香梨中有机磷农药检测方案

固相微萃取-气相色谱法快速检测库尔勒香梨中有机磷农药残留量 钱宗耀* (新疆农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，新疆乌鲁木齐830091) 1实验部分 1.1仪器、试剂与材料 气相色谱仪(Thermo Fisher 赛默飞世尔科技， Trace2000)；分析天平(Mettle-Toledo 梅特勒-托利多)；匀浆机(IKA仪科)；固相微萃取装置(美国 SUPELCO公司)、聚二甲基硅氧烷萃取头 (SPME-S-01 PDMS 上海新拓仪器公司) 9种有机磷农药标准品：敌敌畏、甲胺磷、甲拌磷、二嗪磷、乐果、毒死蜱、甲基对硫磷、马拉硫磷、杀螟硫磷(1000ug/mL，农业部环境质量监督检验测试中心) 试验材料：库尔勒香梨种植基地。 1.2标准溶液配制 准确配制9种有机磷农药标准品，用丙酮定容，全部配成 20 mg/L 的标准储备液，吸取以上标准储备液适量，混合后稀释至质量浓度为0.05、0.1、0.2、0.5、1.0 mg/L系列标准溶液。 1.3实验方法 1.3.1样品前处理 将库尔勒香梨 2kg 先切成块后等份取出代表部分，在食物破碎机搅碎至浆状。根据试验要求准确称取样品，加入已知量的混合农药标准，均匀混合后备用。 1.3.2 SPME 萃取和 GC 进样 准确称取 5g样品置于加盖容器瓶(10mL)中，将容器瓶放在温控装置上，按操作要求将萃取头插入容器瓶推出且置于样品液面上方，准确控温在一定时间后按要求取出萃取头。迅速插入气相色谱仪的进样口并推出萃取头，热解析一定时间后启动色谱仪进样程序。取出萃取头按上述方法进行再次萃取分析备用。 1.4仪器条件 色谱柱： VF-1701(30mx0.25 mmx0.5 u.m)；载气：氮气(99.99%)；流速：1.0mL/min；初始状态不分流；进样口温度：250℃；程序升温：60℃保持1min， 以15℃/min 升温至240℃，保持 4min。 2结果与讨论 2.1萃取条件的优化 2.1.2萃取方式的选择： 固相微萃取可分为直接法(DI-SPME)和顶空法(HS-SPME)，由于库尔勒香梨样品为浆状待测物，会影响萃取头的使用效率，本次试验选择顶空萃取法进行测试。 2.1.3萃取温度： 本次试验选用40℃、50℃、60℃、70℃、四个水平来研究萃取温度对萃取效果的影响，9种农药的响应都随着萃取温度的增加而呈正比增加。在60~70℃之间变化趋缓，在该温度下农药稳定且不会分解，故最佳萃取温度选择60℃，图1为温度对毒死蜱萃取效果的影响。 图1不同萃取温度对毒死蜱的萃取效果 2.1.4萃取时间： 固相微萃取头达到平衡的时间取决于待测农药的浓度和萃取头对农药的灵敏度，随着萃取时间的延长，萃取效率将逐渐增加达。试验所选择的萃取时间，应考虑到萃取浓度和试式效率的最佳结合。本次试验选用 5min、10min、20min、30min、40min五个时间水平来研究，9种有机磷农药随着萃取时间的增加，峰面积响应呈正比增加，选择20min 的萃取时间既可以达到较好的萃取效果又可以实现仪器检测的连续性。图2以毒死蜱农药为代表，在不同萃取时间下的萃取效率影响。 图2不同萃取时间对毒死蜱农药的萃取效果 图39种农药标准品 SPME-GC-FPD色谱图(1.0g/mL) 2.3标准曲线 在优化的萃取条件下，测定5种不同浓度的混合农药标准溶液(0.05、0.1、0.2、0.5、1.0mg/L)，每种浓度进样3次。在此线性范围内以浓度与平均峰面积作标准曲线，变异系数RSD(%) 值在1.05~4.25之间，相关系数r均大于0.99，标准曲线见图4。 Concentration (ug/mL) 图4不同浓度下9种有机磷农药标准曲线 图5不同浓度条件下9种有机磷农药色谱图(0.05-1.0ug/mL) 图6库尔勒香梨样品 SPME-GC-FPD 色谱图 试验所得的9种有机磷农药的线性方程及参数见表1。 表1SPME-GC-FPD检测9种有机磷农药的标准曲线参数 序号 保留时间 农药组分 回归方程 RSD/% 相关系数(r) min 1 8.89 敌敌畏 y=1076356.3x-49216.2 1.25 0.9970 2 9.87 甲胺磷 y=668157x+29928 2.56 0.9992 3 12.93 甲拌磷 y=1168774.4x-3391.7 2.48 0.9944 4 13.43 二嗪磷 y=793617x+6408.4 1.59 0.9946 5 14.81 乐果 y=79475x+5894.3 3.49 0.9927 6 15.64 毒死蜱 y=369183x+26749 1.05 0.9935 7 16.05 甲基对硫磷 y=125846x+23696 2.03 0.9913 8 16.19 马拉硫磷 y=68571x+1973 4.19 0.9963 2.4方法回收率及精密度 根据蔬菜的农药最大残留量标准，对库尔勒香梨样品添加2不同浓度的混合标准，分别为0.5、0.1 mg/kg， 按样品分析步骤操作重复测定5次，另取同批次样品作空白实验为本底，扣除本底(实测样品农药残留量均为未检出)后分别计算加标回收率及相对标准偏差(RSD)(见表3)。 表2SPME-GC-FPD检测9种有机磷农药平均回收率及 RSD 值(n=5) 添加量 库尔勒香梨 农药组分 /(mgkg) 回收率/% RSD/% 敌敌畏 0.5，0.1 78.4，72.1 3.25 甲胺磷 0.5，0.1 5.12 甲拌磷 0.5，，( 81.3，84.5 4.36 二嗪磷 0.5， 84.1，90.3 3.78 乐果 0.5，，( 73.2，，76.9 5.63 毒死蜱 0.5， 87.6，93.5 2.14 甲基对硫磷 0.5，C 73.8，78.4 4.71 马拉硫磷 0.5，0.1 75.9，80.2 3.56 杀螟硫磷 0.5，0.1 71.8，73.6 5.83