食品中维生素D的测定

 1. 实验部分1.1 实验仪器及耗材Shimadzu LC-40D高效液相色谱仪；色谱柱：ShimNex S-C18-PAH (4.6×150 mm，3 μm；P/N：380-01247-14)；纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱+ 取水器）SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。 1.2 混合对照品溶液的制备 分别称取维生素D2对照品和维生素D3对照品适量，加甲醇制成每1 mL各含1 mg的单标溶液。分别精密量取维生素D2和维生素D3单标溶液适量，用95%乙腈水稀释制成混合对照品溶液，使得维生素D2和维生素D3的最终浓度均为100 ng/mL。1.3 分析条件 色谱柱：ShimNex S-C18-PAH (4.6×150 mm，3 μm；P/N：380-01247-14) 柱温：35℃检测波长：264 nm 流速：0.4 mL/min 进样量：100 μL 流动相：95%乙腈水：甲醇=40：60 2. 实验结果按照上述色谱条件（1.3）进行采集，混合对照品溶液色谱图如下：混合对照品溶液序号* 目标物 保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 拖尾因子 分离度 1 VD2 18.213 57840 3013 20016 1.113 -- 2 VD3 20.274 82664 3949 20863 1.101 3.829 重现性混合对照品溶液重现性目标物保留时间（min, n=3）峰面积（Area, n=3）数据1 数据2 数据3 RSD （%）数据1 数据2 数据3 RSD （%）VD2 18.213 18.000 18.000 0.12 57840 57676 57816 0.15 VD3 20.274 20.280 20.31 0 0.11 82664 82747 82937 0.17 3. 结论本文建立了维生素D2和维生素D3的HPLC测定方法。参照新国标《食品中维生素D的测定》征求意见稿中第2法二维色谱条件，采用色谱柱ShimNex S-C18-PAH分析维生素D2和维生素D3，结果显示，2个化合物峰形对称，维生素D2和维生素D3达到基线分离，满足日常检测需求。此方法可为食品中维生素D2和D3的检测提供参考。