花生油中食品检测方案(免疫亲和小柱)

背景黄曲霉毒素是一类化学结构类似的化合物，是黄曲霉、寄生曲霉产生的次生代谢产物，它们存在于土壤、动植物、各种坚果中，特别容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麦等粮油产品，是霉菌毒素中毒性最大、对人类健康危害极为突出的一类霉菌毒素。为了避免“毒从口入”的情况，纳谱分析的SelectCore AFT Total免疫亲和柱成为检测黄曲霉毒素的有效工具。适用范围本方法参照GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定 第三法 高效液相色谱-柱后衍生法，适用于谷物及其制品、豆类及其制品、坚果及籽类、油脂及其制品、调味品、婴幼儿配方食品和婴幼儿辅助食品中AFT B1、AFT B2、AFT G1和AFT G2的提取与检测。实验结论纳谱分析的ChromCore 120 C18可以将4种黄曲霉毒素有效分离，并且花生油样品也没有杂质干扰；4种黄曲霉毒素的加标回收率均大于95%。实验谱图 花生油中黄曲霉毒素总量的提取与检测 背景 黄曲霉毒素是一类化学结构类似的化合物，是黄曲霉、寄生曲霉产生的次生代谢产物，，它们存在于土壤、动植物、各种坚果中，特别容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麦等粮油产品，是霉菌毒素中毒性最大、对人类健康危害极为突出的一类霉菌毒素。为了避免“毒从口入”的情况，纳谱分析的 SelectCore AFTTotal 免疫亲和柱成为检测黄曲霉毒素的有效工具。 适用范围 本方法参照 GB 5009.22-2016食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定第三法高效液相色谱-柱后衍生法，适用于谷物及其制品、豆类及其制品、坚果及籽类、油脂及其制品、调味品、婴幼儿配方食品和婴幼儿辅助食品中 AFT B1、 AFT B2、AFT G1 和 AFT G2的提取与检测。 实验步骤 1、溶液配制 磷酸盐缓冲液：称取 8.00 g氯化钠、1.20g磷酸氢二钠、0.20g磷酸二氢钾、0.20g氯化钾，用900 mL水溶解，用盐酸调节 pH至7.4，用水定容至 1000 mL。 2、样品制备 称取5g试样(精确至 0.01 g) 于50mL离心管中，加入20 mL 乙腈-水溶液(84+16)，涡旋混匀，超声20 min， 在 4000 r/min 下离心 10 min， 准确移取4mL上清液，加入46mL磷酸盐缓冲液，混匀，备用。 3、固相萃取方法 SelectCore AFT Total 免疫亲和柱3mL (1)亲和柱预处理：取出亲和柱，恢复至室温(22-25℃)，亲和柱连接于注射器下，打开下端堵头，将柱内保存液流尽； (2)上样：移取样品制备中的溶液注入注射器筒中，调节下滴速度，控制样液以 1 mL/min~3 mL/min 的速度稳定下滴； (3)淋洗：待上样液滴完后，往注射器筒内加入2×10mL水，以稳定流速淋洗免疫亲和柱，待水滴完后，抽干亲和柱； (4)洗脱：准确加入 1.5 mL 甲醇洗脱亲和柱，控制1 mL/min~3 mL/min 的速度下滴，再抽干亲和柱，收集洗脱液于 2 mL 容量瓶中，加水定容，过 0.22 u.m 尼龙针式滤器，供检测用。 4、液相色谱-光化学柱后衍生器-荧光检测器条件 Column： ChromCore 120 C18 5 um Dimension： 4.6×250mm Mobile Phase： 47/53 v/v 甲醇/水 Flow rate：：11.0mL/min Temperature： 30°C Injection： 50 uL 光化学柱后衍生器：254nm Detection： Ex： 360 nm Em： 440nm 图14种黄曲霉毒素标准品、花生油样品、花生油样品加标对比图 加标回收率 峰序号 化合物 加标量 加标回收率 1 黄曲霉毒素 G2 3 ug/kg 99.76% 2 黄曲霉毒素 Gi 10 pg/kg 98.19% 3 黄曲霉毒素B2 3 ug/kg 96.08% 4 黄曲霉毒素B1 10 pg/kg 98.41% 实验结论 由实验谱图可以看出，纳谱分析的 ChromCore 120 C18可以将4种黄曲霉毒素有效分离，并且花生油样品也没有杂质干扰；4种黄曲霉毒素的加标回收率均大于95%。 纳谱分析NanoChrom纳谱分析技术(苏州)有限公司Phone： E-mail： customerservice@nanochrom.com Web： www.nanochrom.com