新疆雪菊中挥发性成分检测方案

固相微萃取气质联用分析新疆雪菊的挥发性成分 15实验部分 1.1仪器与材料 气相色谱--质谱联用仪 (Perkin Elmer 珀金埃尔默， Clarus500)；固相微萃取装置、聚二甲基硅氧烷/二乙烯基苯 (PDMS/DVB 65um)固相微萃取头(美国SUPELCO公司)；聚二甲基硅氧烷(PDMS 44um SPME-S-01) 固相微萃取头(上海新拓分析仪器科技有限公司)。 试验材料：采自新疆昆仑山山区，经鉴定为菊科金鸡菊属植物。 1.2仪器条件 色谱柱： HP-5MS(30 mx0.25mmx0.5 um)；载气：：高纯氦气(99.999%)；流速：1.0 mL/min； 初始状态不分流；进样口温度：250℃；程序升温：50℃保持 1min， 以5℃/min 升温至200℃，保持10 min； 离子化方式：电子轰击(EI)；离子化能量：70eV；离子源温度：230℃；传输线温度270℃；溶剂延迟： 0 min；扫描范围：50~400amu；检测方式：全离子扫描(SCAN)；定量方式：面积归一化法。 1.3实验方法 将固相微萃取头插入气相色谱质谱联用仪的进样口中，推出纤维头于250℃老化 40min。同时将雪菊样品研磨成粉状，称取约1g的样品置于 5mL的样品瓶中，加入约3mL的沸水并用硅橡胶垫瓶盖密封，震荡后将样品瓶放入约70℃水浴锅中。将老化后的固相微萃取纤维头按操作规程插入样品瓶中，顶空萃取30min， 抽回萃取头并拔出固相微萃取装置，迅速插入仪器的进样口，在250℃热解析 3min 后启动仪器采集数据。 用上述条件对新疆雪菊挥发性成分进行分析，采集的总离子流图见图1. 图1雪菊挥发性成分总离子流色谱图 所得到的质谱图图用 NIST 谱库检索进行定性，按照峰面积归一化法测定组分的相对含量，结果列于表1。 表1雪菊中挥发性成分鉴定结果 40 17.57 香树烯 Alloaromadendrene 0.21 C15H24 41 17.64 未知 0.39 42 17.80 丁子香酚 Eugenol 0.07 C10H1202 43 17.94 香橙烯 Aromadendrene 0.09 C15H24 44 19.63 y-榄香烯 y-Elemene 0.32 C15H24 45 19.92 反式-α-香柑油烯 trans-o-Bergamotene 1.81 C15H24 46 21.11 未知 0.42 47 21.21 β-金合欢烯 cis-B-Farnesene 0.93 C15H24 48 22.21 香柠檬醇 Bergamotol 0.51 C15H24O 49 22.43 2(4H)-Benzofuranone， 4，4，7a-trimethyl- 0.25 CH1602 4，4，7-三甲基-2(4H)-苯并夫喃酮 50 23.00 未知 0.60 51 23.69 环氧石竹烯 Caryophyllene oxide 2.57 C15H24O 52 23.94 丙烯菊酯 Bioallethrin 2.46 C19H2603 53 24.53 未知 0.76 54 26.17 未知 0.79 2 结果与讨论 2.1固相微萃取条件的选择 2.1.1萃取头的选择 SPME 的萃取头种类较多，本次试验选用的萃取头，其适用范围是极性挥发性物质、醇、胺等化合物的吸附。 2.1.2样品用量样品量的多少直接影响色谱峰的分离效果，与色谱信号的强弱相关，样品量太小，色谱的采集信号强度低，对分析结果较为困难；样品量太大，虽然信号增强，但色谱峰分离度降低，不利于组分的完全分离。实验证明，样品量在1g 左右置于 5mL的样品瓶中，即可满足优化试验的条件。 2.1.3萃取温度萃取温度直接决定样品的萃取效率及萃取头的吸附效果。本次试验选用40℃、50℃、60℃、70℃、80℃五个水平来研究萃取温度对萃取效果的影响，比较结果见图2，雪菊挥发性组分的主要成分响应随着萃取温度的增加而呈正比增加。在70~80℃之间变化趋缓，故最佳萃取温度选择70℃。 图2不同萃取温度的检测结果统计比较 2.1.4吸附时间在最佳的萃取温度下对吸附时间进行研究，固相微萃取头达到平衡的时间取决于目标物的浓度和萃取头对其的灵敏度。本次试本选用 5min、10min、20min、30min、45min 五个时间水平来研究萃取时间对萃取效果的影响，结果见图3，表明随着萃取时间的增加，色谱信号的响应呈正比增加，在30~45min之间已趋于平衡，出于对实验效率的考虑，萃取时间既可以达到较好的萃取效果又可以对样品进行连续的检测，所以萃取时间选择30min。 图3不同萃取时间的检测结果统计比较 2.2重复性实验 在最优化的条件下连续5次对雪菊样品进行分析，其中响应信号较高的化合物组分的相对百分含量的变异系数均小于5%，从表2可以说明该方法重复性较好，适用于雪菊挥发性成分的分析测定。 表2主要挥发性成分重复测定结果(n=5) 化合物 RSD/% (Compounds) 3-烯 4.32 1，3，8-对-薄荷三烯 3.85 a-柠檬烯 2.56 马鞭草烯醇 3.58 香芹酮 4.26