水飞蓟中水飞蓟宾检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 水飞蓟分析 水飞蓟的高效液相色谱 药典收载情况 、采源】本品为菊科植物水飞蓟Silybum marianum (L.) Gaertn. 的干燥成熟果实。秋季果实成熟时采收果序，晒干，打~毛实，除去杂质，晒干。 【功能与主治】清热解毒，疏肝利胆。用于肝胆湿热，胁痛，黄疸。 .含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸52：1)为流动相；检测波长为287 nm。理论板数按水飞蓟宾峰计算应不低于5000。 对照品溶液的制备：精密称取水飞蓟宾对照品12 mg， 置50mL量瓶中，加甲醇适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀；精安取5 mL， 置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加75%甲醇50 mL， 密塞，称定重二、加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，即得。 买定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 uL，注入液相色谱仪，测定，以水飞蓟宾两个峰面积之和计算，三得。 2.水飞蓟药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】 《中国药典》中水飞蓟的含量测定以水飞蓟宾为质量评价依据，其在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：在流动相组成为甲醇-水-冰醋酸系统时，流动相的比例对水飞蓟宾及相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相甲醇的比例在45%左右时，其分离度最好，因此选择甲醇比例在45~55%(v/v)之间均可以获得较好的分离度及分析效果；柱温对水飞蓟宾的留时间及与相邻色谱峰的分离度影响很小。经过考察，在流动相比例为甲醇-水-冰醋酸(45：55：1)，柱温40℃的色谱条=下，使用Inertsil ODS-4(4.6×150 mm， 5 um)柱亦可得到良好分析效果。 水飞蓟 样品来源：本品为菊科植物水飞蓟Silybum marianum (L.) Gaertn. 的干燥成熟果实。产地：四川 对照品：水飞蓟宾(中国药品生物制品检定所，批号：110768-200504，供含量测定用) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加75%甲醇50mL，密塞，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，即得。 对照品溶液的制备：精密称取水飞蓟宾对照品12 mg， 置50mL量瓶中，加甲醇适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀；精密量取5 mL， 置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-3 (4.6×150 mm， 5 u.m) 流动相：甲醇-水-冰醋酸(45：55：1) 柱温：40℃ 检测波长：287nm 流速：1.0mL/min 进样量：10pL 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 仪器配置： 推荐使用条件范围： LC-2CADXR高压泵 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150 mm， 5 um) SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器CTO-20AC 柱温箱DGU-20A，脱气机CBM-20A 系统控制器 流动相：甲醇-水-冰醋酸(45~55：55~45：0.5~1) 柱温：35~45℃ 检测波长：287nm 流 速：：：1.0 mL/min 对照品 实际样品 30- 20- 10 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 水飞蓟宾A 16.549 611507 17944 5418 1.09 水飞蓟宾B 18.260 653463 17152 5492 1.12 水飞蓟宾A标准曲线 9.01 ，Area(x100.000) 重复性数据如下： 8.0- Y=122743.7X R²= 0.9999 水飞蓟宾A 7.0- 6.0- 5.0- 4.0- 3.0- 2.0- No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 16.364 611655 17.579 1160506 2 16.549 611507 17.820 1165420 3 16.682 609206 17.533 1163812 Average 16.532 610789 17.644 1163246 RSD% 0.97 0.22 0.87 0.22 1.0- 0.0- 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 Conc. 浓度 mg/mL 水飞蓟宾B标准曲线 Area(x1000000) 10 Y=124445.6X 水飞蓟宾B R=0.9999 0.75- 0.50- 0.25 No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 18.047 657562 19.431 1870441 2 18.260 653463 19.700 1875617 3 18.406 652472 19.371 1872954 Average 18.238 654499 19.501 1873004 RSD% 0.99 0.41 0.90 0.14 0.00 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 Conc. 浓度 mg/mL *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-3 (4.6x150 mm, 5um) 流动相：甲醇-水-冰醋酸(45:55:1)柱温：40℃检测波长：287 nm流速：1.0 mL/min 进样量：10ul