室内空气可吸入颗粒物中苯并（a）芘检测方案(液相色谱仪)

文件号： FLYQ-AD-FA-01浙江福立分析仪器股份有限公司应用中心 浙江福立分析仪器股份有限公司应用中心FULI 室内空气中可吸入颗粒物上苯并[a]芘的测定 分析报告 一、参考标准 参照《室内空气质量标准室内空气中可吸入颗粒物上苯并[a]芘的测定》征求意见稿 二、方法介绍 采用二氯甲烷提取吸附在可吸入颗粒物上的苯并[a]芘，经净化、浓缩、过滤后使用配备荧光检测器的高效液相色谱仪分离测定。根据保留时间定性，外标法定量。苯并[a]芘的线性相关系数为 0.99989。 三、试剂和材料 3.1试剂 3.1.1 苯并[a]芘标准溶液 (p=100 ug/mL)：直接购买溶剂为乙腈的有证标准溶液。 3.1.2乙腈：色谱纯。 3.1.3 二氯甲烷：色谱纯。 3.1.4 正己烷：色谱纯。 3.1.5 二氯甲烷-正己烷混合溶液：二氯甲烷+正己烷=(3+7)，现用现配。 3.1.6 滤膜：玻璃纤维滤膜(或者使用石英滤膜) 3.1.7硅胶固相萃取柱： 1g/6mL(或者根据杂质含量选择适宜的固相萃取柱)。 3.1.8具塞比色管：10mL 或者 15 mL。 3.1.9有机相针式过滤器：0.45 um， 聚四氟乙烯或尼龙滤膜。 3.2仪器设备 3.2.1福立LC5090液谱色谱仪(HPLC)：具有梯度洗脱功能，并配备荧光检测器。 3.2.2色谱柱： Sunniest C18 色谱柱(4.6mm 250mm， 粒径为5 um) 或其他等效柱 3.2.3马弗炉：箱式电阻炉3.2.4水浴超声仪：数控加热超声波清洗器3.2.5 涡旋仪。3.2.6浓缩设备：平行浓缩仪。 (或使用氮吹浓缩仪、旋转蒸发或 K-D 浓缩仪等性能相当的浓缩设备。) 文件号： FLYQ-AD-FA-01 3.2.7 固相萃取净化装置。 3.2.8微量注射器，，10 uL、100uL。 3.2.9颗粒物采样器：粉尘采样器。 四、溶液配制 4.1标准溶夜配制 取一定量苯并[a]芘标准溶液(3.1.1)用乙腈逐级稀释至1 ug/mL，现用现配，并以乙腈为溶液制备标准系列，浓度分别为 2.5 ng/mL、5ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL， 上机测定。 4.2样品采集及保存 如采用玻璃纤维滤膜采样，需用铝箔纸将滤膜包好，并留有开口，放入马弗炉中400℃烘烤5h，去除有机物及增加滤膜韧性。注意滤膜不能有折痕。石英滤膜不需要烘烤。 采样时，采样器入口距地面高度为 0.5m~1.5m， 距墙壁距离不小于0.5m， 并避开污染源及通风口。 在测定日均浓度时，采用10L/min 的流量，连续采样20h。如采用间断采样方式，其次数不应少于4次，累积采样时间不应少于20h。 采样时，将已称量的滤膜用镊子放入洁净采样夹内的滤网上，滤膜毛面应朝进气方向。将滤膜牢固压紧至不漏气。采样结束后，用镊子取出，放入样品盒中保存。避光运输，运输过程温度过高(如超过30℃)时，建议采取加冰袋等适当的降温措施。样品在4℃密封避光保存时，需于7d内完成苯并[a]芘提取；在-15℃以下密封避光保存时，需于30d内完成苯苯[a]芘提取。 4.3 样品提取 将采样滤膜剪碎成8份后放入具塞比色管中，加入5mL二氯甲烷，盖好盖后使用涡旋仪混合均匀，在水浴中超声15 min 转至至浓缩装置中，重复提取步骤，共提取三次，合并提取液，待浓缩。超声时注意避光及控制温度(30℃以下)。 4.4样品农缩 如果样品不需要净化，将样品提取液用浓缩装置浓缩至近干(平行浓缩仪条件：35℃，12-3psi)，用乙腈溶解，定容至0.5mL，用针式过滤器过滤到样品瓶中，进样并测定。 如果样品需要净化，将样品提取液用浓缩装置浓缩至1mL，待净化。 4.5 样品净化 将硅胶固相萃取柱固定于净化装置，先用4mL二氯甲烷冲洗柱床，弃去流出液，然后用10 ml 正己烷冲洗柱床，当正己烷充满柱床后关闭流速控制阀，浸润 5 min 后打开控制阀，当正己烷液面下降至稍高于柱床时，关闭控制阀并弃去流出液。将浓缩后的样品提取液转移至柱内，用1mL二氯甲烷-正己烷混合溶液洗涤样品瓶2次，将洗涤液一并转移至柱内，接收流出液，继续使用8mL二氯甲烷-正己烷混合溶液洗脱，待洗脱液流过净化柱后关闭流速控制阀，浸润5min， 再打开控制阀，接收洗脱液至完全流出。将洗脱液按照4.4的方法浓缩至近干，用乙腈溶解，定容至0.5mL， 转移至样品瓶中待测。 五、测定 5.1典型谱图 "tninl 图1 100ng/mL苯并[a]芘标样谱图 5.2重复性实验 图2 50ng/mL苯并[a]芘标样重复性谱图 5.3标准曲线(相关系数：0.99989) 5.4检出限 图3检出限(2.5ng/mL)重复 以采集空气样品12000L计，本方法的检出限、定量限如下表所示： 组分名 含量 [ng/mL] 含量 [ng/mL] 含量 [ng/mL] 含量 [ng/mL] 含量 [ng/mL] 含量 [ng/mL] 含量 [ng/mL] 检出限 [ng/m3] 定量限 [ng/m3] 苯并[a]芘 2.31 2.56 2.63 2.61 2.69 2.72 2.68 0.036 0.144 5.5空白滤纸普图 tin 图4空白滤纸谱图 5.6空白加标回收率典型谱图及数据汇总 峰序 1 组分 保留时间[min] 峰高[uAU] 峰面积[uAl*s] 峰面积% 含量[ug/L] 苯[a]芘 25.488 5699 53387 100.00000 97.58825 5699 53387 100.00000 97.58825 图5 空白加标(100ng/mL))1谱图 序号 加标量 /(ng/mL) 测定值/(ng/mL) 回收率/% 1 5 4.61 92.2 2 4.55 91.0 3 4.80 96.0 1 20 17.87 89.3 2 17.52 87.6 3 17.31 86.6 1 100 95.57 95.6 2 95.77 95.8 3 97.59 97.6 5.7样品1典型谱图及两针分析结果 2 苯并[a]芘 25.633 65 441 0.07 图6 样品1谱图 5.8样品2两针典型谱图及分析结果 1 苯并[a]芘 25.660 57 446 0.07 2 苯并[a]芘 25.660 49 357 0.06 图7 样品2谱图 所测室内空气中苯并[a]芘的含量均在限值(1ng/m)以下，满足国标要求。 福立仪器在此参考GB/T 18883-2020《室内空气质量标准》征求意见稿，为大家提供了采用二氯甲烷提取吸附在可吸入颗粒物上的苯并[a]芘，经净化、浓缩、过滤后使用配备荧光检测器的高效液相色谱仪进行分离分析的测定方案。部分结果如下所示:图1  100ng/mL 苯并[a]芘标样谱图图2 50ng/mL苯并[a]芘标样重复性谱图图3 样品1谱图样品1平行测定两次，目标物苯并（a）芘含量平均值为0.075ng/m³，小于GB/T 18883-2020《室内空气质量标准》要求中的限量1ng/m³，符合要求。