中药中限度检查检测方案

uV 中药材中黄曲霉毒素整体解决方案 近年来为了加强对中药材的质量控制，根据国家食品药品监督管理局的部署和安排，经国家药典委员会有关单位和专家对中药材中真菌毒素的研究，拟在2010版中国药典的基础上，进一步增加中药的安全性指标控制项目，逐步加强对中药材中真菌毒素的检测。2015版中国药典中无论是中药材的品种，还是真菌毒素的种类，其相关检测数量均会增加。 针对真菌检测监控体系的日益完善及其检测需求的不断增加，月旭科技近期推出了中药材中黄曲霉毒素检测整体解决方案，供广大实验者参考。 1、适用范围 适合于陈皮、胖大海、僵蚕、酸枣仁、桃仁等中药材品种。完全执行2010版中国药典附录 IX V黄曲霉毒素测定法进行检测。 2、提取步骤 取供试品粉末约15.0 g(过二号筛)，精密称定，加入氯化钠3.0 g，，置于均质瓶中，精密加入70%甲醇溶液75.0mL， 高速搅拌2分钟(搅拌速度大于11，000转/分)，离心5分钟(离心速度2500转/分)，定性滤纸过滤、然后精密量取上清液 15.0 mL， 置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，量取续滤液 20.0 mL，待净化。 混合对照品溶液的制备：精密量取黄曲霉毒素混合标准品(黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2标示浓度分别为 1.0 ug/ml、0.3 ug/ml、1.0ug/ml、0.3ug/ml) 0.5 ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为储备液。 3、、免疫亲和 SPE 柱净化步骤净化 SPE柱：月旭Welchrom@ Aflatoxin (3mL) 1)回温解冻：提前半个小时将黄曲霉毒素免疫亲和柱从冰箱拿出常温解冻； 2)上样：准确移取 20 mL提取好的样品溶液注入免疫亲和柱，使溶液以1滴/S的速度通过免疫亲和亲，直至2mL-3mL 空气通过柱体，弃去流出液； 3)淋洗：用20mL水淋洗免疫亲和柱，流速为1滴/s---2滴/s，淋洗两次。直至空气进入免疫亲和柱，直至2 mL-3 mL 空通通过柱体，弃去全部的流出液，抽干小柱； 4)洗脱：准确加入 1.0 mL甲醇洗脱，流速约为1滴/s， I收集全部的洗脱液于干净的离心管中，用甲醇-乙腈-水(40： 18：42)定容至2mL，供液相色谱测定。 4、色谱条件(光化学衍生方法) 色谱柱：月旭Ultimate XB-C18， 4.6×250 mm， 5 um 衍生装置：月旭光化学衍生器 流动相：甲醇-乙腈-水(40：18：42) 流速：0.8mL/min 柱温：30℃ 进样量： 20uL 检测波长： Ex=360nm， Em=450 nm 5.色谱图或者加标回收率结果 uV 图1：陈皮项目四种黄曲霉毒素标准样品色谱图(从左到右依次为 G2，G1，，B2，， B1，浓度为 0.75 ppb， 2.5 ppb， 0.75 ppb， 2.5 ppb) 图2：陈皮样品色谱图 uV 图3：陈皮样品加标色谱图(从左到右依次为 G2， G1，， B2， B1，加标浓度为 0.75 ppb， 2.5 ppb， 0.75 ppb， 2.5 ppb) 00 998 检测器A Ex：360nm，Em：450nm801 图4：胖大海项目四种黄曲霉毒素标准样品色谱图(从左到右依次为 G2， G1， B2，B1，浓度为0.75 ppb， 2.5 ppb， 0.75 ppb， 2.5 ppb)uV 图5：胖大海样品色谱图 uV 图6：胖大海样品加标色谱图(从左到右依次为 G2， G1， B2， B1，加标浓度为 0.75 ppb， 2.5 ppb， 0.75 ppb， 2.5 ppb) uV 图7：僵蚕项目四种黄曲霉毒素标准样品色谱图(从左到右依次为 G2，G1，，lB2，， B1，浓度为 0.75 ppb， 2.5 ppb， 0.75 ppb， 2.5 ppb) 图8：僵蚕样品色谱图 uV 图9：僵蚕样品加标色谱图(从左到右依次为 G2， G1，， B2， B1， 加标浓度为 0.75 ppb， 2.5ppb， 0.75 ppb， 2.5 ppb) 图10：酸枣仁项目四种黄曲霉毒素标准样品色谱图(从左到右依次 为 G2， G1， B2，B1，浓度为 0.75 ppb， 2.5 ppb， 0.75 ppb， 2.5 ppb)uV 图11：酸枣仁样品色谱图 uV 图12：酸枣仁样品加标色谱图(从左到右依次为G2， G1， B2， B1，加标浓度为 0.75 ppb， 2.5ppb， 0.75 ppb， 2.5 ppb) 图13：桃仁项目四种黄曲霉毒素标准样品色谱图(从左到右依次为G2， G1， B2，.，tB1，，浓度为 0.75 ppb， 2.5 ppb， 0.75 ppb， 2.5ppb) 图14：桃仁样品色谱图 uV 图15：桃仁样品加加色谱图(从左到右依次为G2， G1， B2，， B1， 加标浓度为 0.75 ppb， 2.5 ppb， 0.75 ppb， 2.5 ppb) 表1：加标回收率试验 加标浓度 平均回收率(%) 样品 (ppb) (n=5) G2/B2： 0.75； B1 B2 G1 G2 G1/B1：2.5 陈皮 同上 86.6 84.0 89.1 87.1 胖大海 同上 80.8 80.6 90.9 80.9 僵蚕 同上 79.2 79.7 83.1 77.8 酸枣仁 同上 98.0 97.4 97 93.4 桃仁 同上 89.4 86.3 93.3 93.7