克拉霉素中有关物质检测方案(液相色谱柱)

July 25， 2016No.31， BDA International Business Park，2 Jing Yuan Street， BeijingEconomic Technological Development Zone，Beijing， China 100176Phone 010-6785-6801，FAX 010-6785-6882 LC Application Lab， Shiseido China 欧洲药典克拉霉素 (Clarithromycin)有关物质分析 本次选用资生堂粒径为 3um 的MGI S3 4.6×100型色谱柱，按照欧洲药典对克拉霉素进行有关物质的分析。首先进行系统适用性实验，结果如图1所示，主峰于 11.4 min 左右出峰，不对称因子为1.28，满足药典小于1.7的要求。对供试品分析结果如图2和图3所示，主峰与前杂质峰分离度为 1.10. 图1 MGI 色谱柱分析克拉霉素系统适用性样品(欧洲药典) Minutes 图 2 MG II 色谱柱分析克拉霉素供试品(欧洲药典) Minutes 图 3MGⅡ色谱柱分析克拉霉素供试品(欧洲药典)放大图 HPLC Conditions ： 色谱柱： MG II S3； 4.6 mm i.d.×100 mm 流动相： A： 4.76 g/L 磷酸二氢钾，稀磷酸调节 pH值至4.4 B：乙腈 梯度条件： 流1100 pL/min温 检 40°C PDA 205nm 进样量： 10pL 系剂：统适用性： 0.07 5mg/mL；供试品：1.5mg/mL 50%乙腈-水溶液 注：图1中注释为不对称因子，图2图3中注释为分离度 HPLC Conditions ： Column： MG II S3； 4.6 mm i.d.×100 mm Mobile phase：A： 4.76 g/L potassium dihydrogen phosphate， adjusted to pH 4.4 with dilute phosphoric acidB： acetonitrile Gradient： Time (min) A (percent v/v) B (percent v/v)0-3275→4025→6032-344060 Flow rate： 1100 pL/min Temperature： 40 ℃ Detection：PDA 205nm Injection volume：10pL Sample： System suitability solution： 0.075mg/mL； Test solution： 1.5mg/mL Solvent： 50% acetonitrile-water solution Annotation： Graph 1-asymmetry factor， Graph 2&3-resolution 由于客户提供了主峰前杂质D的单标，故按照相同色谱条件分析杂质D 单标样品，确认主峰前杂质D 的位置，结果如图4所示，杂质D样品的出峰时间与供试品主峰前杂质的出峰时间一致。 Minutes 图4MGII色谱柱分析克拉霉素供试品和杂质D单标样品(欧洲药典)放大图 HPLC Conditions ： 色谱柱： MG II S3； 4.6 mm i.d.×100 mm 流动相： A： 4.76 g/L 磷酸二氢钾，稀磷酸调节pH 值至4.4 B：乙腈 梯度条件： 时间(min) A (百分比) B (百分比) 0-32 75→40 25→60 32-34 40 60 流1100 pL/min温 检 40°C PDA 205nm 进样量： 供共品：10pL；杂质D： 5pL 供试品：1.5mg/mL；杂质D：1.0mg/mL 50%乙腈-水溶液 注：图中注释为分离度 HPLC Conditions ： Column： MG II S3；4.6 mm i.d.×100mm Mobile phase： A： 4.76 g/L potassium dihydrogen phosphate， adjusted to pH 4.4 with dilute phosphoric acidB： acetonitrile Gradient： Time (min)A (percent v/v)B (percent v/v)0-3275→4025-6032-344060 Flow rate： 1100 pL/min Temperature： 40 ℃ Detection： PDA 205nm Injection volume：Test solution： 10pL； Impurity D： 5pL Sample： Test solution： 1.5mg/mL； Impurity D： 1.0 mg/mL Solvent： 50% acetonitrile-water solution Annotation： resolution 综上所述，选用资生堂 MG II S3； 4.6 mmi.d.×100 mm 型色谱柱，按照欧洲药典对克拉霉素进行有关物质的分析。系统适用性实验中，主峰的不对称因子为1.28，满足小于1.7的欧洲药典要求。对供试品进行分析，主峰与杂质D分离度为1.10。 ( 赵子塞郭彦丽 )