牛奶中地塞米松检测方案(浓缩仪)

自动化样品前处理解决方案-RKFT-F005 解决方案 牛奶和奶粉中地塞米松的检测 全自动固相萃取；高效液相色谱-串联质谱；地塞米松 介绍 地塞米松是一种长效肾上腺糖皮质类激素，具有调节糖代谢，促进蛋白质转化为糖，提升血糖浓度，调节水盐代谢等作用。由于地塞米松具有抗炎、抗过敏、抗毒素等广泛的药理作用，因而常用于畜牧养殖中。然而动物生长过程中过量使用这种激素则会导致其在动物源性食品中的残留，影响人类健康。从体外大量摄入糖皮质类激素会造成体内激素的比例失调、糖代谢和无机盐代谢紊乱，可能会引起肥胖、高血压、骨质疏松、胎儿畸形等不良症状。因此，许多国家对动物源性食品中糖皮质类激素的最大残留量都做了规定。 本方法参考《GB/T 22978-2008牛奶和奶粉中地塞米松残留量的测定液相色谱串联质谱法》采用睿科MPE-16真空平行浓缩仪对提取液进行浓缩， Fotector Plus全自动固相萃取仪净化， EVA 80对洗脱液进行浓缩，高效液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定量。在3个不同添加浓度下，加标回收率为70%~90%之间，相对标准偏差小于10%，准确度和精密度均符合残留分析要求，可以满足牛奶和奶粉中地塞米松残留量的检测需要。 1.仪器与耗材 仪器和耗材 睿科Fotector Plus 高通量全自动固相萃取仪 睿科 MPE 真空平行浓缩仪 睿科 Auto EVA 80 云自动平行浓缩仪 高效液相色谱(HPLC) Agilent 1290 带质谱检测器(MS) Agilent 6470C1g固相萃取耳 (RayCure，500mg/6mL，货号： RC-204-16004) 乙腈(色谱纯)，超纯水 20%乙青水溶液：将20mL乙腈与 80mL水混合 2.样品制备 称取牛奶试样10g(奶粉样品羊 2g， 加入10mL水涡旋混匀30秒)于50mL离心管中，加入20mL乙腈，涡旋混匀1分钟，以8000r/min 冷冻离心10 min。移取上清液至浓缩杯中，用睿科 MPE 真空平行浓缩仪于45℃条件下浓缩至小于5mL， 转移至上样管中，待净化。 3.净化 先用 5mL乙腈和5mL 水活化 Cig小柱，然后以 1mL/min 的速度上样，用2mL 超纯水清洗样品瓶， 并过柱，接着用3mL 超纯水淋洗柱子。将柱子推干后，用 5mL乙腈洗脱，收集洗脱液。用睿科 EVA 80 全自动平行浓缩仪在45℃条件下浓缩至干，用1mL 20%乙腈水溶液定容，涡旋混匀，过滤膜上机检测。 表-1固相萃取净化条件 全自动固相萃取仪 固相萃取柱 C18(RayCure， 500mg/6mL) 淋洗 乙腈，水 洗脱 乙腈 序号 命令 溶剂 排出 流速(mL/min) 体积(mL) 时间miIL 1 清洗样品通道 乙腈 1.5 2 活化 乙腈 有机废液 3 5 2.1 3 活化 水 废水 3 5 2.1 4 上样 废水 2 5 3.1 5 清洗样品瓶 水 废水 60 2 1.7 6 淋洗 水 废水 3 3 1.4 7 气推 废水 80 30 2.2 8 清洗注射泵 乙腈 60 3 0.4 9 洗脱 乙腈 收集 2 5 2.9 10 气推 收集 2 2 1.4 11 气推 收集 20 10 1.3 12 结束 图-1. Fotector Plus 牛奶和奶粉中的地塞米松固相萃取净化方法 4.液质检测条件 4.1液相色谱条件 液相色谱柱： Eclipse SB Ci8， 1.8um × 50mm × 2.1mm((内径) 流动相及洗脱条件见表2 表-2流动相及梯度洗脱条件 时间(min) 流动相A(甲醇) 流动相B(0.1%甲酸水溶液) 0.00 40% 60% 5.00 40% 60% 5.50 50% 50% 7.00 50% 50% 7.10 60% 40% 8.00 60% 40% 8.50 75% 25% 9.00 100% 0% 10.00 100% 0% 平衡时间： 5min 流动相流速：0.4mL/min 色谱柱温度：40℃ 进样体积： 5pL 离子源 电喷雾源 电离模式 多离子反应监测(负)模式 喷雾针压力 45 psi 喷雾加热区电压 1500V 干燥气(氮气)温度 325℃ 干燥气流速 5L/min 鞘气温度 350℃ 鞘气流速 10L/min 毛细管电压 4000V 增益电压 600V 4.3 MRM 参数 No.序号 Compound Name化合物名称 PrecursorIon 母离子 Product lon子离子 Dwell 离子监测时间 Fragmentor裂解电压 Collision Energy碰撞能量 1 地塞米松 437.3 361.3* 50 110 10 307.3 50 110 31 带*的为定量离子对 5.结果与讨论 为了验证该方法的回收率，本实验向空白奶粉和牛奶试样中加入地塞米松标准品进行加标回收验证(n=3)。数据如表-2所示，加标回收率均在70%-90%之间， RSD 值控制在10%以内。说明该方法能够很好地用于牛奶和奶粉样品中地塞米松的检测。 表-3牛奶和奶粉加标回收率及 RSD 值(n=3) 样品基质 添加浓度/ug.kg 平均回收率/% RSD/% 牛奶 0.4 75.3 7.8 1.0 81.8 5.3 5.0 87.4 3.9 奶粉 4.0 70.5 6.6 10.0 76.8 5.3 20.0 89.3 4.2 6.总结 睿科MPE 真空平行浓缩仪适合于大体积提取液的批量浓缩，浓缩效率是单台旋蒸的10倍以上。独特的尾管设计方便用户观察剩余体积和定容。 睿科EVA 80全自动平行浓缩仪通过独特的氮吹针自动追随液面技术可以极大地减少氮气使用量，同时避免手动氮吹需要经常去调节氮吹针高度带来的麻烦。 睿科 Fotector Plus 固相萃取仪采用全自动操作，可以排除人员操作带来的误差，从活化到上样、洗脱一步到位，六通道同时进行；同时 Fotector Plus 能够实现高通量处理，最多一天能够处理180个样品，省时省力，真正为批量检测提供帮助。 真空平行浓缩仪浓缩 全自动固相萃取仪净化 全自动平行浓缩仪浓缩 RayKol 睿科集团股份有限公司 RayKol Group Corp.，Ltd. 网址： www.raykol.com 电话：400-885-1816 邮箱： info@raykol.com 本文中的信息、说明和技术指标如有变更，恕不另行通知◎睿科集团股份有限公司 2021年10月版 热线：址：www.raykol.com邮箱： info@raykol.com 采用睿科MPE真空平行浓缩仪对提取液进行浓缩，全自动固相萃取仪净化，EVA80对洗脱液进行浓缩，高效液相色谱-串联质谱仪测定。