SepaBean machine快速制备液相色谱系统 应用于脂质体类化合物分离纯化应用案例

SepaBean machine快速制备液相色谱系统应用于脂质体类化合物分离纯化应用案例脂质体（liposome）是一种人工膜，是由卵磷脂和神经酰胺等制得的脂质体(空心)，具有的双分子层结构与皮肤细胞膜结构相同。脂质体具有靶向性和淋巴定向性、缓释作用、降低药物毒性以及提高稳定性等特点，使脂质体具有广泛的应用。主要应用于转基因、药物递送，还可用作将染料递送至纺织 品、杀虫剂 至植物、酶和营养补充剂至食物以及化妆品 至皮肤的载体等，具有广阔的应用领域。本案例中主要以来自某生物医药公司的脂质体样品为例，对其分离纯化方法进行简单的介绍。样品信息来自某生物医药公司脂质体，样品呈白色粉末状，纯度98%，想要提高纯度至99.5%，溶解性较差，采用二氯甲烷加甲醇进行超声加热溶解（温度低于60度），且样品紫外吸收较弱，需要连接ELSD进行检测，因此采用SepaBean machine快速液相制备色谱系统搭配ELSD检测器进行分离纯化。实验方案先采用HPLC液相检测，根据其液相谱图确认进一步分离纯化方法，液相谱图结果为目标产物为 RT=12.918的峰，纯度98.4%，详情如图1所示。图1.HPLC液相谱图根据液相方法及结果进行进一步分离纯化的实验参数设置如表1所示。表1. Flash制备实验参数SepaBean machine标准型 + ELSD分离柱120g SepaFlash键合相C18(40-63 µm, 100 Å, 订货号：SW-8201-120-IR)检测波长220 nm；254 nm；ELSD流动相溶剂A：水溶剂B：甲醇流速40ml/min进样量110mg洗脱梯度时间 (min)溶剂B (%)07020903510050100结果与讨论该脂质体类样品由于其溶解性很差，因此降低上样量，上样量110mg，采用120g C18分离柱（40-63 µm, 100 Å, 订货号：SW-8201-120-IR）进行分离纯化。从分离谱图可以看出，该物质紫外吸收较弱需要借助ELSD检测器进行检测，从分离谱图看其分离效果较好，目标组分满足客户检测纯度要求。此次解决方案采用的是三泰科技的键合相系列色谱柱，仪器是SepaBean machine标准型制备液相色谱系统搭配ELSD检测器，为紫外吸收较弱的脂质体类化合物提供更多的分离纯化方案，同时也为其他种类紫外吸收较弱的化合物的分离纯化提供参考。SepaFlash键合相系列分离柱订购信息无定形C18，粒径40–63µm，孔径60Å（碳含量17%，封端，比表面积500m2/g，上样量0.1–2%）产品编码柱尺寸上样量流速(ml/min)柱长度(mm)柱内径(mm)最大工作压力(psi/bar)SW-8201-004-IR5.9 g5.9 mg–118 mg10–20113.812.4400/27.5SW-8201-012-IR23 g23mg–0.46g15–30134.821.4400/27.5SW-8201-025-IR38 g38 mg–0.76 g15–3018421.4400/27.5SW-8201-040-IR55 g55 mg–1.1 g20–40184.426.7400/27.5SW-8201-080-IR122 g122 mg–2.5 g30–60257.431.2350/24.0SW-8201-120-IR180 g180 mg–3.6 g40–80261.538.6300/20.7SW-8201-220-IR340 g340 mg–6.8 g50–100223.561.4300/20.7SW-8201-330-IR475 g475 mg–9.5 g50–100280.261.4250/17.2※ 兼容市场上所有快速液相制备色谱系统。 如需了解更多信息，请访问ChemBeanGo在线商店：https://store.chembeango.com/ 或者拨打400热线：400-662-9158。三泰科技（常州）有限公司地址：江苏省常州市新北区庆阳路78号官网：www.santaitech.comCBG在线商店：https://store.chembeango.cn/电话：400-662-9158SepaBeanmachine快速制备液相色谱系统 应用于脂质体类化合物分离纯化应用案例 脂质体（liposome）是一种人工膜，是由卵磷脂和神经酰胺等制得的脂质体 (空心)，具有的双分子层结构与皮肤细胞膜结构相同。脂质体具有 靶向性和淋巴 定向性、缓释作用、降低药物毒性以及提高稳定性等特点，使 脂质体具有广泛的 应用。主要应用于转基因、药物递送，还可用作将染料递送至纺织品、杀虫剂至 植物、酶和营养补充剂至食物以及化妆品至皮肤的载体等，具有广阔的应用领域。本案例中主要以来自某生物医药公司的脂质体样品为例，对其分离纯化方法进行 简单的介绍。 来自某生物医药公司脂质体，样品呈白色粉末状，纯度98%，想要提高纯度至 99.5%，溶解性较差，采用二氯甲烷加甲醇进行超声加热溶解（温度低于60度），且样品紫外吸收较弱，需要连接ELSD进行检测，因此采用SepaBeanmachine 快速液相制备色谱系统搭配ELSD检测器进行分离纯化。 先采用HPLC液相检测，根据其液相谱图确认进一步分离纯化方法，液相谱图结 果为目标产物为 RT=12.918的峰，纯度98.4%，详情如图1所示。 7 总计 图1.HPLC液相谱图 根据液相方法及结果进行进一步分离纯化的实验参数设置如表1所示。 表1.Flash制备实验参数 SepaBeanmachine标准型 +ELSD 分离柱 120g SepaFlash键合相C18(40-63µm，100Å，订货号：SW-8201-120-IR) 检测波长 220nm；254nm；ELSD 流动相 溶剂A：水 溶剂B：甲醇 流速 40ml/min 进样量 110mg 洗脱梯度 时间 (min) 溶剂B(%) 0 70 20 90 35 100 50 100 结果与讨论 该脂质体类样品由于其溶解性很差，因此降低上样量，上样量110mg，采用120g C18分离柱（40-63µm，100Å，订货号：SW-8201-120-IR）进行分离纯化。从分离谱图 可以看出，该物质紫外吸收较弱需要借助ELSD检测器进行检测，从分离谱图看 其分离效果较好，目标组分满足客户检测纯度要求。此次解决方案采用的是三泰 科技的键合相系列色谱柱，仪器是SepaBeanmachine标准型制备液相色谱系统 搭配ELSD检测器，为紫外吸收较弱的脂质体类化合物提供更多的分离纯化方 案，同时也为其他种类紫外吸收较弱的化合物的分离纯化提供参考。 SepaFlash键合相系列分离柱订购信息 无定形C18，粒径40–63µm，孔径60Å （碳含量17%，封端，比表面积500m2/g，上样量0.1–2%） 产品编码 柱尺寸 上样量 流速 (ml/min) 柱长度 (mm) 柱内径 (mm) 最大工作压力 (psi/bar) SW-8201-004-IR 5.9g 5.9mg–118mg 10–20 113.8 12.4 400/27.5 SW-8201-012-IR 23g 23mg–0.46g 15–30 134.8 21.4 400/27.5 SW-8201-025-IR 38g 38mg–0.76g 15–30 184 21.4 400/27.5 SW-8201-040-IR 55g 55mg–1.1g 20–40 184.4 26.7 400/27.5 SW-8201-080-IR 122g 122mg–2.5g 30–60 257.4 31.2 350/24.0 SW-8201-120-IR 180g 180mg–3.6g 40–80 261.5 38.6 300/20.7 SW-8201-220-IR 340g 340mg–6.8g 50–100 223.5 61.4 300/20.7 SW-8201-330-IR 475g 475mg–9.5g 50–100 280.2 61.4 250/17.2 ※兼容市场上所有快速液相制备色谱系统。 三泰科技（常州）有限公司 地址：江苏省常州市新北区庆阳路78号 官网：www.santaitech.com CBG在线商店：https：//store.chembeango.cn/ 电话：400-662-9158