化学药中有效成分含量分析检测方案

凯米斯科技S.Z.CHEMISTWWw.ymcsepu.com 苯妥英钠含量测定和有关物质检查(液相色谱法参照美国药典) 含量测定 1、溶液 系统适应性溶液：将2-羟基-1，2-二苯基乙酮 (benzoin)对照品 75mg 溶于 10ml甲醇，加入 40ml 0.05M 磷酸二氢铵(用磷酸调节 pH2.5)-乙腈溶液(45：35)，混合均匀，然后取1.0ml至10ml容量瓶中，用 0.1mg/ml 苯妥英对照品溶液(用流动相配置)稀释至刻度。 标准溶液：：取苯妥英对照品用流动相配置成 0.05mg/ml溶液 样品溶液：i：取苯妥英钠样品用流动相配置成 0.05mg/ml 溶液 2、、色谱条件 仪器：液相色谱仪 检测器：UV(220nm) 色谱柱：LL1 YMC-Pack ODS-AQ， 5um ， 4.6x250mm (P/N： AQ12S05-2546WT) 流动相：0.05M磷酸二氢铵缓冲溶液(用磷酸调节 pH2.5)-乙腈-甲醇45：35：20 流速：11.5ml/min 进样量： 20ul 3、系统适应性试验 取系统适应性溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，苯妥英色谱峰与2-羟基-1，2-二苯基乙酮色谱峰之间的分离度大于1.5。 取标准溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，以苯妥英色谱峰计算，理论塔板数不低于9400，拖尾因子小于1.5，相对标准偏差小于1.0%。 4、测定 分别取标准溶液与样品溶液 20ul，注入液相色谱仪，记录色谱图，按以下公司计算： 苯妥英钠%=(ru/rs)x(Cs/Cu)x(M/Mr2)x100 ru：样品溶液色谱峰峰面积Cu：样品溶液苯妥英钠浓度(ug/mL)：标准溶液色谱峰峰面积Mr：苯妥英钠分子量(274.25)Cs：标准溶液苯妥英浓度(ug/mL)Mr2：苯妥英分子量(252.27) 以干燥品计，苯妥英钠含量应为98.0%-102.0%。 有关物质检查 色谱条件、系统适应性溶液与含量测定相同。 标准溶液 取相应对照品，用流动相配置成每 ml 含0.5pg二苯甲酮(benzophenone)、1ug 苯妥英、9pg苯妥英有关物质 A (dipehylglycine)和 9ug 苯妥英有关物质B(diphenylhydantoic acid)的溶液。 样品溶液 取样品，用流动相配置成每 ml 含苯妥英钠 1mg 的溶液。 系统适应性试验 取标准溶液 20pul 注入液相色谱仪，记录色谱图，每个色谱峰的相对标准偏差小于5.0%。 测定 取标准溶液和样品溶液 20ul分别注入液相色谱仪，记录色谱图。 有关物质A、有关物质B和二苯甲酮的百分含量按以下公式计算： ru： 样品溶液有关物质A、有关物质B或二苯甲酮色谱峰峰面积 rs： 标准溶液有关物质A、有关物质B或二苯甲酮色谱峰峰面积 Cs：标准溶液有关物质A、有关物质B或二苯甲酮的浓度(ug/mL) Cu：样品溶液苯妥英钠浓度(ug/mL) 其他单个杂质峰百分含量按以下公式计算： ru：样品溶液杂质色谱峰峰面积Cu：样品溶液苯妥英钠浓度(ug/mL)rS：标准溶液杂质色谱峰峰面积Mr1：苯妥英钠分子量(274.25)Cs：标准溶液苯妥英浓度(ug/mL)Mr2：苯妥英分子量(252.27) 有关物质A的量小于0.9%，有关物质B的量小于0.9%，二苯甲酮的量小于0.1%，除二苯甲酮外，杂质总量小于0.9%。 深圳凯米斯科技有限公司 电话： Email： sales@szchemist.com