.018 1329605 25.663 1814992 Average 25.070 1337972 25.630 1836704 RSD% 0.21 0.66 0.11 1.24 浓度 mg/mL *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-3(4.6 x 250 mm, 5um)流动相：甲醇-水(55:45)柱温：45°C检测波长：236 nm流速：1.0 mL/min进样量：10ul