酒石酸长春瑞滨中有关物质检测方案(液相色谱柱)

Jul.04， 2016LC Application Lab， Shiseido ChinaNo.31， BDA International Business Park，2 Jing Yuan Street， BeijingEconomic Technological Development Zone，Beijing， China 100176Phone 010-6785-6801， FAX 010-6785-6882 酒石酸长春瑞滨的15药典分析 尝试使用资生堂三款C18色谱柱， UG120、ODS、MG分别对客户提供酒石酸长春瑞滨，按照15药典系统适应性条件进行分析，对比分析结果如图1所示，三款色谱柱均未得到长春瑞滨和杂质I良好分离，杂质I(图中箭头指出)被包裹在主峰中，且出峰顺序与药典要求不符(药典要求杂质相对保留时间1.2)。 Minutes 图1 15药典方法分析比较图 HPLC Conditions ： 色谱柱： CAPCELL PAK C18 UG120 S5；4.6mm i.d.×250mm SUPERIOREX ODS S5；4.6mmi.d.×250mm CAPCELL PAK C18 MG S5；4.6mm i.d.×250mm 流动相： C0.05mol/L 磷酸二氢钠溶液(用磷酸调节pH值至4.2)-0.2%癸烷磺酸钠的甲醇溶液(33：67) 流速：： 11.0mL / min温检浓 ( 度：40C ) ( 测： U V 267nm ) 度：光照后酒石酸长春瑞滨 1.4mg/mL+杂质110 ug/mL (水溶解) 进样量：20uL 我们使用柱效最高的 C18MG 色谱柱，继续尝试从流动相比例和柱温两方面进行了调整。 首先在流动相比例方面，我们微调了有机相和水相的比例，在有机相比例分别为70、67(原条件)、65、62，得到对比结果如图2所示。杂质Ⅰ和主峰位置，随着保留时间的延长出峰顺序改变，但无法得到二者完全分离结果。 Minutes 图2不同流动相比例比较图 HPLC Conditions： 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5；4.6mm i.d.×250mm 流动相： A：0.05mol/L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调节pH值至4.2) B： 0.2%癸烷磺酸钠的甲醇溶液 比例见图例所示 速：1.0mL/min 度：40°C 流温检浓浓度：光照后酒石酸长春瑞滨 1.4mg/mL+杂质110ug/mL (水溶解) 测： UV 267nm 进样量：：20uL 继续对柱温进行调整，分别在40、30、25°C柱温分析比较结果如图3所示，杂质Ⅰ和主峰位置出现反转，在30°C及以下即能够得到杂质Ⅰ和主峰良好分离结果，同时出峰顺序与药典要求一致。其中在30°C条件下，得到主峰与杂质Ⅰ分离度2.21，理论塔板数6098，满足系统适应性要求结果(图4)。 图3不同温度比较图 图430°C条件下分析谱图 图上所示数字从上到下分别为理论塔板数和分离度 HPLC Conditions ： 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5；4.6mm i.d.×250mm 流动相：0.05mol/L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调节pH值至4.2)-0.2%癸烷磺酸钠的甲醇溶液 (33：67) 流速：：1.0mL / min检浓 ( 测： U V 267nm ) 度：光照后酒石酸长春瑞滨 1.4mg/mL+杂质110 ug/mL(水溶解) 进样量：220uL 综上所述，使用MG 色谱柱，综合考虑分离度和整体分析时间，选择在30°C进行分析，可得到酒石酸长春瑞滨满足15药典系统适应性的良好分析结果。 杨茜郭彦丽