离子色谱法测定婴幼儿食品和乳品中胆碱含量

本文利用岛津离子色谱仪，建立一种简便、快速、准确检测婴幼儿食品和乳品中胆碱的测定方法。该方法采用外标法定量，保留时间和峰面积重复性良好。加标回收实验中，胆碱的回收率在92.5~95.4%之间，回收及精密度良好。该方法操作简捷，且本方法中检出限、线性、重复性等均优于标准相关要求。SSL-CA23-049Excellence in Science Excellence in ScienceLC-374 离子色谱法测定婴幼儿食品和乳品中胆碱 含量 LC-374 摘要：本文使用 离 子色谱仪，建立了婴幼儿食品和乳品中胆碱的检测方法。本方法参考中华人民共和国国家 卫 生健康委员会国家市场监督管理总局发布的《GB 5413.20-2022 食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中胆碱 的测定离子色谱法》，在0.2~5.0 mg/L 浓度范围内建立校准曲线，胆碱的线性相关系数均在 0.999 以上，线 性良好。胆碱(本文均以胆碱氢 氧 化物计)方法检出限为 0.145 mg/100 g， 方法定量限为 0.485 mg/100 g，在 重 复 性实验中，保留时间和峰面积重 复 性良好。加标 回 收实验中，各组分回收及精密度良好。该方法简单方 便，能有效检测婴幼儿食品和乳品中胆碱的含量。 关键词：婴幼 儿 食品 乳品 离子色谱仪 胆碱 技术特点： 心使用 C18固相萃取柱净化，有效排除食品样品的基质干扰。 心胆碱在色谱柱上专属性良好，无干扰。 小方法检出限和定量限均优于标准要求。 系统控制器：CBM-20A 脱 气 机： DGU-20As 输 液 泵 ：LC-20AD 柱 温 箱： CTO-20AC 自动进样器 SIL -20AC 检测 器：：CDD-10Avp 色谱 工 作站：LCsolution Version 6.82 1.2分析条件 色谱 柱： Shim-pack IC-C4(150 mmx4.6mm l .D.， 7 um， 岛 津 (上海)实验器材有限公司， P/N：228-41616-91) 流 动 相 甲磺酸淋洗液， c(CH4OsS) = 2.5mmol/L 流速 1 mL/min 柱 温 ： 30°℃ 进样体积：25uL 洗脱方式：等 度 洗脱 抑 制电流： 10mA 1.3标准溶液的配置 将胆碱化合物标准物质用15 mmol/L甲磺酸溶液配制成浓度为 0.2 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L、2.5 mg/L、5.0 mg/L 的标准工作溶液，待上机分析。 1.4样品前处理方法 准确称取10g(精确至0.001g) 混合均匀的液体试样于 50 mL 比色管中，加入1.7 mol/L 的盐酒 液15mL，加盖，混匀后放入70℃±2℃水浴中水解3h(每30 min摇一次)。水解液冷却至室温，转移至50mL 容量瓶并用水定容至刻度，混匀。再用水稀释50倍，取稀释后的溶液约15 mL过0.45 um 水性滤膜和 C18 固 相萃取小柱，弃去前3mL，收集洗脱液待测。 ■结果讨论 2.1专属性 图11月 胆碱 溶液色谱图(1.0mg/L) 表1专属性相关信息 化合物名称 与前峰分离度 与后峰分离度 信噪比 (S/N) 检出限 (mg/L) 胆碱 3.627 6.344 559.53 0.006 如图1和表1所示，胆碱与系统峰分离度良好，在标准GB 5413.20-2022中(15其他)，当液体 试 样称样 量 为10g时，方法检出限为 0.5 mg/100 g， 则根据1.4前处理的稀释倍数计算溶液检出限为 0.02 mg/L， 本方 法进样 25 uL 相对于标准参考方法进样100 uL的情况下，仍 然优 于 标准要求。 2.2线性范围 取1.3的标准工作溶液，按照1.2分析条件进 样 分析，以目标物浓度为横坐标，目标物 峰 面积为纵坐标，以 外标法绘制标准曲线，所得校准曲线线 性 关系良好，线性相关系数 r= 0.9999。曲线结果如下图、线 性 方程及相 关系数如下表2所示。 2胆碱校准曲线 表2校准曲线相关信 息 化合物名称 相关系数(r) 准确度(%) 检出限 (mg/100 g) 定量限 (mg/100 g) 胆碱 0.9999 98.8-103.3 0.145 0.485 2.3重复性结果 取 0.5 mg/L、1.0 mg/L、2.5 mg/L三种浓 度 的胆碱标准工作溶液重复进 样 6次，考察仪器重复性。结果表明，胆碱离子保留时间相对标准偏差在0.009~0.011%间，峰面积的相对标准偏差在0.31~1.37%间，方法重复性良 好，仪器精密度良好，结果见表3。 表3 重 复性 测 试(n =6) 化合物名称 RSD% (0.50 mg/L) RSD%(1.00 mg/L) RSD%，(2.50 mg/L) R.T. Area R.T. Area R.T. Area 胆碱 0.011 1.37 0.011 1.14 0.009 0.31 2.4实际样品测试及加标回收率结果 图3实际样品色谱图 按照1.4的前处理方法处理样品和加标样品，三个水平加标浓度如下表4所示。结果表明，各水平的加标回 收率在92.5~95.4%之间，相对标准偏差 RSD% 在0.55~0.76% 之间。实际样品中胆碱的浓度及加标回收率见表4。 表4实际样品中胆碱浓度和 加 标回 收 率(n =6) 化合物名称 加标量 (mg/100 g) 平均样品浓度 (mg/100 g) 加标后样品平均浓度 (mg/100 g) 平均回收率(%) RSD(%) 胆碱 12.5 11.3 22.9 92.5 0.61 25.0 35.1 95.4 0.76 37.5 47.0 95.3 0.55 计算公式为：X=_((C c X ×\v×f×100) m×1000 式中： X ——试样中胆碱的含量，单位为毫克每百克(mg/100g)； C ——由标准曲线得到的试样溶液中胆碱的浓度，单位为毫克每升 mg/L； V ——定容的体积，单位为毫升(mL)； ——一 禾 稀释倍数； 100 ——换算系数； m ——试样的取样量，单位为克(g))； 1000 ——换算系数。 计算结果保留三位有效数字。 结论 本文利用岛津离 子 色谱仪，建立一种简便、快速、准确检 测 婴幼儿食品和乳品中胆碱的测 定 方法。该方法采 用外标法定量，保留时间和峰面积重复性良好。加标回收实验中，胆碱的回收率在92.5~95.4%之间，回收及 精密度良好。该方法操作简捷，且本方法中检出限、线性、重复性等均优于标准相关要求。 岛津应用云